1,25-二羟维生素D3对人胃黏膜上皮细胞恶性转化过程的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3(骨化三醇)在化学致癌剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的恶性转化过程中对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞生长、凋亡及Shh、Gli1基因表达的影响. 方法 MNNG诱导GES-1细胞作为对照组,诱导后用不同浓度(10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L)1,25-二羟维生素D3干预(实验组),采取四甲基固氮唑盐(MTT)检测实验组和对照组细胞增殖并确定实验组最佳药物浓度.分为GES-1细胞组、对照组和实验组,流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测各组细胞Shh、Gli1 mRNA基因的表达. 结果 MTT法显示,对照组细胞出现大量死亡,实验组给予10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L的1,25-二羟维生素D3干预后存活细胞较对照组增多(P＜0.05).取最佳药物作用浓度10-6 mmol/L为实验组,FCM测各组细胞7d的凋亡率分别为实验组(45.73±2.08)％、对照组(85.23±2.08)％、GES-1细胞组(4.9±0.91)％.与对照组相比,实验组细胞凋亡明显减少(P＜0.05).RT-PCR显示Shh mRNA在实验组(0.674 7±0.011 6)、对照组(0.661 6±0.0095)均表达(P＞0.05),Gli1 mRNA实验组(0.338 2±0.015 0)表达低于对照组(0.532 8±0.011 5)(P＜0.05). 结论 1,25-二羟维生素D3有阻止GES-1细胞恶性转化的作用,从而可达到延缓或阻止细胞恶变的目的.其机制可能与通过阻断Sonic Hedgehog(SHH)信号通路有关.     

MSCT对气管憩室的诊断价值

目的探讨多排螺旋CT(MSCT)对气管憩室的诊断价值。方法选取分析68例气管憩室的临床及影像学资料。结果本组68例共发现气管憩室82个,其中59例为单发,9例为多发(≥2个),单发占86.76%,多发占13.24%,多发气管憩室中5例为2个憩室,3例为3个憩室,1例为4个憩室;本组气管憩室大小不等,其中最大直径44.00 mm,最小直径1.50 mm,平均直径为26(23~35)mm。82个气管憩室形状多样,圆形或类圆形(囊腔样)为62个,气泡样10个,烧瓶样6个,凹槽样2个,三角样2个;MSCT能显示气管憩室与气管为单一细管或多个管道相通,其中2例气管憩室合并感染,本组68例中有慢性支气管炎、肺气肿或慢性支气管炎合并肺气肿的病例共为38例,占55.88%。结论MSCT可以清晰显示气管憩室与气管的通道、气管憩室的部位、数量、形状和内容物等情况,对气管憩室的诊断有重要价值。     

现阶段护理人员心理健康状况调查分析

目的 了解现阶段护理人员心理健康状况。方法 采用SCL-90症状自评量表及应对方式量表对256名护士进行调查。结果 护理人员SCL-90评分除在人际敏感因子上低于常模外，躯体化、抑郁、焦虑、敌对、恐怖、精神病性以及总分均高于常模（P〈0．05、P〈0．01）；非手术科室护理人员除躯体化、恐怖因子外SCL-90评分均优于手术科室（P〈0．05，P〈0．01）。护理人员积极应对评分显著低于常模，消极应对评分显著高于常模（均P〈0．01）。结论 现阶段护理人员心理健康状况不容乐观，应采取有效措施予以疏导、调整。     

在胃癌腹膜转移中IGFBP-2蛋白作用的研究

目的：探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2（IGFBP-2）在胃癌腹膜转移组织中的表达。方法：对35例外科切除胃癌标本的正常黏膜、肿瘤原发灶和腹膜转移灶进行IGFBP-2蛋白的免疫组化染色,并用计算机图像分析软件测定其积分光密度。结果：肿瘤原发灶中IGFBP-2蛋白表达水平比正常黏膜明显增高（P〈0.05）,腹膜转移灶中IGFBP-2蛋白表达较原发灶显著下调（P〈0.05）;正常黏膜与腹膜转移灶中IGFBP-2蛋白表达水平之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：IGFBP-2蛋白表达水平与胃癌细胞的生长呈正相关,而与腹膜转移程度呈负相关。     

小鼠耳蜗发育的形态学研究

目的：探讨小鼠耳蜗发育的特点及规律。方法：应用光镜对昆明种小白鼠耳蜗从胚胎第１０天至出生后第１４天的整个发育过程进行形态学研究。结果：小鼠耳蜗的整个形态发育过程可分为三个时期：⑴听泡发育期;⑵蜗管上皮增殖期;⑶耳蜗各部分结构的分化结构的分化期和发育成熟期。结论：小鼠在出生时,其耳蜗膜迷路的大部分结构成份已经形成,出生后则需进一步的分化发育,至出生后２周时才完全发育成熟。小鼠耳蜗管上皮的分化是从底周     

不同全麻药对小鼠周围神经电生理的影响

目的：探讨全麻药对小鼠周围运动神经和感觉神经的影响。方法：将50只小鼠分为5组，分别是用α-氯醛糖、戊巴比妥钠、氨基甲酸乙酯、水合氯醛、氯胺酮进行腹腔麻醉后，测定坐骨神经感觉神经动作电位(SNAP)和腓肠肌复合肌肉动作电位(CMAP)，并比较其潜伏期、波幅、传导速度。结果：氯胺酮组的SNAP和CMAP的传导速度都最快，而α-氯醛糖组的SNAP的潜伏期、波幅、传导速度都最差。结论：在实验性研究或临床应用周围神经电生理检测时，选用氯胺酮或戊巴比妥钠麻醉较为理想。     

siRNA沉默PPARα减弱羟喜树碱诱导的人结肠癌细胞凋亡

背景:多药耐药一直是遏制提高结肠癌化疗有效性的瓶颈问题。目的:探讨沉默PPARα能否减弱羟喜树碱诱导的人结肠癌细胞凋亡,从而阐明PPARα在羟喜树碱耐药中的潜在作用。方法:构建针对PPARα基因的siRNA干扰载体,并转染人结肠癌SW1116细胞,经G418筛选出稳定转染的细胞,以RT-PCR和蛋白质印迹法验证干扰效果。经羟喜树碱干预后,以MTT法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡。以定量RT-PCR检测不同浓度miR-506前体转染SW1116细胞后对PPARα下游调控靶基因mRNA表达的影响。结果:siRNA干扰载体Ⅲ的沉默效果最佳,PPARα mRNA和蛋白表达分别下调了约94.1%±3.4%和70.8%±8.6%。稳定转染siRNA的SW1116细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为(332±19)μg/L,亲本SW1116细胞为(152±12)μg/L。在相同浓度羟喜树碱的作用下,亲本SW1116细胞的凋亡率显著高于稳定转染siRNA的SW1116细胞(150μg/L:7.0%±2.5%对2.8%±1.6%;300μg/L:32.4%±7.1%对18.5%±2.7%)。miR-506前体下调HMGCS-2表达,上调FABP-2、CCND1和TGF-β1表达,其中上调CCND1的作用最为明显。结论:成功构建了针对PPARα的siRNA干扰载体;沉默PPARα能增强SW1116细胞对羟喜树碱的抵抗性,可能与下调HMGCS-2表达并上调FABP-2、CCND1和TGF-β1表达有关。     

羟基喜树碱富集结肠肿瘤干细胞样群体的初步研究

背景:肿瘤干细胞是临床上肿瘤耐药的主要机制,识别并靶向肿瘤干细胞为肿瘤治疗的研究带来了新的思路。目的:探讨在体外以化疗药物富集结肠肿瘤干细胞样群体的可行性。方法:应用前期实验中以药物浓度递增诱导法建立的羟基喜树碱(HCPT)耐药人结肠癌细胞株SW1116/HCPT,免疫荧光标记干细胞表面抗原CD133,Hoechst33342/PI双染流式细胞仪检测、分选侧群(SP)细胞,实时PCR检测干细胞相关和多药耐药相关基因表达。结果:亲代细胞株SW1116中CD133阳性群体和SP群体分别仅占2%和1%,耐药细胞株SW1116/HCPT中则高达7%和61%,多药耐药基因MDR1抑制剂维拉帕米可使两组SP群体均下降至接近0水平。SW1116/HCPT细胞SP群体中干细胞相关基因CD133、Nanog和多药耐药相关基因MDR1、MRP1、MRP2、MRP6 mRNA表达水平较非SP群体显著上调(P0.05)。结论:HCPT药物浓度递增诱导法可成功富集结肠肿瘤干细胞样群体,其SP亚群中存在于细胞相关和多药耐药相关基因高表达。     

miR-506在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的功能研究

目的探讨miR-506在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的潜在作用。方法首先通过PCR从基因组DNA中克隆出包含miR-506前体的片段,将其连接至miRNA表达载体pMIF-cGFP-Zeo中,测序进行验证。将构建成功的pMIF-miR-506转染至低表达miR-506的亲本细胞SW1116中,加入含G418的选择性培养基进行选择性培养。运用RT-PCR验证稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株中的miR-506的表达情况,MTT法检测稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株和亲本细胞SW1116对羟基喜树碱的敏感性差异,Annexin V/PI检测各自对羟基喜树碱的凋亡情况。结果测序结果表明hsa-miR-506的前体序列被成功地构建至miRNA表达载体pMIF-cGFP-Zeo中。TaqMan荧光定量PCR技术检测发现,相比亲本细胞SW1116,稳定表达绿色荧光的SW1116细胞克隆中miR-506的含量显著升高,约为33.7±8.3倍。细胞增殖试验表明稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株的IC50为(280±13)μg/L,而对照组SW1116的IC50为(152±12)μg/L。同时还发现在相同浓度的羟基喜树碱作用下,亲本细胞SW1116较稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株的凋亡细胞比率增高(150μg/L:7.8%±1.7%vs5.4%±1.2%;300μg/L:33.6%±3.9%vs18.2%±4.7%)。结论成功地构建了过表达miR-506的载体pMIF-miR-506;过表达miR-506能够增加SW1116对羟基喜树碱的抵抗性。