中枢神经系统不同部位来源的神经干细胞在体外生长特性的比较

目的 比较相同发育阶段中枢神经系统不同部位来源的神经干细胞在体外的生长特性。方法 胚胎小鼠(E14)于无菌条件下分别分离并收集皮层、纹状体、间脑、中．后脑和脊髓，各部分制备成单细胞悬液，接种在添加有纤维细胞生长因子(FGF)的无血清培养液内，神经干细胞克隆生成后，经免疫细胞化学方法鉴定细胞特性，并在相同条件下进行传代，相差显微镜下观察克隆生成和细胞的迁移特性。结果 在添加有纤维细胞生长因子的无血清培养液中，少量接种的单个细胞会增殖并形成悬浮于细胞培养液中的细胞克隆。这些克隆具有生成新克隆并分化成神经元和胶质细胞的能力。在相同发育阶段，皮层、纹状体、间脑均可生成悬浮的克隆，其中皮层生成的速度最快，纹状体、间脑较慢，中．后脑、脊髓生成克隆的速度最慢；生成克隆后，皮层克隆的贴壁能力最差，贴壁的克隆少有细胞从其底部迁出，纹状体、间脑克隆较易贴壁，贴壁克隆底部有明显的细胞迁出，中．后脑、脊髓生成的克隆不易悬浮，很快贴壁，在贴壁克隆的底部有大量的细胞迁出。结论 在无血清培养液中，神经干细胞可在体外增殖、传代并分化生成神经元和胶质细胞，不同部位来源的神经干细胞在体外生成克隆的速度和细胞迁移性不同，这可能同体内特定部位细胞的发育特性有关。     

音猬因子的功能受体斑片在培养神经干细胞中的表达

目的　观察在培养的神经干细胞内是否有发育调控分子———音猬因子 (sonichedgehog)功能受体———斑片 (patched)表达。　方法　神经干细胞克隆在体外培养传代后 ,用patched的特异性引物对培养的神经干细胞进行RT PCR分析 ,PCR产物经克隆测序后 ,用地高辛标记克隆的探针 ,对神经干细胞进行原位杂交分析。　结果　神经干细胞克隆内大量的细胞均可表达sonichedgehog的功能受体patched ,patched阳性细胞间未见明显差别 ,克隆边缘与中央的patched分布也未见明显差别。　结论　sonichedgehog信号传导路可能在神经干细胞的增殖与分化过程中起重要作用。     

儿童极重症血小板增多症的临床病因研究北大核心CSCD

极重症血小板增多症(extreme thrombocytosis,EXT)指外周血中的血小板计数(PLT)>1000×10^(9)/L[1,2]。通常认为绝大多数EXT患者患有克隆性血液系统疾病,因炎症很少对血小板产生如此大的影响,但既往关于EXT的研究表明情况并非如此,尤其对于儿童患者[3,4,5]。本研究探讨儿童EXT的可能病因并通过对血小板极度增高的患儿进行追踪随访和基因筛查,以发现隐匿的肿瘤性疾病的频率。     

次声暴露对大鼠血视网膜屏障超微结构的损害

目的 观察次声暴露对大鼠血视网膜屏障超微结构和通透性的作用。方法 将15只Sprague-Dawley(SD）大鼠分为：实验组12只，给予8Hz,130dB基础噪音的次声暴露，2h/d，分别于暴露后1，7，14及21d，用20g/L戊巴比妥钠腹腔麻醉动物，10min后取其眼球，均以硝酸镧（La)作为示踪剂，采用镧苯滴注固定法制备电镜样品。对照组3只，亦置于次声舱中2h/d，但不接受次声暴露，结果 在次声作用下，暴露1d时La的渗漏无明显变化，7d时沉积在内节间，到达光感受器细胞核层，14d时在神经细胞间隙出现La颗粒，21d时到达神经及玻璃体，而形态学改变并不明显，主要是代谢方面的变化，如线粒体肿胀，内质网扩张，糖原颗粒的沉积，核周周隙增宽等。提示随时间的延长，血视网膜屏障的损害加重。结论 次声可影响一定程度的血视网膜屏障通透性，而致视觉功能损伤。     

豚鼠听性脑干诱发电位对重复麻醉及不同麻醉剂的反应

目的:探讨短期内动物麻醉后听性脑干反应auditorybrainstemre-(sponse,ABR重复测试的可行性和理想的ABR测试麻醉剂。)方法:将11只豚鼠按随机数字法分为846合剂组(5只),戊巴比妥钠组(6只),并对动物间隔12h连续进行次麻醉,846合剂组用5846合剂腹腔注射麻醉,戊巴比妥钠组用20g/L的戊巴比妥钠溶液腹腔麻醉,并对其中846合剂组3只6只耳)和戊巴比妥钠组4只8只耳)每次((麻醉后进行ABR测试。并比较不同时间点及两种麻醉药麻醉诱导时间和维持时间以及ABR听阈和90dBSPL负短声刺激时Ⅱ波潜伏期、波幅、Ⅰ～Ⅲ波间期的变化。结果:不同时间点ABR测试各参数差异均无显著性意义;戊巴比妥钠组和846合剂组相比,90dBSPLⅡ时波潜伏期明显延长(F=5.477,P=0.037),而听阈、Ⅱ波波幅及Ⅰ～Ⅲ波间期差异无显著性意义。在不同时间点,麻醉诱导时间差异无显著性意义,而随着麻醉次数的增加,麻醉维持时间逐渐缩短(F=20.46,P=0.001);戊巴比妥钠组和846合剂组相比,麻醉起效迅速,实验后动物苏醒也快。结论:重复麻醉对豚鼠ABR测试无明显影响;846合剂是一种较为理想的豚鼠ABR测试麻醉剂。     

咽鼓管表面活性物质对气压损伤豚鼠中耳及听阈的影响

目的：探讨人工咽鼓管表面活性物质(Eustachian tube surfactant，ETS)对气压损伤性中耳炎(Barotitis media，BM)的治疗作用，为临床应用提供理论依据。方法：经低压舱上升实验建立气压损伤性中耳炎动物模型。成功建模豚鼠30只，于建模后的第1天，左侧中耳内注入1mL人工ETS治疗，右侧对照注人1mL生理盐水。结果：1周后观察比较两组鼓膜状况(x^2=8．801，P&;lt;0．05)、鼓室渗出(x^2=9．796，P&;lt;0．05)、听阈恢复(x^2=9．810，P&;lt;0．05)，人工ETS组明显好转，与生理盐水对照组差异有显著性意义。结论：人工ETS对气压损伤性中耳炎具有治疗作用。     

次声作用对大鼠视网膜Mueller细胞及血管内皮细胞增殖力的影响

目的 探讨次声作用对大鼠视网膜Mueller细胞及血管内皮细胞增殖力的影响。方法 采用原代培养的大鼠视网膜Mueller细胞和猴视网膜血管内皮细胞（细胞系），8Hz，130dB次声连续辐照2h，采用四唑蓝比色法实验方法分别于次声作用后4h,1d,2d,3d,4d和5d6个时间点珧吸收度值，绘制增殖曲线，进行统计分析。结果 8Hz,180dB次生作用2h对原代培养的大鼠视网膜Mueller细胞增殖能力有影响，在次声作用后4h,1d,2d和3d4个时间点，其光吸收度值与对照组相比差异显著。而猴视网膜血管内皮细胞则对次声不太敏感，仅在次声作用后2d与对照组的差别有显著性意义。结论 8Hz,130dB次声对原代培养的大鼠视网膜Mueller细胞有一定的损伤作用。     

缺氧促进视网膜微血管内皮细胞的增殖及C-fos癌基因表达

目的研究缺氧在视网膜新生血管形成中的作用。方法采用细胞计数及免疫组化的方法，将培养的视网膜微血管内皮细胞接种于24孔板,分别放入正常及缺氧（50ml·L-1O2）环境中，37℃进行培养。不同时间后进行计数及抗FOS蛋白抗体染色。结果缺氧组的细胞计数均高于正常组（P＜0.01）,抗FOS蛋白抗体染色，缺氧组明显强于正常组。结论缺氧可以明显促进视网膜微血管内皮细胞的增殖．其机理是通过诱导C－fos癌基因的表达而起作用。     

咽鼓管表面活性物质对气压损伤豚鼠中耳及听阈的影响

目的探讨人工咽鼓管表面活性物质(Eustachiantube surfactant,ETS)对气压损伤性中耳炎(Barotitis media,BM)的治疗作用,为临床应用提供理论依据.方法经低压舱上升实验建立气压损伤性中耳炎动物模型.成功建模豚鼠30只,于建模后的第1天,左侧中耳内注入1 mL人工ETS治疗,右侧对照注入1 mL生理盐水.结果1周后观察比较两组鼓膜状况(χ2=8.801,P＜0.05)、鼓室渗出(χ2=9.796,P＜0.05)、听阈恢复(χ2=9.810,P＜0.05),人工ETS组明显好转,与生理盐水对照组差异有显著性意义.结论人工ETS对气压损伤性中耳炎具有治疗作用.     

视网膜Müller细胞在视网膜病变中的作用和研究现状

视网膜Müller细胞是视网膜内最主要的神经胶质细胞,它贯穿整个视网膜,包绕与联系视网膜上的各类神经细胞,从而与视网膜神经细胞发生多种功能的交互作用.Müller细胞不仅起着支持和营养神经元的作用,还包括维持细胞外离子的稳定及参与谷氨酸盐循环、突触传递等作用.近年来,随着对视网膜Müller细胞的深入研究,发现Müller细胞还参与多种病理和生理过程,并且在视网膜的各种疾病中都发现伴有Müller细胞的神经胶质增生反应.对视网膜Müller细胞的形态和生理功能作了描述和分析,并对在各种病理状况下Müller细胞发生的改变和目前对Müller细胞的研究现状作一综述.