化学生物组合法合成米格列醇及其表征

以葡萄糖和乙醇胺为原料,催化加氢生成N-羟乙基葡糖胺,葡萄糖转化率为89%。氧化葡萄糖酸杆菌Gouv2007的静息细胞在通气下氧化N-羟乙基葡糖胺脱氢生成米格列醇的前体物质6-脱氧-6-羟乙基氨基-α-L-呋喃山梨糖,再催化加氢生成米格列醇,对从N-羟乙基葡糖胺生成米格列醇的底物转化率为77.3%。采用熔程测定、红外光谱分析、质谱分析对N-羟乙基葡糖胺和米格列醇进行了表征,结果表明:所合成的产物分别被鉴定为N-羟乙基葡糖胺和米格列醇。     

三聚氰胺单克隆抗体制备与鉴定

目的制备高度特异的三聚氰胺单克隆抗体,经酶联免疫吸附试验鉴定并制备胶体金试剂盒。方法以牛血清白蛋白交联的三聚氰胺为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗三聚氰胺单克隆抗体,经纯化制备腹水,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immune sorbent assay, ELISA)对抗体进行效价测定、亚类测定、交叉鉴定和蛋白质免疫印迹试验(westernblot)特异性鉴定后制备胶体金试剂盒。结果筛选出1株抗三聚氰胺单抗,制备的三聚氰胺胶体金试剂盒敏感值能达到30μg/L。结论获得了高度特异的且能稳定分泌三聚氰胺抗体的细胞株。     

三聚氰胺偶联抗原制备及其免疫原性分析

探讨以2-氯-4,6-二胺-1,3,5-三嗪(CAAT)作为起始物,与6-氨基己酸(ACS)连接转化得到半抗原MelACS,再将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联形成具有连接手臂的抗原BSA-ACS-Mel,用于单克隆抗体(m Ab)制备。经过液相色谱、Western blot及ELISA等抗原特性分析,证明半抗原Mel-ACS的转化效率达到了85.9%,且针对Mel特异性单抗获得率达到了42.9%,抗原BSA-ACS-Mel免疫原性较好,完全可以适用于三聚氰胺分子的特异性检测需要。这对其余小分子抗原的合成也起到一定的指导作用。     

中药材二氧化硫快速定量检测系统的研发及验证

目的 建立一种针对中药材二氧化硫残留特异性强的定量快速检测系统。方法 利用醋酸铅检测微量硫化氢的高敏感性,以硫化铅黑色沉淀的灰度响应值为定量依据,设计醋酸铅检测卡,设计可控制反应条件使硫化铅灰度可线性地反映二氧化硫含量的检测反应器,研发与检测卡配套的可准确检测灰度值的定量检测仪。制备标准灰度卡、绘制检测灰度值与标准溶液浓度关系曲线、考察定量检测系统的精密度、加样回收率、时间稳定性,同时做干扰实验及用本系统与国标方法对同一批次中药材的二氧化硫残留量进行检测比较,评价检测体系的定量检测效果。结果 本检测系统试纸条的灰度值与标准溶液的浓度线性关系良好(R_²=0.99),线性检测范围在0 mg/kg到805 mg/kg之间;对高中低浓度的二氧化硫残留样品多次检测值的相对标准偏差均小于5%,加样回收率达到85%以上,精确性良好;常见的含硫化合物对其没有干扰,系统与2015版药典第三法(离子色谱法)对同一批次的中药材二氧化硫检测结果一致。结论 该检测系统准确性好,稳定可靠,特异性强,操作简便,可用于中药材二氧化硫残留的快速定量检测。