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1.
目的 探究天然肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP)的可替代物,为蟹类过敏原的检测提供基础材料,本研究首次利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达表达三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)重要过敏原SCP,并检验其免疫反应性。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastoris GS115菌株后经遗传霉素(Geneticin, G418)筛选获得阳性高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫印记(Western blotting, WB)和间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫反应性。结果 SCP在P. pastoris GS115中实现了可溶性高效表达,其表观分子量约为28 kDa。在摇瓶水平下,最佳诱导条件为pH为6.0、每24 h添加1.0%(v/v)甲醇,于28℃发酵144 h,在此条件下,纯度为91.6%的SCP产量可达15 mg/L。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有IgG结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫反应性良好的重组SCP。本研究为SCP的理化研究及产业化应用奠定了基础,并有望促进特异性甲壳类过敏原检测的发展。 相似文献
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2012年“华夏建设科学技术奖”获奖项目(三等奖) 跨座式单轨交通工程道岔设备系统安装工艺技术 总被引:1,自引:0,他引:1
一、立项背景随着经济的高速发展,为解决城市化进程中的交通制约因素,我国从国外引进了跨座式单轨交通这种安全快捷的城市交通形式。其中道岔设备作为机电一体化的高新设备系统,是保证该交通形式高安全、高可靠性运行的三大关键系统之一,我国在引进、消化、吸收的基础上已步入了国产化。开展本工艺技术的研究对保证道岔设备系统的安装质量、缩短施工周期、确保单轨交 相似文献
5.
目的:探索镁离子对免疫胶体金检测中生物大分子相互作用的影响,为进一步阐释基质干扰机制、研发前处理新技术、提升检测效率提供参考依据。方法:通过斑点免疫金渗滤法分析了镁离子对免疫胶体金检测过程中主要生物大分子免疫反应的影响,并通过表面等离子共振技术进行动力学分析,进一步探索镁离子对大分子物质亲和活性的影响。结果:首次确定镁离子能够通过干扰金标抗体进而影响抗原抗体的特异性结合,进一步确定了镁离子的干扰使金标抗体的动力学常数明显不同,推测出镁离子影响了金标抗体的F~(ab)片段。结论:定性、定量分析了镁离子与免疫胶体金反应中主要生物大分子的相互作用,在此基础上明确了镁离子对金标抗体亲和活性的影响,该研究结果为食品质量安全领域胶体金快检技术的基质干扰研究、干扰控制消除及检测效能的改进提升,提供了进一步的理论依据和指导。 相似文献
6.
由于广东气温较高,作者用冷水代替50℃温水洗刷碳棒头,经长期试验和实践证明是可行的。关键是控制好污源区和调校好洗头机的毛刷以及旋转相互摩擦的速度等因素。作者在东部厂区实施近一年、效果良好,经济效益显著。 相似文献
7.
小心"后院起火" 越来越多的安全技术把网络的远程存取安全作为共同的发展方向,因此,相关的防火墙、入侵检测、身证认证等技术迅速发展.但是,在这种网络安全产品蓬勃发展的背后仍然隐患重重,当IT专家聚焦在网络传递的安全方面时,却往往"后院起火"--很多数据,尤其涉及机密的数据并不通过广域网泄漏,而是在办公室内部丢失.据公安部统计,目前涉及的数据泄密犯罪事件中有70%的案件来自于内部人员. 相似文献
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火灾作为最常见的一种灾害,对于建筑物的破坏和影响非常大,不仅会影响建筑的使用,甚至对建筑结构也会产生较大的破坏。以具体的火灾实例为参照,通过对火灾后建筑物主体结构的检测和鉴定,全面地分析火灾事故对于建筑物结构的影响,同时重点探讨了火灾后建筑结构的处理方法。 相似文献