D2-43病毒E蛋白在酵母细胞表面的展示

目的：在酵母细胞表面展示登革2型病毒43株(D2—43)的E基因，探索利用酵母表面展示系统建立DNA改组筛选平台的可行性。方法：通过RT-PCR扩增获得D2-43的E基因，将该基因亚克隆至T载体后，再克隆至酵母表面展示载体pYDI，于酿酒酵母EBY100中利用半乳糖进行诱导表达。表达产物采用间接免疫荧光法和FACS进行检测。结果：酵母表面展示产物可与D2-43的腹水抗体特异性地结合；在半乳糖诱导后24h，展示E蛋白的酵母细胞百分数达22．07％。结论：本研究为建立基于酵母表面展示系统的DNA改组筛选平台奠定了基础。     

登革3型病毒prM-E和NS1多基因重组质粒DNA免疫原性增强效果观察

目的　观察登革 3型病毒的prM E和NS1基因重组质粒DNA混合免疫对免疫原性的增强作用 ,为登革DNA疫苗混合免疫提供实验依据。方法　将登革 3型病毒的prM E和NS1基因重组质粒DNA分别混合及单独免疫BALB/c小鼠 ,采用中和试验及MTT法检测免疫小鼠血清中和抗体及脾细胞特异性CTL(cytotoxicT lymphocytes)杀伤率。结果　混合重组质粒DNA免疫组与单一prM E基因重组质粒DNA免疫组均在末次免疫后第 14天检测到中和抗体 ,在第 33天达到高峰 ,为 1∶32。在末次免疫后第 4 1天 ,当效靶比为 4 0∶1时 ,混合重组质粒DNA免疫组的特异性CTL杀伤率为 15 % ,而 2个单质粒DNA组分别为 10 .9%和 12 .4 %。结论　重组质粒DNA混合免疫可同时诱发小鼠产生体液免疫和细胞免疫 ,而且细胞免疫应答具有一定的增强作用 ,但没有出现特异性CTL杀伤率的协同增强效果。     

AlphaLISA检测新型冠状病毒

目的 建立均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)快速检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2).方法 采用新型冠状病毒抗体偶联发光微球,生物素标记另一抗体,以及链霉亲和素偶联感光微球构建新型冠状病毒AlphaLISA检测体系.采用SARS-CoV-2真核表达抗原和灭活病毒对AlphaLISA方法进行评价,并与商业化ELISA试剂盒进行比对.结果 确定单抗1#与多抗组别作为新型冠状病毒AlphaLISA检测的抗体对,AlphaLISA对新型冠状病毒抗原的检出限为0.39 ng/ml,具有较好的重复性,批内差1.90％～8.93％,批间差1.75％～9.04％,对不同临床样本的检测具有较好的耐受性,与ELISA试剂盒相比对灭活病毒的检测敏感性更高.结论 AlphaLISA可实现对SARS-CoV-2的高效快速检测.     

显微超声技术在根中下1/3取断针的疗效及策略

目的：分析在根管显微镜下应用超声技术取出根管中下1/3断针的临床效果,提出预防措施。方法：收集5年来门诊根管预备断针发生在根中下1/3的患者36例,均在显微镜下用超声根管工作尖取断针。结果：36例根管内断针取出29例,失败7例,成功率为80.5%,4例建立旁路,1例拔除,2例留内观察。结论：根管显微镜下应用超声技术取出根管内断针相对安全有效。     

不同职业老年人的社会现状及医疗保健

为研究各类职业老年人的社会问题及医疗保健情况,旨在为规划老年人口事业、制定老年人口政策提供依据。我们于1989年12月至1990年8月对泸州市所辖市中区的城乡不同职业老年人的社会问题及医疗保健方面的状况进行了调查。对象与方法调查对象为60岁及其以上的老年人。内容包括一般情况,家庭关系,生活条件,工作情况,健康状况     

促进审稿规范化提高刊物学术质量

审稿是审稿人对稿件的创新性、科学性、学术性、实用性等方面做出全面、客观、公正的评价,为作者的修正提供宝贵建议,也为编辑的进一步工作提供有力的支撑和极具参考价值的意见.因此建立一支动态的高水平、高效率、公正的审稿人队伍,是促进编辑的编撰工作,把好刊物质量关、提升其学术层次,保证科技学术期刊质量和健康发展的关键.     

汶川特大地震灾区映秀镇的媒介生物监测

目的了解汶川特大地震对病媒生物及相关传染病产生的影响，及时掌握地震灾区病媒生物种类、密度动态，为病媒生物性疾病风险评估提供可靠依据。方法对鼠、蚊、蝇密度进行大范围的横断面调查，对生活区帐篷、垃圾点和厕所蝇密度进行每日监测。鼠密度监测采用鼠夹法，蝇密度监测采用粘蝇板法和目测法，蚊类密度监测采用诱蚊法和目测法。结果监测结果显示，目前地震灾区鼠和蚊密度非常低，蝇类的密度总体上控制在参考指标以下，但厨房、厕所和生活垃圾处理存在问题，部分地点蝇类密度较高。结论要注意加强对安置点居民的健康教育，并进一步做好居民安置点的消毒及蚊、蝇监测工作。     

干扰素致红皮病1例

患者,男,17岁。主因发现HBsAg(+)5 d入院。患者于查体时发现HBV-M:HBsAg(+),HBeAg(+),HBcAb(+),HBV-DNA:3.65×107拷贝/m l,肝功:ALT 138 U/L,AST 47 U/L,TB il:34.5μmol/L。无乏力、纳差、肝区疼痛等不适,以病毒性肝炎乙型收住我科。查体:体温37℃,脉搏80/m in,呼吸20/m in,血压13.8/7.2 kPa。皮肤巩膜轻度黄染、全身皮肤无皮疹及出血点,心、肺及腹部检查未见异常。诊断:病毒性肝炎,乙型,慢性,轻度。给予重组人干扰素α-2b注射液(天津华立达生物工程有限公司;生产批号:20020909)肌注,500万U 1/d抗病毒治疗。注射12 d后患者感发冷、发热呈稽留热型,体温持续在39℃左右,伴头痛,全身关节疼痛,无咳嗽、咳痰、胸闷、胸痛和气短等症状。查体:颜面、颈部及躯干部潮红并可见淡红色皮疹,皮疹为麻疹样压之退色,有叶片状脱屑,反复发作,伴有明显瘙痒。颈部淋巴结肿大。眼结合膜充血;口腔红肿、咽充血,咽部可见白色荚膜及溃疡、疼痛,吞咽时症状加重,扁桃体Ⅱ度大,右肺下野可闻及细湿啰音,胸部X线摄片示:右下肺...     

登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用

目的探讨登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用。方法首先通过mfold3.2软件对登革4型病毒5′端RNA二级结构进行预测,确定了3个突变位点：SLB1,缺失位于短茎环82-87位5′UAR环化序列,并破坏其保守茎环结构;SLB2,在次环引入突变破坏其环状结构（M77G/C）;SLB3,突变仅涉及核苷酸,不破坏该次环二级结构（M77-78AG/GA）。然后在含有海肾荧光素酶（Renilla Luciferase,R·luc）报告基因的复制子（DEN-R·luc2A-RP）基础上,利用重叠PCR构建上述突变体。将突变体（包括相关的阳性和阴性对照复制子）分别线性化并体外转录成RNA后,取等量各转录体RNA,以脂质体法分别转染BHK-21细胞。通过间接免疫荧光（IFA）、RT-PCR、R.luc报告基因技术和实时定量RT-PCR对突变体的复制和翻译水平进行检测。结果SLB1突变体的翻译水平并未受到显著影响,但其复制水平出现显著下调。SLB2突变体的翻译水平亦未受到显著影响,但其复制水平受到完全抑制;SLB3突变体的复制和翻译水平均受到了完全抑制。结论登革4型病毒5′非编码区SLB元件对基因组RNA复制和翻译具有重要的调控作用。     

登革1型病毒广州06株基因组全长感染性克隆的构建与鉴定

目的:构建本室新分离的登革1型病毒广州06株基因组全长感染性cDNA克隆,为深入研究登革病毒致病机制奠定基础.方法:根据登革1型病毒广州06株基因组全序列中单一酶切位点设计特异引物,分别扩增并克隆5个病毒亚基因组cDNA片段,将其逐一拼接连入pWSK 29低拷贝质粒载体,获得病毒全长cDNA克隆,并将其体外转录为RNA,再转染细胞获得恢复病毒.进一步通过RT-PCR扩增病毒5′和3′非编码区序列和特异性间接免疫荧光对其恢复病毒进行鉴定.结果和结论:构建获得登革1型病毒广州06株基因组全长感染性cDNA克隆,其恢复病毒与野生型病毒具有相似的生物学特性.