微小RNA-373表达下调对皮肤鳞状细胞癌A431细胞周期和凋亡的影响

【摘要】 目的 探讨微小RNA-373（miR-373）表达下调对皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）A431细胞周期和凋亡的影响。方法 将对数生长期A431细胞分为3组,miR-373抑制剂组和阴性对照组分别转染miR-373抑制剂和阴性对照miRNA,未处理组不做任何处理。转染后48 h,采用实时PCR检测各组miR-373的表达水平;采用CCK-8试剂分析miR-373表达下调对A431细胞增殖的影响,流式细胞仪检测不同处理组A431细胞周期分布和凋亡的变化,最后采用比色法检测各组胱天蛋白酶3（caspase-3）活性的变化。两组之间数据比较采用t检验,3组及以上采用单因素方差分析,两两组间比较采用LSD-t检验。结果 miR-373抑制剂组miR-373表达水平为0.120 ± 0.036,显著低于未处理组（1.002 ± 0.022）和阴性对照组（1.037 ± 0.028）,t值分别为36.21、34.83,均P < 0.001。miR-373抑制剂组在48、72和96 h细胞增殖活性均显著低于未处理组和阴性对照组,F值分别为10.805、13.720和30.907,P值分别为0.038、0.010和0.001）。miR-373抑制剂组G0/G1期比例为64.69% ± 1.18%,显著高于未处理组（52.74% ± 0.66%）和阴性对照组（53.80% ± 0.80%）,t值分别为15.51和13.24,均P < 0.001;总凋亡细胞比例为22.69% ± 1.24%,显著高于未处理组（9.62% ± 1.14%）和阴性对照组（9.66% ± 0.97%）,均P < 0.001;caspase-3活性为1.238 ± 0.057,显著高于未处理组（0.413 ± 0.028）和阴性对照组（0.437 ± 0.036）（均P < 0.001）。结论 miR-373可能在皮肤鳞癌细胞周期调控和凋亡诱导中发挥重要作用。     

人毛囊外根鞘及毛乳头细胞的迁移和生长观察

目的连续观察成人头皮毛囊外根鞘(ORS)和毛乳头(DP)细胞的生长及形态学变化。方法利用两步酶消化获得正常人头皮毛囊的ORS和DP,采用添加HKGS和HMGS的K-SFM进行体外培养,倒置显微镜下连续观察毛囊ORS和DP的迁移和生长。结果将单个毛囊置于预先涂布血清的培养板2h,然后添加少量培养基,毛囊黏附于培养板的几率增加,数小时后,即可见细胞从ORS及DP处迁移生长,以角质形成细胞(KCs)、成纤维细胞(FBs)为主,黑素细胞(MCs)较少。并且,ORS和DP的迁出和生长有明显不同。如果培养基过多,则多数毛囊悬浮,无细胞迁出,最终死亡。结论预先涂布血清和开始仅添加少量培养基,有利于毛囊黏附,随后细胞迁移生长。     

毛囊隆突区干细胞壁龛的研究进展

组织中干细胞的微环境壁龛的作用受到关注。毛囊的精细结构为研究干细胞的生物学特性提供了极好的体系,毛囊隆突区内包含许多干细胞,它们各有自己的壁龛,其中研究最多的是表皮干细胞壁龛和黑素干细胞壁龛。毛囊干细胞的功能受其内在因子调节,而后者受到周围细胞产生的外在信号分子调控。探索干细胞及其壁龛在皮肤肿瘤的作用,可能为临床治疗皮肤肿瘤提供新思路。     

白细胞介素-33和皮肤鳞状细胞癌的相关性研究

目的 探讨皮肤鳞状细胞癌(CSCC)患者血清和皮损中白细胞介素(IL)-33表达水平及其临床意义.方法 纳入2018年1月-2019年8月我院皮肤科64例CSCC患者和40例健康体检者分别作为CSCC组和对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测并比较2组研究对象血清中IL-33表达水平的差异;CSCC患者癌组织...     

MiRNA-373在皮肤鳞状细胞癌的表达及对侵袭的影响

目的 分析microRNA-373 (miR-373)在皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)组织和细胞中的表达,探讨对皮肤鳞癌细胞侵袭的影响.方法 实时PCR检测皮肤鳞癌组织和细胞中miR-373的表达,将miR-373模拟物、miR-373抑制剂以及阴性对照miRNA转染皮肤鳞癌A431细胞,采用细胞侵袭实验分析miR-373表达下调对细胞侵袭的影响,采用Western印迹分析miR-373表达下调对MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响.结果 皮肤鳞癌组织(2.465±0.218)和SCL-1细胞及A431细胞(1.864±0.178,2.919±0.277)中miR-373的表达水平显著高于瘤旁组织和细胞(1.000±0.000),差异有统计学意义(P＜0.05).在转移性的皮肤鳞癌患者(3.323±0.344)中,miR-373的表达显著高于非转移组(1.914±0.161),差异有统计学意义(t=4.158,P＜0.01).与未处理组和阴性对照组相比,miR-373模拟物显著增加皮肤鳞癌A431细胞中miR-373的表达水平和细胞的侵袭能力,而miR-373的抑制剂显著下调皮肤鳞癌A431细胞中miR-373的表达水平和细胞的侵袭,差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 MiR-373表达下调显著抑制皮肤鳞癌A431细胞的侵袭,并能显著下调MMP-2和MMP-9蛋白的表达.