人TPO成熟肽N端196个氨基酸的表达、纯化及生物学活性研究

人ＴＰＯ成熟肽Ｎ端１９６个氨基酸的表达、纯化及生物学活性研究刘丽田生礼赵建增谢宝树冷爱军血小板生成素（Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ），ＴＰＯ基因工程方面的工作目前开展的较多，但因对其结构与功能，如糖基化与生物学活性及半衰期的关系了解不够，在设...     

重组人肿瘤坏死因子α衍生物11a与原型肿瘤坏死因子α对小鼠的急性毒性比较

重组人肿瘤坏死因子α衍生物１１ａ与原型肿瘤坏死因子α对小鼠的急性毒性比较刘丽赵建增李景泰谢宝树冷爱军杜孝元（中国人民解放军空军总医院分子生物学研究中心，北京１０００３６）原型肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）具有良好的抗肿...     

一种新型人TNFα对人肝癌裸鼠移植瘤的抗瘤作用

用人肝癌Ｂｅｌ７４０２瘤株建立了人肝癌裸鼠移植瘤模型，探讨新型重组人ＴＮＦａ对这种移植瘤的抗瘤作用，结果表明，ｒｈＴＦａＤ１１ａ和原型重组人ＴＮＦａ的抑瘤率在３０％左右时，后者后用的活性产闰数是前者的２倍；两者用量相同时，前者的抑产经比后者提高２３个百分     

血小板生成素转导鼠T淋巴细胞的增殖和分化

为探讨ＴＰＯ（血小板生成素）基因导入对Ｔ细胞增殖和分化影响的规律,将编码人ＴＰＯ的质粒ＤＮＡ６０μｇ用脂质体包裹后,经肌肉途径转导入Ｂａｌｂ／ｃ小鼠体内。用ＣＤ４和ＣＤ８的特异性抗击 标记小鼠各种免疫组织中的Ｔ细胞,借助流式细胞术分析它们的组成和变化。结果发现ＴＰＯ基因导入使骨髓中的成熟和未成熟Ｔ细胞数量在经过短期下降后全部大幅度增多,胸腺未成熟Ｔ细胞增加;而脾脏和血液循环中成熟Ｔ细胞增多,特别是     

银屑病中的细胞与生长因子

银屑病是一种以上皮增生、分化失控和大量Ｔ淋巴细胞浸润为特征的难治性皮肤病，但它的发生原因仍不清楚，这是不能形成准确而有效治疗方法的主要原因。在病变组织中，Ｔ淋巴细胞、角朊细胞、成纤维细胞及内皮细胞呈现出异常的增殖活性和生物学紊乱，而正常调控机制失控。本文以各种细胞以及细胞因子在其中的变化和作用为轴线，讨论银屑病急需解决的理论问题。１　银屑病中的细胞生物学１．１　银屑病皮肤中角朊细胞的异常生化改变角朊细胞异常增生是银屑病的主要组织学特点之一，同时出现多种生物化学改变。与健康皮肤的细胞相比，银屑病角…     

血小板生成素基因治疗的研究

血小板生成素（Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ），又称巨核细胞生长发育因子，能特异性地作用于巨核细胞增殖和分化阶段［１］。研究表明，当向正常动物供以重组蛋白ＴＰＯ时，能明显提高动物体内血小板计数［２］。这一发现为治疗那些由于接受高剂量化疗和放疗而遭受生命危险的血小板减少症病人提供了可能性。鉴于重组ＴＰＯ对病人来说属外源蛋白，具有不同程度的副作用，本文以基因治疗技术探索一条新的ＴＰＯ给药途径，即把基因导入动物体内，使动物自身表达ＴＰＯ，维持高水平血小板。１　材料与方法１．１　质粒　本室利用ＲＴ…     

免疫因子对血小板生成素的负调节作用

鉴于ＴＰＯ 在体内长期表达会给机体带来一些负面影响，以及在较长期作用模式下，机体血小板的生成能力与ＴＰＯ 在体内水平的不一致，本文对免疫因子与ＴＰＯ 表达及其生物活性间的关系进行了研究。在ＴＰＯ ｃＤＮＡ 转移到体内后，血液中ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－ α和ＩＬ－２ 迅速升高。其中，ＩＦＮ－γ与血小板计数呈明显负相关， 在血小板计数回落后保持在对照水平的 ９～１２ 倍；ＴＮＦ－α仅在第 １ 周内与之成正相关，且可达对照水平的１２０ 倍，此后局限于对照水平；ＩＬ－２ 升高幅度较小，与ＴＰＯ 的变化相一致。另外，血液中Ⅱ型组织相容性抗原分子也呈升高趋势，与ＩＬ－２ 的变化类似；而Ⅰ型分子与ＴＮＦ－ α的变化相似。结合基因转移后的组织学特点，可以认为ＩＦＮ－γ在血小板生成过程中起主要的逆向调节作用，而机体出现了以巨噬细胞、内皮细胞和Ｔ 淋巴细胞活化为特点的免疫学改变     

白细胞介素-18(IL-18)的免疫生物学特征及其抗肿瘤作用

白细胞介素 - 1 8(IL- 1 8)是近年发现的一种多功能免疫调节蛋白。它在体内分布广泛 ,而且作用呈多样化 ,除了诱导多种细胞因子产生、上调 Fas配体的表达、介导 T细胞及 NK细胞的细胞毒活性、增强机体自然防御和抗肿瘤机能等作用外 ,IL- 1 8也是一种炎性因子 ,还与骨代谢、神经和造血功能有关 ,因而在疾病预防和治疗方面有重要意义。本文根据国内外的研究结果 ,综述了 IL- 1 8的免疫生物学特征及在抗肿瘤中的研究。1　IL- 1 8是多功能因子虽然 IL- 1 8早期以 IFN-γ的诱导因子命名 ,但根据目前众多的研究结果 ,它实际上是一个具有多…     

血小板生成素注射用于小鼠肿瘤辅助性治疗的初步研究

本文利用ＴＰＯ基因注射治疗接受环磷酰胺化疗后小鼠的血小板及白细胞减少症。将克隆于ｐｃＤＮＡ３的ＴＰＯ质粒按不同剂量注射到试验组２７只小鼠后肢内侧肌肉内，其中３只小鼠注射空质粒。三日后其中接受ＴＰＯ基因注射的１２只小鼠每只腹腔内注射环磷酰胺２ｍｇ（１００ｍｇ／ｋｇ体重），其余１２只不化疗的小鼠作为基因对照组；另设化疗对照组动物１５只，按相同剂量注射环磷酰胺。每周尾静脉采血，检测白细胞和血小板水平。结果基因＋化疗组的两项血液指标在化疗后两周内明显优于单纯化疗组，无毛发脱落；化疗组和注射空质粒组动物绝大多数发生脱毛现象，并有７只动物死亡。两周后进行第二次环磷酰胺攻击，结果化疗组的死亡数达８只，存活动物体况很差，基因＋化疗组动物尚无任何不良表现。此时两组的血液指标已无明显差异，提示在基因注射后ＴＰＯ的有效表达期在２－３周。本研究发现ＴＰＯ基因注射后，不但动物血小板和白细胞水平提高，而且其它化疗后的不良症状也得到改善，提示ＴＰＯ有着更为广泛的作用     

大肠杆菌表达的rhTNFα D11a中试发酵工艺研究

初步研究了以可溶形式在大肠杆菌中表达的重组人肿瘤坏死因子α（ｒｈＴＮＦα）衍生物１１ａ中试水平的发酵工艺，包括工程菌（ＤＨ５α／ｐＢＶＴＮＦΔ）密度、诱导时间及宿主菌对菌体收得率、目的蛋白表达量及其比活性的影响，建立了较稳定的中试发酵方法，以此条件５０Ｌ罐发酵的工程菌，１００００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ菌体收得量可达湿重１４ｇ／Ｌ培养物；目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的３１％；比活性约为１×１０８Ｕ／ｍｇ蛋白。