催化光度法测定三聚氰胺脱氨酶活性

建立一种测定三聚氰胺脱氨酶活性的催化光度法。利用Berthelot显色反应,通过测定单位时间内释放出的氨气量推算三聚氰胺脱氨酶的活性,并通过单因素试验和L9(34)正交试验优化测定条件。结果表明：最佳显色条件为水杨酸显色液加入量1.2mL、次氯酸钠溶液加入量0.3mL、显色反应时间40min、测定波长650nm;最佳酶促反应条件为三聚氰胺底物加入量0.2mL、粗酶液加入量60μL、酶促作用时间30min;在上述条件下,测得酶比活力为132.41U/L,批内批间变异系数范围分别为0.81%～1.19%和1.27%～1.69%。催化光度法对三聚氰胺脱氨酶酶活的测定,具有操作快速简便、灵敏度高、重复性好的优点。     

曲霉属蛋白表达中高效启动子的应用研究

曲霉属丝状真菌,尤其是黑曲霉(Aspergillus niger)和米曲霉(Aspergillus oryzae),常被作为宿主菌表达生产各类蛋白并在工业上得以广泛使用.工业生产中,为了提高蛋白产量,获取更大的经济效益,需要对影响蛋白表达的各种因素进行改进,使用高效的启动子便是其中策略之一,强启动子的使用能够从转录水平上提高同源或是异源蛋白在曲霉中的表达产量.该文介绍了曲霉蛋白表达过程中常见启动子的使用情况,重点阐述了国内外改进启动子活性构建高效启动子的几种策略,对新型启动子在曲霉蛋白表达中的应用做出了展望.     

三聚氰胺脱氨酶基因克隆表达及活性测定

从载体pUC57-MDA中获得经过大肠杆菌密码子偏好性优化的三聚氰胺脱氨酶编码基因,将该基因连接至表达载体6HisT-pRSET中,构建了重组表达质粒6HisT-pRSET-MDA,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),得到重组工程菌BL-MDA并进行诱导表达,利用SDS-PAGE对表达产物进行分析并测定酶活性。SDS-PAGE电泳分析结果显示,表达上清液在53 000处有明显的蛋白质条带,与理论相对分子质量的吻合,其脱氨酶活性达5.61 U。     

多重免疫层析检测技术在食品安全快速检测中的研究进展

随着农业及食品行业突飞猛进地发展，随之产生的多种有毒有害物质共存于食品样品中的问题日趋严重，对人类健康及经济发展造成巨大威胁，开发同时检测多重危害物的高效快速检测平台对于保障食品安全具有重要的现实意义。基于抗原抗体特异性反应的多重免疫层析快速检测技术因具有成本低廉、便携快速等特点，且可进一步提高检测效率，同时能够提供更为丰富准确的样品信息，为食品中多种危害物的同时检测提供了技术保障。文章首先综述了不同标记材料在多重免疫层析检测技术中的应用，并就多重免疫层析检测技术于食品中有毒有害物质如真菌毒素、食源性致病菌、农兽药残留等的检测应用进行总结与分析，最后对其在食品安全快速分析检测中面临的挑战和发展前景做出讨论，以期为食品安全多重快速检测方法的建立提供参考。