凉茶中DNA提取方法的建立

以凉茶植物源性饮品为研究对象,比较了1种硅胶柱法商品试剂盒和传统CTAB法提取凉茶食品基因组DNA的效果;通过紫外分析法和实时荧光定量PCR法对所提取的DNA进行检测,比较所得DNA的浓度和纯度,以及对下游检测的适用性。结果表明,与传统CTAB法相比,研究所建立的方法提取到的DNA无PCR抑制剂,浓度和纯度能满足后续PCR检测要求。     

脂环酸芽孢杆菌的培养基筛选及优化

比较了脂环酸芽孢杆菌A.acidotcrrstris DSMZ 3922的芽孢在PDA、K培养基和SK培养基中的复苏情况,结果表明,SK培养基是三者中最适合于脂环酸芽孢杆菌生长的培养基;用正交试验L9(33)研究了Ca2+、Mn2+以及Tween 80在SK培养基中的添加浓度对A.acidotcrrstris DSMZ 3922、A.acidiphilus DSMZ14558生长情况的影响,结果表明,3因素对A.acidotcrrstris DSMZ 3922及A.acidiphilus DSMZ 14558生长情况影响的主次顺序均依次为Ca2+>Mn2+>Tween 80.在SK培养基中添加1.5g/L的Ca2+,0.1ppm的Mn2+,以及0.75mL/L的Tween 80是对A.acidotctrstris DSMZ 3922生长较为有利的组合;在SK培养基中添加1.5g/L的Ca2+,0.1ppm的Mn2+,以及0.25mL/L的Tween 80是对A.acidiphilus DSMZ 14558生长较为有利的组合.     

微生物法维生素测定关键控制点的研究

目的：通过对国家标准中微生物法维生素的检验方法关键控制点的研究，提高微生物法维生素测定结果的准确度。方法：现行国家标准GB5413—2010、GB／T5009．154—2003等。结果：测得的细菌生长标准曲线在标准规定范围内线性关系良好，实验结果R方值能达NO．98以上，充分说明数据系列线性高度相关。以维生素B12为例测定回收率为93．2～114．0。结论：在实验过程中充分考虑各种影响因素，准确把握各个关键控制点，能够让数据更加稳定可靠。     

培养基质量控制对维生素B12含量测定的影响

目的 GB 5413.14-2010微生物法检测维生素B₁₂中培养基的质量和配方直接影响莱士曼氏乳杆菌在整个检测过程中的活化,接种和测定。方法 为解决这一问题,本文通过比较不同配方菌株活化培养基和种子液制备肉汤培养基及不同品牌测定培养基对维生素B₁₂ 结果测定的影响。利用莱士曼氏乳杆菌对维生素B₁₂的特异性和灵敏性,定量测定质控样品中维生素B₁₂的含量,并通过质量控制措施对测定结果进行分析评价。结果 方案设计中A2种活化菌株方式所用培养基和B1品牌的维生素B₁₂测定培养基得到的拟合曲线线性更好,质控结果组间差异也更小。结论 表明培养基质量控制对维生素B₁₂检测的准确度和稳定性极为重要。     

利用Real-time PCR技术分离鉴定酸乳中的乳双歧杆菌(Bifidobacterium Animalis Subsp.Lactis)

目的:利用Real-time PCR建立酸乳中乳双歧杆菌的快速精准鉴定方法。方法:选取乳双歧杆菌atpD基因,利用Primer Express 3.0.1设计引物探针,进而验证引物探针的特异性、灵敏度和抗干扰能力,最后应用到17种酸乳样品的检测。结果:所设计的引物探针可以有效地扩增出乳双歧杆菌,而对于20种乳酸菌和18种常见的致病菌都不能扩增,具有良好的特异性;其灵敏度在DNA水平可以达到1 pg/μL,在菌浓度水平可以达到10³ cfu/mL;并且不受酸乳中的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的干扰,具有很好的抗干扰能力。利用RT-PCR技术能很好地鉴定17种酸乳中乳双歧杆菌。结论:该研究建立了酸乳中快速精准鉴定乳双歧杆菌的方法,对食品中双歧杆菌鉴定起到积极推动作用。