人IL-10 cDNA克隆、表达及其生物学活性

目的 在大肠杆菌中表达重组人白细胞介素10(Human Interleukin,hIL-10)。方法 用RT-PCR自白血病细胞株K562 RNA扩增hIL-10 cDNA片段(约500bp),克隆至质粒载体pSK(+),并对克隆的DNA片段进行序列分析。用限制酶EcoRI和 BamHI消化pSK/IL-10重组质粒,分离hIL-10片段,并插入原核表达载体pBV220的相应限制酶位点,酶谱分析鉴定重组表达载体pBV/IL-10。转化菌株经42℃诱导,用SDS-PAGE和Westem blot鉴定表达的重组蛋白。表达的重组蛋白经谷胱甘肽复性缓冲液复性,用RT-PCR检测其对外周血单核细胞(PBMC)合成IFN-γ的抑制作用。结果 RT-PCR扩增的DNA片段与hIL-10 cDNA大小一致。重组质粒pSK/IL-10的DNA序列分析显示,克隆的DNA序列与文献报道的hIL-10 cDNA序列一致。SDS-PAGE表明,重组蛋白相对分子质量为18000,其表达量达菌体总蛋白的20％左右。Westem blot分析显示,重组蛋白能特异性地与抗hIL-10抗体结合,复性的重组蛋白能明显抑制PBMC合成IFN-γ。结论 已成功地构建了表达具有生物学活性的重组hIL-10(Recombinant hIL-10,rhIL-10)的工程菌株。     

棉籽分离蛋白粉的营养学研究

本研究对从脱脂棉籽粕中分离提取的棉籽分离蛋白粉进行了全面营养成份分析、卫生学指标检测,同时通过动物实验,研究了棉籽分离蛋白粉的生物价、蛋白质功效比,消化率等指标。结果表明,该蛋白粉可作为一种优质植物蛋白资源。     

棉籽分离蛋白粉的毒理学及营养学研究

从棉籽粕中分离提取棉籽蛋白粉是棉籽副产品的综合利用方式之一。为开发利用棉籽粕这一重要的蛋白质资源,我们进行了棉籽分离蛋白粉的毒理学、营养学及对小鼠生殖机能影响的研究。本研究进行了大鼠急性毒性实验;亚慢性毒性实验;小鼠两代繁殖试验;以及棉籽分离蛋白粉的营养成分分析,卫生学指标检测和营养评价试验。结果表明:棉籽分离蛋白粉属于无毒物质,给 Wistar 大鼠连续饲喂六个月(最大添加量为30%),对大鼠肝功、肾功血钾及主要脏器的生理生化指标无显著不良影响,实验组与对照组之间无明显差别。繁殖试验结果表明,长期食用棉籽分离蛋白粉(最大添加量20%)对小鼠的受孕率、妊娠率、出生存活率、哺育存活率、仔重等繁殖发育能力无不良影响。从营养成分和氨基酸组成看,棉籽分离蛋白粉是一种品质优良,氨基酸组成较为齐全的蛋白质,其效价(PER)消化率(AD)生物价(BV)等与黄豆粉相似.因此,棉籽分离蛋白粉是一种安全无毒,品质优良的植物蛋白质资源。