肠道病毒71 VP1基因的原核表达及其抗血清的制备

目的克隆并表达重组肠道病毒71(EV71)VP1基因,进行抗血清的制备并检测抗血清效价。方法利用原核表达系统将PCR获得的VP1片段构建成原核表达载体pET32a(+)-VP1,诱导其表达VP1融合蛋白并利用包涵体纯化方法进行重组蛋白的纯化,将纯化的重组蛋白免疫新西兰兔制备VP1抗血清,ELISA检测抗体效价。同时构建真核表达载体,利用其在真核细胞中的瞬时表达检测抗血清的特异性。结果通过克隆获得VP1原核表达载体,IPTG诱导VP1蛋白表达并纯化,SDS-PAGE结果显示重组蛋白表达且纯化浓度较高,将重组蛋白乳化后免疫新西兰兔3次,取血检测抗血清的效价,ELISA结果显示抗体效价为1∶64 000,利用所构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-VP1表达VP1对抗血清进行检测,Western blot结果表明抗血清可较好的与VP1特异性结合。结论制备具有免疫原性的VP1蛋白及其效价较高的抗血清,为进一步研究抗EV71诊断方法、血清学诊断试剂盒及抗病毒疫苗的研制奠定基础。     

辐照猪皮与金因肽联合在儿童烧伤创面治疗中的应用

目的：观察辐照猪皮与金因肽在儿童Ⅱ度烧伤治疗中的作用。方法：治疗组清创后应用辐照猪皮与金因肽覆盖创面;对照组应用磺胺嘧啶银锌霜＋金因肽覆盖创面。临床选择65例患者（总共127个创面）,包括浅、深Ⅱ度烧伤,临床观察创面愈合时间、应用辐照猪皮与金因肽对全身情况的影响,后期瘢痕增生情况。结果：治疗组比对照组创面愈合时间明显缩短,治疗组明显优于对照组（P〈0.05）;患者未出现过敏反应和其他不良反应,后期随访瘢痕增生少。结论：辐照猪皮与金因肽联合治疗儿童Ⅱ度烧伤创面,可促进创面上皮化,明显缩短创面愈合时间,瘢痕增生少,疗效可靠。     

经睑缘切口颧脂肪垫双向悬吊中面部提升术的临床疗效

探讨经睑缘切口颧脂肪垫双向悬吊中面部提升术在面部衰老患者中的应用效果。方法 选择 2020年6月-2022年6月秦皇岛市第一医院医学美容科收治的65例中面部衰老患者为研究对象，随机分为A组 （n =32）和B组（n =33）。A组予以经睑缘切口颧脂肪垫双向悬吊中面部提升术，B组予以颧脂肪垫单向悬 吊中面部提升术，比较两组鼻唇沟皱纹严重程度、面部整体美容效果及并发症发生情况。结果 两组术后 1周皱纹严重程度比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；A组术后6个月2级占比高于B组，4级占比低于B组 （P ＜0.05）；A组术后6个月GAIS评分优于B组（P ＜0.05）；两组并发症发生率比较，差异无统计学意义 （P＞0.05）。结论 通过经下睑缘切口颧脂肪垫双向悬吊中面部提升术能够获得更好的美容效果，术后瘢 痕隐蔽，创伤小，恢复快，安全可靠，能够有效提高中面部的年轻化美容效果。     

快速分析和鉴定肿瘤抗原研究

γδT细胞是近10多年来人们新认识的一种T细胞亚群,尽管其在抗原识别及其对多数肿瘤细胞的细胞毒作用中所独有的特性而受到越来越多学者的关注,但目前尚未发现可用于肿瘤免疫治疗靶点的γδT细胞所识别的肿瘤抗原。如何发现和快速分     

扩张器植入治疗气管瘘12例分析

目的：解决气管插管拔管后气管瘘修复问题。方法：对于气管瘘缺损的患者,利用软组织扩张器植入,扩张皮瓣法修复缺损。结果：术后患者瘢痕不明显,无气管狭窄患者。结论：扩张皮瓣法修复气管瘘缺损能使瘢痕减小,防止气管狭窄,外形更加美观。     

A组牛轮状病毒基因工程亚单位疫苗的初步研究

目的构建轮状病毒外膜蛋白VP4、VP7基因与大肠杆菌LTB蛋白基因的重组表达载体,研究重组表达蛋白的免疫原性,为研制犊牛腹泻基因工程亚单位疫苗奠定基础。方法克隆A组牛轮状病毒临床分离株CHLY的VP4、VP7基因和大肠杆菌LTB基因,插入pET32a中构建了4个原核表达载体pET32a／VP7、pET32a／VP4、pET32a／VP7-LTB、pET32a／VP4-LTB,转化到BL21（DE3）中进行表达纯化,纯化蛋白与弗氏佐剂混合免疫10w龄雌鼠,在实验期间对雌鼠进行交配,对其所产乳鼠用150μL10^-6.5／0．1mL TCID20的轮状病毒进行攻毒以研究重组蛋白免疫原性和攻毒保护性。结果重组蛋白在大肠杆菌BL21（DE3）中以包涵体的形式存在,Bandscan扫描分析结果显示,它们分别占菌体总蛋白的35％、20％、30％、18％,利用Ni-NTA Agarose在变性条件下成功纯化得到高纯度重组蛋白。10w龄雌鼠免疫试验表明rVP4-LTB组激发了最强的免疫反应,rVP4组次之,rVP7-LTB组略高于rVP7,各个免疫组问的差异性不显著（P〉0．05）,各实验组IgG抗体水平显著高于空质粒对照组（P〈0．01）。雌鼠所产乳鼠的攻毒实验表明,免疫组雌鼠所产乳鼠腹泻率为13．35％～23．8％,腹泻持续时间为48h～72h,较空质粒对照组明显降低,腹泻症状较轻且症状持续时间明显缩短。四个重组蛋白组攻毒保护率为76．2％～86．7％,rVP7-LTB、rVP4-LTB两组略高于rVP7、rVP4组,但相互间差异不显著（P〉0．05）。结论重组蛋白具有较好的免疫原性,被免疫雌鼠体内产生的中和性抗体可以经被动免疫过程传递至子代,并为仔鼠提供保护。本研究为犊牛轮状病毒基因工程疫苗的研究奠定了一定的基础。     

重组人表皮生长因子与纳米银敷料联合治疗局部冻伤创面临床观察

冻伤是我国北方冬季长见病之一,冻伤部位多为双手双足和双耳暴露部位,除全身治疗外,创面处理一直没有理想的外用药物,传统外用药包括一些冻疮膏,璜胺嘧啶银等,效果均较差,致使许多较严重的冻伤患者为了保全生命不得不采取截肢（指趾）手术,造成残疾,影响生活及劳动。我科应用重组人表皮生长因子（rhEGF）加纳米银敷料联合治疗冻伤创面40例,并同璜胺嘧啶银治疗的40例进行疗效比较,认为rhEGF加纳米银敷料组的效果较好,报告如下。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子与纳米银敷料联合治疗深Ⅱ度烧伤创面的临床观察

目的:探讨重组人酸性成纤维细胞生长因子(recombinant human acidic fibroblast growth factor~rh-aFGF)与纳米银敷料联合应用治疗深Ⅱ度烧伤创面的疗效。方法:深Ⅱ度烧伤创面患者98例,随机采用自身对照选择相同深度的两个创面分为应用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)与纳米银敷料联合应用治疗组(简称治疗组);应用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)与凡士林纱布治疗(简称对照组)。结果:与对照组比较,治疗组创面愈合时间明显缩短。差异有统计学意义(P<0.05),抑(杀)菌效果显著。结论:重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)与纳米银敷料联合应用治疗深Ⅱ度烧伤创面能明显促进深Ⅱ度创面愈合,有效抑制或杀灭烧伤创面病原菌,明显缩短深Ⅱ度烧伤创面愈合时间。