上海地区汉族优秀游泳运动员ACE基因I/D多态性研究

目的:探讨上海地区汉族不同水平优秀游泳运动员ACE(血管紧张素转化酶)基因I/D多态性的分布特点。方法:采用PCR方法,对上海地区85名汉族优秀游泳运动员和90名汉族普通人的ACE基因I/D多态性进行检测。结果显示,上海地区汉族优秀游泳运动员的ACE基因的基因型和等位基因频率与上海和成都地区汉族普通人无明显差异(P>0.05);上海地区汉族游泳运动员和普通人以及成都地区汉族普通人的基因型和等位基因频率均与高加索人群存在高度显著性差异(P<0.0001),表现出明显的种族差异性。7名上海地区汉族国际健将ACE基因均为II型,运动水平越高的组别,II基因型和I等位基因频率越高,提示具有II基因型或I等位基因频率高的运动员经过多年运动训练,具有成为优秀运动员的可能,特别是II基因型的运动员可能性更大。     

肺癌细胞和蛙皮素抑制树突状细胞的产生和功能

目的：了解肺癌细胞株及蛙皮素对树突状细胞（DC）产生及功能的影响。方法：树突状细胞由健康人外周血单个核细胞CD14^ ，在完全细胞培养液中加入1000U／ml GM-CSF和1000U／ml IL-4,培养7天获得，肺癌细胞株CRL－5815，CRL－5826，Bombesin和Bombesin受体拮抗剂加入培养液中，Annxin V检测DC凋亡；流式细胞仪检测CD40，CD86，CD83，CD80，HLA－DR阳性表达。结果：培养7－10天后的DC前体细胞表达高水平的HLA－DR CD80 CD86 CD83 CD40。肺癌及蛙皮素可导致DC前体细胞凋亡，而蛙皮素受体拮抗剂可部分保护蛙皮素致DC凋亡的作用。加入肺癌细胞株或蛙皮素与DC共培养时明显抑制上述细胞表型的表达和DC刺激同种异体T细胞的增殖能力，当加入蛙皮素受体拮抗剂时，DC细胞表达HLA－DR CD80 CD86 CD83 CD40明显增加，接近DC正常对照组。结论：肺癌细胞株及蛙皮素可导致DC的凋亡，抑制树突状细胞的产生和功能。     

肺癌血浆VEGF、血循环癌细胞及树突状细胞相互关系的研究

目的　分析非小细胞肺癌 (NSCLC)患者VEGF血浆含量与癌细胞血道转移及树突状细胞 (DC)成熟的关系。方法　外周血获自正常人、肺部良性疾患以及NSCLC患者。血循环中的癌细胞和DC按已建立的流式细胞仪定量分析技术进行检测。血浆VEGF含量采用ELISA方法测定。结果　 12例正常人及 13例肺部良性疾患的血浆VEGF平均含量分别为 15 .7和 13.2 pg /ml,而 12 3例NSCLC患者的血浆VEGF平均含量为 140 .8pg /ml,显著高于正常人及肺部良性疾患者 (P <0 .0 0 1)。正常人及肺部良性疾患者外周血中癌细胞检测均为阴性 ,而 6 9例NSCLC患者血样中 32例阳性 ,阳性率为 46 .4% ,阳性患者的癌细胞平均含量为 0 .471× 10 6/L。正常人及肺部良性疾患者外周血中DC含量分别为 2 9.0和 2 2 .0× 10 6/L ,而 5 4例NSCLC患者的DC含量为 15 .9× 10 6/L ,显著低于正常人及肺部良性疾患者 (P <0 .0 5 )。若以VEGF≤ 5 6pg/m1作为正常值 ,则VEGF增高的NSCLC患者外周血中癌细胞阳性率及其含量明显增高而DC含量显著降低 ,其中以III、IV期患者最为突出。结论　NSCLC患者血浆VEGF增高具有促使癌细胞血道播散和抑制DC成熟的效应。     

非小细胞肺癌中hRAD17基因表达与淋巴结转移的关系

目的　研究非小细胞肺癌 (NSCLC)中hRAD17基因的表达频率及其与淋巴结转移的关系。方法　应用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测了 5 0例肺癌标本的hRAD17表达。以人NSCLC细胞株SPC A1作为阳性对照 ,癌周正常肺组织作为阴性对照。结果　 5 0例肺癌中 38例hRAD17阳性表达 ,阳性率为 76 %。 38例阳性病例中有纵隔淋巴结转移者为 31例(81.5 % ) ,而 12例阴性表达病例中仅 3例 (2 5 % )有纵隔淋巴结转移 ,两组间差异具有统计学显著意义 (P <0 .0 1)。结论　hRAD17基因在肺癌中高表达 ,其阳性表达与淋巴结转移密切相关。     

正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞相关指标的表达

目的检测人正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞（BASC）相关指标,明确BASC是否在人肺组织中存在及其组织定位。方法采用组织免疫荧光方法将经过脱蜡、抗原修复好的组织切片通过5％脱脂奶粉溶液封闭检测,再通过先后加入一抗、二抗以及染核、封片等在荧光显微镜下观察,判定结果时可见合成蛋白复合物（SPC）和八聚体结合转录因子4（OCT4）阳性表达细胞呈绿色,Clara细胞分泌蛋白（CCSP）阳性表达细胞呈红色,而SPC／CCSP或CCSP／OCT4双阳性细胞呈黄色,细胞核呈蓝色。结果在人正常肺组织中可检测到SPC、CCSP及OCT4。免疫荧光检测显示,正常肺组织中均可检测到SPC、CCSP双阳性表达细胞,呈现BASC的表型特征,且均表达OCT4,定位于细支气管一肺泡导管连接处。在人肺腺癌组织中亦可检测到BASC样癌干细胞,在30例肺腺癌组织中26例同时检测出SPC及CCSP,属检测出BASC病例。18例同时检测出OCT4表达。结论人正常肺组织中可检测到BASC,且在肺腺癌组织中可检测到具有BASC表型特征的癌干细胞,提示人肺腺癌可能源自BASC的恶性转化。     

围手术期血循环中肺癌细胞与预后的关系

[目的]分析可手术性非小细胞肺癌 (NSCLC)患者术前和术中癌细胞血道播散及其对患者预后的影响。[方法]术前或术中采集外周血或肺静脉血 ,应用流式细胞仪进行癌细胞定量测定。患者于手术后定期随访 ,并与检测结果作统计学分析。[结果]对44例NSCLC患者血样进行了检测 ,共发现16例存在癌细胞 ,阳性率为36.4 % ,癌细胞平均含量为0.286×106/L。其中60岁以下年龄组的癌细胞阳性率显著高于60岁以上年龄组(P<0.05) ,鳞癌患者的癌细胞含量显著高于腺癌患者 (P<0.05)。但25%的腺癌患者在术前已出现癌细胞播散 ,术中阳性率为42.9%,癌细胞阳性率与病期无明显相关性 ;鳞癌患者术前未发现阳性病例 ,术中阳性率为57.1% ,阳性者以Ⅲ、Ⅳ期为主。随访结果显示 ,血循环癌细胞阳性和阴性组的中位生存期分别为15个月和>30个月 ,2年生存率分别为31.3%和71.4 % ,具有统计学显著差异 (P<0.05)。[结论]肺癌患者在手术前或手术过程中可发现血液中存在癌细胞 ,此类患者的预后差、生存期短。     

人骨髓间充质干细胞的体外培养及诱导分化

目的 建立一株能在体外长期培养并具有多向分化潜能的人骨髓间充质干细胞(HBMSC)。方法 利用差异贴壁法从人肋骨中分离纯化HBMSC,在体外通过地塞米松、胰岛素诱导分化为脂肪细胞,用VitC、β-磷酸甘油、地塞米松诱导下可分化成骨细胞,裸鼠体内分化为软骨样细胞及成骨样组织,采用流式细胞仪检测细胞表面CD31、CD34、CD45、CD9、CD90、CD105和CD106。以2.5×10~7细胞接种于裸鼠皮下进行致瘤实验,用DY-NAL REU-SSO反向杂交法检测HLA。结果 细胞已连续培养超过30代仍能稳定生长,细胞表面特性为CD105、CD106阳性,而CD31、CD34、CD45、CD9、CD90为阴性。在体外能诱导成脂肪细胞、成骨细胞。无致瘤性,在裸鼠体内能形成软骨细胞及骨样组织。结论 培养了一株能在体外长期培养及具有多向分化潜能的人骨髓间充质干细胞。     

抗人肺腺癌细胞系SPC—A_1单克隆抗体与蓖麻毒素A链交联物的体内体外抗肿瘤活性研究

本文报告了抗人肺腺癌细胞系SPC—A_1单克隆抗体LAC_(122)为IgM型免疫球蛋白,经与蓖麻毒素A链联接后形成免疫毒素IgM—RIA,以SPC—A_1细胞和正常人血白细胞为靶细胞,用ELISA法测定,IgM—RIA的免疫活性较联接前的LAC_(122)仅有轻微下降,但与正常人血白细胞比较,IgM—RIA明显地表现为     

缺氧诱导人肺癌细胞株表达血管内皮生长因子

目的：检测缺氧对人肺癌细胞株表达ＶＥＧＦ的影响及其机制。方法：４株人肺癌细胞在低氧环境下处理１８ｈ后,运用半定量ＲＴ－ＣＰＲ及免疫组化技术分别检测ＶＥＧＦｍＲＮＡ及蛋白的表达。结果：低氧处理后人肺癌细胞ＶＥＧＦｍＲＮＡ明显高于未处理之肺癌细胞并在免疫组化上得到了进一步证实。结论：低氧可上调人肺癌细胞表达ＶＥＧＦ。     

痰液K-ras P53基因检测对肺癌的辅助诊断价值

目的；76例疑为肺癌病人痰液中P53和K-ras最常见突变位点进行了检测，以了解分子生物学检测方法是否对肺癌的诊断具有辅助诊断价值。方法；痰液处理方法：痰液0．5毫升加入痰处理液制备细胞沉淀液，酚氯仿提取DNA；SSCP-PCR银染和RFLP-PCR方法对痰液中P53、K-ras突变情况进行检测。结果：在确诊的76例肺癌病人中，P53突变率为40．8％，K-ras突变率为25%，突变与肺癌类型，疾病分期未见明显相关．其中有29例病人痰液普通脱落细胞学检测阴性，痰液P53或K-ras突变阳性，最后经，奸支镜刷检、活检部分经过手术证实为肺癌，有12例经手术证实为1-1期的相对早期的肺癌。结论；痰液SSCP-PCR、RELP-PCR方法检测癌基因突变具有简便、实用、准确、可行的特点。对部分疑为肺癌而痰液脱落细胞学检测阴性的病人具有一定的辅助诊断价值。值得临床进一步开展深入的研究。