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研究并比较了高效疏水相互作用色谱(HPHIC)的流动相组成、固定相、pH值和梯度方式对分离基因重组大肠杆菌高效表达的牛朊病毒正常成熟蛋白的影响,在此基础上,确定了牛朊病毒正常成熟蛋白分离纯化的最优化条件,即仅用高效疏水色谱法坦 步便可得到纯度和质量回收率均大于90%的目标蛋白,还讨论了用HPHIC对变性bPrP^cL的分离机理。 相似文献
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采用摇床法,通过改变盐酸胍浓度和溶菌酶浓度测定不同温度下的变性溶茵酶(Lys)在疏水色谱填料PEG-600表面的吸附等温线.研究发现,25℃,35℃和45℃吸附达平衡所需时间分别为5h,4h和2h.原因可能是25℃时包覆作用显著,温度升高时,包覆作用消失,吸附容易达到平衡.改变盐酸胍浓度时,吸附量的变化与三种作用力,即去水合作用、亲合力及分子构象作用力的相对大小有关.0.8mol/L GuHCl吸附量达最大值,暗示蛋白可能发生了构象突变(至少是微扰).以吸附计量置换模型(SDM-A)对溶菌酶的吸附等温线进行拟合的线性关系很好,表明SDM-A适用于溶菌酶在液-固界面上的吸附.SDM-A热力学研究表明,变性溶菌酶折叠吸附过程中总的自由能ΔGP为负值,净吸附自由能ΔGA均比相应条件下的ΔGp的负值更大,而净解吸附自由能ΔGD均为正值.说明上述自发过程是由ΔGA作为驱动力的结果,符合吸附过程的一般规律. 相似文献
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