细胞凋亡信息分子Fas、FasL和NF-κB在氟化物作用后破骨样细胞凋亡过程中的表达

目的研究氟化物作用后破骨细胞样细胞凋亡过程中细胞凋亡配体Fas、FasLFasLigand和核因子NF-κB的表达变化。方法在培养基中分别加入不同浓度的氟化钠培养破骨样细胞,以免疫组织化学染色方法观察细胞的Fas、FasL和NF-κB表达。结果Fas、FasL在破骨样细胞表达量随培养基中氟化钠浓度增高而增高;NF-κB的表达量随培养基中氟化钠浓度增高而降低,两者均具有剂量依赖关系。结论在氟化钠所致的破骨细胞凋亡过程中,Fas,Fas-L的表达随氟化物浓度增高而加强;而核因子NF-κB的表达随氟化物浓度增高而减弱,两者都具有剂量依赖关系。     

自体成骨细胞加同种异体骨复合移植的研究

目的：选择较理想的骨移植替代物。方法：抽取实验组家兔骨髓2mL分离出间质细胞，在特殊培养液中进行体外诱导．增殖成成骨细胞种植于同种异体骨表面进行培养4周后，将细胞和同种异体骨复合移植物植入实验兔节段性尺骨缺损中。另取12只家兔单纯植入同种异体骨作为对照组，观察16周。结果：经碱性磷酸酶染色阳性，Chfα1免疫组织化学染色阳性，Von Kossa染色显示骨小结，表明骨髓间质细胞在体外成功诱导成成骨细胞。动物实验表明植入体周同无炎性细胞浸润．伤口Ⅰ期愈合，术后7周开始出现骨痂，11周出现桥梁骨痂，术后16周达到骨性愈合。明显优于对照组。结论：此复合移植物生物相容性好，有较强的骨诱导作用，是比较理想的骨移植替代物。     

源于脾干细胞的破骨细胞诱导生成及培养

目的建立一种可以获得大量破骨细胞或破骨样细胞的方法，以便进行原发性骨质疏松有关破骨细胞的研究。方法C57雌性小鼠经尾静脉注射5-氟脲嘧啶后，取脾细胞悬液在含有rmIL-3，rhIL-6和胎牛血清(FCS)以及牛血清白蛋白(BSA)的α-MEM-琼脂半固体培养7d左右，获得脾脏造血干细胞集落；此集落再以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)诱导生成破骨样细胞。结果经活体观察、酒石酸-抗酸性磷酸酶(TRAP)染色、扫描电镜检查，证实所得细胞为破骨细胞。结论建立了一种获得大量破骨细胞或破骨样细胞方法，即源于脾干细胞的破骨样细胞的诱导生成及其培养。     

破骨细胞对成骨细胞作用的研究

目的：探讨破骨细胞及其亚细胞结构对成骨细胞生长和功能的影响。方法：在获取大量破骨细胞的基础上，以细胞生物学方法探讨破骨细胞及其产生骨吸收后，破骨细胞、细胞培养基和亚细胞结构对成骨细胞生长和功能、成骨细胞核结合因子Cbfα1表这的影响。结果：破骨细胞及破骨细胞产生骨吸收后，破骨细胞、细胞培养基和亚细胞成分对成骨细胞的生长和功能均有促进作用，可使成骨细胞的Cbfα1mRNA的表达明显增强。     

Notch信号通路在骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中的作用

MSC(Mesenchymal stem cell)具有多向分化潜能和自我增殖能力.在不同调节因子的作用下分化为多种细胞,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、成肌细胞、神经细胞和血管内皮细胞等[1-3].MSC向Osteoblast(OB)分化的过程受到多种通路的调控和影响,如Notch、Wnt、MAPK等信号通路.本文结合最新研究进展,重点综述了Notch信号通路在MSC向OB分化过程中的调节作用.     

照射时影响脉冲场凝交电泳测定DSB的因素

脉冲场凝胶电泳(PFGE)对受照细胞DNA双链断裂(DSB)的测定是一种新方法,但许多因素影响DSB与辐射的量效关系,为此对这些因素作了探讨。方法:CHO细胞为AA_8系,在有15％胎牛     

注入白细胞介素Ⅰ鼠的辐射防护作用——与脾集落形成单位的关系

人重组白细胞介素I(recombination interleukin-I,rlL-I)可以提高受到致死剂量照射鼠的生存率.作者用骨髓再植、干细胞体外培养、CFU-S24小时再植以及CFU-S处于细胞周期S期所占比例的方法对rIL-I进行了深入的研究.实验用B_6D_2F_1的雌性鼠.γ线照射,剂量率为0.4Gy/min,致死剂量为10.5Gy,亚致死剂量为6.5Gy.rIL-I为纯化的人类白细胞介素-1-α,鼠腹腔内注射75～200μg.对照组使用生理盐水.     

IL-21基因对肝癌细胞抑瘤效应的辐射增敏作用

目的：探讨外源性IL-21基因联合放射对肝癌HepG2细胞抑瘤效应的辐射增敏作用。方法：将Ad—IL-21腺病毒颗粒转染HepG2细胞系,进行6Gy”’Cs7射线照射,将细胞分为4组,包括空白对照组、Ad—IL-21组、照射组以及联合组,观察HepG2细胞的生长、细胞周期和细胞凋亡的变化。结果：与Ad—IL-21组和照射组比较,联合组HepG2细胞的抑制效应最显著,转染48h的抑制率明显高于转染24h和72h的抑制率。联合组HepG2细胞阻滞在G2期最多,凋亡细胞所占比例最高,转染24h和48h的凋亡率分别达到29．1％和33．1％。结论：IL-21基因联合放射对肝癌细胞的抑瘤效应具有辐射增敏作用,明显地抑制肝癌细胞的生长。     

金纳米颗粒修饰及其对肝癌细胞生长和辐射损伤的影响

目的：用巯基-聚乙二醇（SH-PEG）对金纳米颗粒（AuNPs）进行化学修饰（PEG-AuNPs）并分析其对肝癌细胞存活率和辐射对肝癌细胞作用的影响。方法制备的AuNPs用SH-PEG进行化学修饰,用透射电子显微镜观测PEG-AuNPs的大小及肝癌细胞对其的摄取,应用Cell Titer-Glo发光法和克隆形成实验分别分析PEG-AuNPs对肝癌细胞的生长抑制作用和辐射对肝癌细胞作用的影响。结果制备的PEG-AuNPs的尺寸分别为14．4 nm和30．5 nm。30．5 nm PEG-AuNPs更容易被肝癌细胞摄取,表现出明显地抑制肝癌细胞生长的作用和提高辐射对肝癌细胞的杀伤作用。结论 AuNPs经过SH-PEG化学修饰,30．5 nm PEG-AuNPs对肝癌细胞的生长抑制作用和提高辐射杀伤肝癌细胞的作用强于14．4 nm PEG-AuNPs。     

谷胱甘肽保护的金纳米团簇对HeLa细胞毒性研究

目的 探究由谷胱甘肽作为表面保护剂的金纳米团簇(GSH-Au NCs)对宫颈癌HeLa细胞株的毒性影响.方法 利用荧光分光光度计测定用含有GSH-Au NCs的培养基处理HeLa细胞后不同时间点的荧光强度,观察HeLa细胞对GSH-Au NCs在1、2、6、12、24 h内的摄取情况.同时采用BALB/c荷瘤小鼠进行体内实验,分别腹腔注射0.2 ml浓度为3 mmol/L的GSH-Au NCs和等体积的蒸馏水(对照组)后24 h取出肿瘤组织,通过电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)检测组织中的金元素含量以探究纳米团簇在肿瘤处随时间的摄取情况.最后用噻唑蓝(MTT)比色法研究不同浓度(0.003～0.3 mmol/L)的GSH-Au NCs处理HeLa细胞24、48 h的细胞毒性.结果 HeLa细胞对GSH-Au NCs的摄取率在24 h内不断升高,24h时达峰值73.13％.荷瘤小鼠实验表明,腹腔注射GSH-Au NCs 24 h后,肿瘤组织对GSH-Au NCs的摄取量(320±15) ng/g较对照组(腹腔注射蒸馏水)高,差异具有统计学意义(P＜0.05).用不同浓度的GSH-Au NCs处理HeLa细胞24 h,对细胞存活率有轻微影响,随浓度升高对细胞的抑制作用更为明显,GSH-Au NCs浓度为0.3 mmol/L时的HeLa细胞存活率降为对照组(GSH-Au NCs浓度为0)的86％(P＜0.05);处理48 h时,各浓度组的细胞存活率与对照组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 虽然GSH-Au NCs在体外和体内均易被细胞和肿瘤组织摄取,但其本身对HeLa细胞并无明显细胞毒性,可安全应用于影像、载药及靶向给药等生物医药领域.