连翘属植物化学成分的研究进展

连翘属植物化学成分的研究进展刘东雷，李会轻，徐绥绪沈阳药科大学中药系１１００１５连翘属为木犀科（Ｏｌｅａｃｅａｅ）植物，现已知有十几种，分布于世界各地（见附表）．国内连翘属植物可做药用的主要为连翘（Ｆｏｒｓｙｔｈｉａｓｕｓｐｅｎｓａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｖ...     

长链非编码RNA反义RNA 1靶向微小RNA-501-3p对食管癌细胞恶性生物学行为影响的实验研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胸腺生成素反义RNA 1(TMPO-AS1)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法2016年6月至2019年12月,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测20例食管癌组织和癌旁组织中lncRNA TMPO-AS1和微小RNA(miR)-501-3p的水平,食管癌Eca109细胞分为lncRNA TMPO-AS1干扰组(转染si-NC和si-TMPO-AS1);miR-501-3p过表达组(转染miR-NC和miR-501-3p);lncRNA TMPO-AS1过表达组(转染pcDNA和pcDNA-TMPO-AS1);lncRNA TMPO-AS1和miR-501-3p共抑制组(转染si-TMPO-AS1+anti-miR-NC和si-TMPO-AS1+anti-miR-501-3p)。噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术和Transwell实验分别检测食管癌Eca109细胞增殖、凋亡率、细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白水平,双荧光素酶报告系统验证lncRNA TMPO-AS1与miR-501-3p的调控关系。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差进行分析。结果食管癌组织组中的lncRNA TMPO-AS1水平(2.64±0.26)高于癌旁组织(1.00±0.09,t=26.657,P<0.05),miR-501-3p水平(0.44±0.04)低于癌旁组织(1.00±0.07,t=31.063,P<0.05);干扰lncRNA TMPO-AS1的Eca109细胞24 h增殖(0.36±0.03)低于si-NC组(0.39±0.03,t=2.121,P<0.05),48 h增殖(0.45±0.04)低于si-NC组(0.75±0.07,t=11.163,P<0.05),72 h增殖(0.57±0.05)低于si-NC组(1.16±0.09,t=17.191,P<0.05),迁移细胞数[(54.14±5.65)个]低于si-NC组[(113.02±9.87)个,t=15.531,P<0.05],侵袭细胞数[(47.69±5.01)个]低于si-NC组[(96.32±9.88)个,t=13.169,P<0.05],细胞凋亡率[(22.15±2.22)%]高于si-NC组[(6.98±0.69)%,t=19.576,P<0.05];过表达miR-501-3p的Eca109细胞48 h增殖(0.51±0.05)低于miR-NC组(0.77±0.07,t=9.067,P<0.05),72 h增殖(0.65±0.06)低于miR-NC组(1.15±0.09,t=13.867,P<0.05),迁移细胞数[(61.23±6.33)个]低于miR-NC组[(115.25±9.25)个,t=14.458,P<0.05],侵袭细胞数[(53.14±5.33)]低于miR-NC组[(98.32±8.47)个,t=13.543,P<0.05],细胞凋亡[(19.58±1.74)%]高于miR-NC组[(7.23±0.77)%,t=19.471,P<0.05],差异均有统计学意义。结论lncRNA TMPO-AS1通过靶向miR-501-3p促进食管癌细胞的恶性生物学行为,可被视为食管癌患者的潜在治疗靶标。     

不同肺动脉阻断时间对肺缺血性损伤程度的影响

目的探讨不同肺动脉阻断时间对肺缺血性损伤程度的影响，试图寻找一个相对安全的阻断时间。方法选用Wistar大鼠18只，随机分为空白对照组、30min阻断组及60min阻断组。制作大鼠原位肺动脉阻断模型，分别在气管插管后行常规肺门游离，空白对照组行持续灌注及通气，余下两组分别行30min及60min肺动脉及支气管阻断。检测缺血前、再灌注5rain后动脉血氧分压（PaO2）、肺组织湿干比重（W／D）、肺水肿情况及肺组织中丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）的含量。结果（1）30min阻断组的PaO3、湿干比重、MDA含量和SOD含量与对照组之间无显著差异（P〉0．05）；（2）60min阻断组的PaO2及SOD含量明显低于对照组（P〈0．05），湿干比重及MDA含量则明显高于对照组（P〈0．05）；（3）病理学结果提示60min阻断组肺水肿表现最为明显；（4）术后PaO2与湿干比重之间存在着负相关关系（r=-0．887，P〈0．05）。结论在不抗凝、不通气的情况下，暂时阻断大鼠肺动脉30min不会对肺功能有明显的损害。     

连翘属植物化学成分的研究进展

连翘属植物化学成分的研究进展刘东雷，李会轻，徐绥绪沈阳药科大学中药系１１００１５连翘属为木犀科（Ｏｌｅａｃｅａｅ）植物，现已知有十几种，分布于世界各地（见附表）．国内连翘属植物可做药用的主要为连翘（Ｆｏｒｓｙｔｈｉａｓｕｓｐｅｎｓａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｖ...     

大鼠呼吸机相关肺损伤自噬相关蛋白的表达及意义

目的探讨大鼠呼吸机所致肺损伤(VILI)过程中自噬相关蛋白的表达及意义。方法健康雄性SPF级SD大鼠30只,7周龄,体重(220±20)g,实施麻醉和气管切开术后分别接受不同潮气量(VT)的通气(通气时间均为4 h)。随机分为三组:对照组(A组,仅切开气管保留自主呼吸);常规通气组(B组,VT=10 ml/kg);损伤通气组(C组,VT=40 ml/kg)。A组在气管切开即刻,其他组在机械通气结束后放血处死动物,Western印迹检测肺组织Beclin1和LC3的表达,计算肺湿/干比重(W/D比值)、MPO活性及肺泡灌洗液中总蛋白含量,光镜下行白细胞计数。结果在大潮气量机械通气4 h后,肺组织中总蛋白、W/D、白细胞计数和MPO等指标均显著增加(P0.05);肺组织中Beclin1、LC3表达水平(1.21±0.11、0.91±0.11)均显著增加。结论自噬表达的增加参与了大鼠VILI的发生。     

胞裂蛋白9基因甲基化对食管癌细胞恶性进展的影响及机制

目的探讨胞裂蛋白9(SEPTIN9)基因甲基化对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用亚硫酸盐测序聚合酶链式反应(PCR)法检测正常食管上皮细胞HEEC与食管癌ECA109、KYSE150细胞中SEPTIN9基因甲基化水平。分别应用甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dc)(实验组)和二甲基亚砜(DMSO)(对照组)与细胞共培养72 h, 采用实时荧光定量聚合酶链反应及蛋白质印迹法(Western blot)检测SEPTIN9 mRNA及其蛋白, 采用噻唑蓝(MTT)法及膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素标记磷脂结合蛋白(Annexin V-FITC)凋亡实验检测增殖与凋亡, Transwell小室法检测迁移和侵袭。组间比较采用独立样本t检验。结果食管癌细胞ECA109、KYSE150的SEPTIN9基因甲基化程度高于正常食管上皮细胞HEEC[(83.69±7.15)%比(21.36±4.58)%;(84.26±6.97)%比(21.36±4.58)%, t=12.714、13.063, P<0.01]。实验组食管癌细胞ECA109、KYSE150 SEPTIN9...     

单肺通气方式对食管癌患者围手术期炎性细胞因子和氧自由基的影响

目的： 探讨单肺通气（OLV）方式对食管癌患者围手术期炎性细胞因子和氧自由基的影响。方法：拟行食管癌根治术患者40例,随机分为长时间组(Ⅰ组)和间断双肺通气组(Ⅱ组),每组20例。两组患者分别在麻醉诱导后(T₁)、OLV 45min(T₂)、90min(T₃)及术后2 h(T₄)采取外周静脉血,分别测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6、IL-8、丙二醛（MDA）浓度及超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：两组患者的TNF-α、IL-6和IL-8于T2时均明显上升（P<0.05）,Ⅱ组T₃、T₄时TNF-α、IL-6和IL-8均明显低于Ⅰ组（P<0.05）。两组患者的MDA于T₃、T₄时显著升高（P<0.05）,且Ⅱ组在T₃、T₄时显著低于Ⅰ组（P<0.05）;两组患者的SOD于T₃、T₄时显著降低（P<0.05）,且Ⅱ组在T₃、T₄时显著高于Ⅰ组（P<0.05）。结论：单肺通气期间间断双肺通气可减轻对肺组织的损伤。     

连翘中一个新木脂素单糖甙

从连翘果实中分离得到了五个单体化合物，根据理化性质和光谱分析鉴定为：对－羟基苯乙酸[p-hydroxyphenyl acetic acid](1),( )松脂素－β-D－葡萄糖甙[( )pinoresinol-β-D-glucoside]（2），（＋）表松脂素－4－β-D-葡萄糖甙[( )epipinoresinol-4-β-D-glucoside]（3），（＋）松脂素单甲基醚－β-D-葡萄糖甙[( )pinoresinol mono methyl ether-β-D-glucoside]（4），连翘甙[phillyrin](5)。其中3未见文献报告，1－4为首次从连翘中分离得到的已知成分。     

非小细胞肺癌患者血清蛋白质标记物的检测

目的 检测非小细胞肺癌患者(NSCLC)血清蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于NSCLC早期诊断的血清蛋白质指纹图谱模型.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测235例血清标本的蛋白质质谱,并结合生物信息学方法(支持向量机)分析数据.结果 筛选出3个质荷比(m/z)位于6628,9191和11412的蛋白质标记物,构建NSCLC早期诊断模型.联合3种潜在蛋白质标记物,经留一法交叉验证,区分NSCLC和正常健康对照的敏感性为98%,特异性为96%.盲法验证显示,该模型诊断NSCLC的敏感性为96.56%,特异性为94.79%.结论 SELDI-TOF-MS结合支持向量机建立NSCLC血清蛋白质指纹图谱模型是早期诊断NSCLC的一种敏感性高、特异性强的新方法,值得进一步研究与应用.     

自噬在顺铂诱导的食管癌细胞死亡中的作用

目的 观察自噬在食管癌EC9706细胞顺铂处理过程中的表达,探讨其表达与细胞死亡的关系.方法 对数生长期EC9706细胞与顺铂共同作用0、3、6、12、24 h后,Western blot法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达;自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)分别在顺铂前1 h、后1 h加入共同作用24 h,用CCK-8法和流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化.结果 顺铂处理细胞0、3、6、12、24 h后LC3相对灰度值为0.33±0.04、1.13±0.18、1.92±0.25、0.89±0.12、0.58±0.08;在顺铂加入前、后1 h加入3-MA细胞的抑制率分别为(33.58±2.45)%、(21.37±1.21)%,细胞凋亡率分别为(18.30±0.92)%、(12.80±0.61)%.结论 顺铂可以诱导食管癌EC9706细胞自噬,在顺铂给药前期,自噬对细胞有保护作用,可以延迟凋亡的发生;而在顺铂给药后期,自噬则可能作为一种细胞死亡程序,进一步促进细胞死亡.