两种纯化玉米超氧化物歧化酶方法的比较

本文利用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤初步分离了玉米SOD,利用DEAE-52离子交换层析和金属螯合亲和层析分别纯化了SOD.其中经离子交换层析后的比活为3 304,纯化倍数为118,回收率为4.8%,基本达到电泳纯.经金属螯合亲和层析纯化后比活为8 597,纯化倍数为307,回收率为29.4%,达到了电泳纯.     

一株产海藻糖合成酶嗜中温芽孢杆菌的鉴定及其酶学性质

由长白山温泉附近土壤中筛选得到产海藻糖舍酶菌株，为革兰氏阳性菌，具有芽孢和鞭毛，其最适生长温度为55℃，对这一菌株进行生理生化指标测定。进一步对该菌株所产海藻糖合酶的酶学性质进行研究，酶反应最适作用pH值为7．0，在pH6．6～7．4时该酶稳定，最适作用温度为35℃，在25-45℃时该酶可稳定保存。     

小分子苦瓜多糖MCPⅡa的纯化及结构分析

利用酶解结合水溶醇沉提取水溶性的苦瓜多糖（Momordica charantia polysaccharide,MCP）,经Sevag法除蛋白、DEAE-纤维素离子交换、Sephadex G-100凝胶过滤获得活性多糖MCPⅡa。由高效凝胶渗透色谱检测可知MCPⅡa为均一多糖,平均分子质量为13.0 kD,单糖组分分析显示其单糖组成为鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖和阿拉伯糖（各组分物质的量比为12∶3.05∶19.89∶5.95∶56）。傅里叶红外光谱、核磁共振及刚果红实验发现其存在C1、C2、C3、C5连接,在水溶液中具有稳定的β-三股螺旋构象,扫描电镜下显示其为菱形晶体颗粒。     

白色链霉菌聚赖氨酸抑菌作用的研究

筛选到1株聚赖氨酸(PL)产生菌白色链霉菌(Strcptomyces albus).发酵液经过Ambcrlite IRC-50离子交换粗分离和Sephadex G-25凝胶层析精制,得到纯化的白色链霉菌聚赖氨酸(PL110).SDS-PAGE分析其分子量为5kDa.应用牛津杯法分析PL110对多种病原菌的抑制作用并测定最小抑菌浓度(MIC).抑菌稳定性实验表明,高温加热后Streptomyces albus所产生PL110的抑菌作用没有下降;其在低pH值条件下有较好的抑菌效果.最后,应用扫描电镜初步探索了聚赖氨酸的抑菌机理.     

胡萝卜多糖硫酸酯化修饰及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取胡萝卜粗多糖,经Sevage法与木瓜蛋白酶相结合法除蛋白后,以DEAE纤维素柱层析分离纯化得到具有抗氧化活性的多糖组分。用浓硫酸法对其进行硫酸酯化修饰,经红外光谱比和硫酸钡比浊法定性定量分析多糖酯化率。研究结果表明:当硫酸取代度为18.4%,即硫酸酯化率为2.94时硫酸酯化胡萝卜多糖的抗氧化活性比未修饰多糖增加1.5倍。     

一株海藻糖合成酶产生菌的筛选及初步鉴定

由长白山温泉附近土壤筛选得到菌株编号SH-110菌,分别利用TLC方法、HPLC法来确定该菌株所产的胞内酶能够利用麦芽糖作为底物来合成海藻糖,确定该酶为海藻糖合成酶,通过对该菌生物学特征鉴定,生理生化特征分析,初步鉴定该菌属于芽孢杆菌属(Bacillussp)。     

苦瓜多糖的分子修饰及抗氧化活性研究

目的通过羧甲基化及金属络合对苦瓜多糖进行分子修饰,比较不同修饰方法对其抗氧化活性产生的影响。方法采用水提醇沉法分离制备苦瓜粗多糖(Momordica charantia polysaccharide,MCP),以DEAE-52离子交换层析梯度洗脱获得4种苦瓜多糖组分(MCPⅠ,MCPⅡ,MCPⅢ,MCPⅣ)。将其中活性较高组分MCPⅡ进行羧甲基化及金属络合获得苦瓜多糖衍生物CMMCPⅡ、MCPⅡ-Ca(Ⅱ),并以Fenton法检测其·OH清除率。结果苦瓜多糖活性组分MCPⅡ及其衍生物MCPⅡ-Ca(Ⅱ)、CMMCPⅡ均具有抗氧化活性,在质量浓度为0.7mg/m L时,其对·OH的清除率分别为58%、82%和93%,SC50值均在0.6 mg/m L以下,其中,苦瓜多糖羧甲基化衍生物的抗氧化活性最高。结论通过羧甲基化及金属络合可增强苦瓜多糖生物活性。     

苦瓜多糖的分离纯化及保肝活性研究

采用DEAE-52及葡聚糖凝胶G-100柱层析获得了具有抗氧化活性的苦瓜多糖(MCP)组分,通过构建小鼠四氯化碳肝损伤模型探讨了苦瓜多糖对肝损伤的防护作用。研究结果表明,纯化后的苦瓜多糖对超氧阴离子自由基清除率达82%,并能使肝损伤小鼠血清中的ALT和AST活性下降幅度分别达到10.6%及30.7%,肝匀浆中SOD、GSH-PX活性上升幅度分别为33.33%和26.62%,MDA含量则下降了25.62%。提示苦瓜多糖对肝损伤具有一定防护作用,保肝活性与海王金樽相近。     

苦瓜多糖的抗氧化活性与降血糖作用相关性研究

采用DEAE-32及葡聚糖凝胶G-75柱层析获得了具有抗氧化活性的苦瓜多糖组分,通过饲喂四氧嘧啶构建小鼠糖尿病模型,探讨了苦瓜多糖的抗氧化活性与降血糖作用的相关性。结果表明,纯化后的苦瓜多糖在20mg/mL时对羟自由基(.OH)清除率可达82%。随着苦瓜多糖体内抗氧化活性增加,其对小鼠血糖升高抑制作用也显著增强,当多糖浓度达到250mg/kg时,降糖效果与格列本脲相同。