响应面法优化β-胡萝卜素液体发酵培养基

用响应面法对三孢布拉霉（Blakeslea trispora）液体发酵β-胡萝卜素的培养基进行了优化。首先用快速登高路径逼近β-胡萝卜素最大产量区域,然后根据快速登高法的实验结果进行响应面实验。运用逐步回归分析法,获得β-胡萝卜素产量与柠檬酸、棉籽油、黄豆粉的最优回归方程,且分析了各因子间的交互效应。最后,通过岭脊分析（Ridge max）得到β-胡萝卜素产量最大值时的组合为：柠檬酸3.10 g/dL、棉籽油11.28 g/dL、黄豆粉2.54 g/dL。β-胡萝卜素产量可达1.02 g/L,比优化前提高了25%。     

里氏木霉 Rut C-30 液态发酵法生产纤维素酶

探讨了增强里氏木霉ＲｕｔＣ－３０产纤维素酶的方法，添加葡糖糖于培养基中，可促进菌体生长，但不能提高产酶；采用Ａｖｉｃｅｌ与麸皮复合碳源，以及使用ＫＨ２ＰＯ４－Ｋ２ＨＰＯ４缓冲系统控制发酵液ｐＨ，在摇瓶发酵条件下，可获得很高活力的纤维素酶，培养６ｄ，酶活可达到ＣＭＣａｓｅ１６６７～２０８４ｎｍｏｌ·ｓ－１·ｍｌ－１，ＦＰＡ１５０～２００ｎｍｏｌ·ｓ－１·ｍｌ－１．采用２．５Ｌ发酵罐培养，通过控制ｐＨ和溶氧，纤维素酶活力为ＣＭＣａｓｅ２２２３．８ｎｍｏｌ·ｓ－１·ｍｌ－１，ＦＰＡ１９４．５ｎｍｏｌ·ｓ－１·ｍｌ－１．     

曲霉CJ22-326内切壳聚糖酶的分离纯化和性质

使用75%乙醇沉淀、CM SepharoseFF离子交换色谱、SephacrylS 200凝胶过滤色谱和PhenylSepharoseCL 4B疏水色谱分离纯化技术,对曲霉CJ22 326发酵液中的内切壳聚糖酶进行分离纯化和性质研究.结果表明,纯化后的内切壳聚糖酶ChiB经SDS PAGE凝胶电泳鉴定为单带,其相对分子质量为27700.采用SephacrylS 200凝胶过滤色谱测定的相对分子质量为27800.ChiB作用最适温度为65℃,最适pH值为6.0,75℃保温1h还残留40%酶活.1mmol/LMn2+对ChiB有强烈激活作用,2mmol/LCu2+,Ag+,Hg2+,Cd2+,Fe3+有强烈抑制作用.ChiB作用的最适底物为脱乙酰度95%的胶体壳聚糖.     

高产中性纤维素酶菌株的诱变选育和筛选方法

设计了一种根据水解透明圈与菌落直径之比(D／d)以初步判断菌株产酶活力大小的方法,发现菌株的液体发酵酶活的对数(lgE)和菌落透明圈直径与菌落直径之比(D／d)基本上呈线性关系.采用紫外线和γ射线对中性纤维素酶产生菌木霉ZC(39 U／mL)进行了反复诱变和大量筛选,得到了一株高产中性纤维素高产突变菌株BE40-39(99 U／mL),并对出发株ZC和突变株BE40-39的性状进行了比较.     

碳源对绿色木霉ZC产中性纤维素酶的影响

筛选得到一株高产中性纤维素酶的绿色木霉ZC,对其培养基中的碳源进行了优化,探讨了碳源的种类、混合碳源以及碳源与麸皮的比例对其产酶的影响,确定了以4 g/dL玉米秸秆粉、1g/dL麸皮为主的发酵培养基,此培养基中纤维素酶滤纸酶活可达321.12 U/mL.     

纤维素酶在麻棉混纺织物后整理中的应用

研究了纤维素酶对麻棉混纺织物后的整理工艺中几种关键因素对整理效果之间的关系。使用木霉９２－０１，通过固态发酵法产生纤维素酶，，酶处理后的麻棉混纺布料减量率为５％左右，减少了布面毛羽，且具有光洁的表面，布料的柔软性和质地得到提高。     

表面活性剂和抗氧化剂对三孢布拉霉合成β-胡萝卜素的影响

三孢布拉霉（Blakeslea trispora）是发酵生产天然β-胡萝卜素的优良菌种。实验研究了乳化剂OP、Span 20、Tween 80 3种非离子型表面活性剂对三孢布拉霉合成β-胡萝卜素的影响，确定了三者的最佳作用浓度分别为0．075％、0．05％和1％，β-胡萝卜素产量的最大增长幅度分别为15％、10％和50％。抗氧化剂Ethoxyquin对β-胡萝卜素产量的增长有显著作用，最佳浓度为0．025％，β-胡萝卜素产量的增长幅度可高达70％。     

耻垢分枝杆菌海藻糖合成酶基因TreS的克隆及其在大肠杆菌中的表达

耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)在环境胁迫下具有合成海藻糖的能力[1-2].实验采用PCR的方法,克隆了来源于耻垢分枝杆菌的一段核苷酸序列,与已报道的海藻糖合成酶有60%以上同源性,推测该基因的编码产物具有海藻糖合成酶的活性,为进行其功能验证而在大肠杆菌中进行了表达.目的蛋白以可溶性蛋白为主,约占细胞可溶性总蛋白48%.为目前相关报道的最高值.经活性测定,表达的重组酶无需复性,能够催化麦芽糖生成海藻糖,在20℃反应20 h对麦芽糖的转化率可达61%,具有较高的应用价值.     

纤维素酶在牛仔布后整理中的应用研究

以生物技术对织物进行后整理的角度出发，着重研究了纤维素酶对牛仔布的酶洗工艺，通过固态发酵法培养纤维素酶产生菌康氏木霉９２－０１，分离提取出纤维素酶，所制得的酶粉水解ＣＭＣ活性为２８００Ｕ／ｇ．通过正交实验，研究了各种主要因素对酶洗效果的影响，获得了较佳的工艺条件。     

Mg2+对三孢布拉霉合成β-胡萝卜素的影响

补加Mg2+对三孢布拉霉合成β 胡萝卜素及其生长的影响研究表明,在一定范围内,质量浓度低的Mg2+促进菌体生长,质量浓度高的Mg2+抑制菌体生长,但β 胡萝卜素比产量增加.发酵48h补加0.3g/dLMg2+,β 胡萝卜素产量增加40%.同时,补加Mg2+和β 紫罗酮比仅添加β 紫罗酮、β 胡萝卜素产量提高约11%.