人源性抗角蛋白单链抗体在巴氏毕赤酵母的分泌表达

目的：用巴氏毕赤酵母表达人源性抗角蛋白单链抗体。方法：从已构建好的质粒p3MH／ScFv中亚克隆目的片段ScFv并插入酵母表达载体p^PIC9K，构建成重组质粒p^PIC9K／ScFv，并测序鉴定。通过电转将重组质粒p^PIC9K／ScFv整合到巴氏毕赤酵母菌GS115的染色体上。经G418筛选得到高拷贝转化子及Mut表型鉴定后，用含0．5％甲醇的培养基诱导其分泌表达。结果：通过6天的诱导，该系统成功表达了抗角蛋白单链抗体，Western blot实验证实表达产物具有特异性。结论：获得了真核表达的抗角蛋白单链抗体，为其应用研究打下了基础。     

抗人角蛋白全IgG基因真核表达载体的构建及表达

目的：构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体，并在CHO(dhfr^-)细胞中表达。方法：从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中，扩增VH及VL基因。以回收的PCR产物为模板，用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、VL基因。经XbaⅠ/BamHⅠ和XhoⅠ/HindⅢ酶切后，分别插入真核表达载体pWD中，构建重组载体pWDkH。经PCR和测序鉴定正确后，用lipofectAMINE2000转染CHO(dhfr^-)细胞。取培养上清检测抗人角蛋白全IgG的表达。结果：构建了抗人角蛋白基因的真核表达载体pWDkH，并在CHO(dhfr^-)细胞中表达：结论：在CHO(dhfr^-)细胞中成功地表达了具有抗原结合活性的抗人角蛋白IgG，为其临床应用奠定了基础。     

他克莫司软膏治疗慢性手部湿疹临床观察

目的:评价外用0.1%他克莫司软膏治疗慢性手部湿疹的临床效果和安全性;方法:给予28例慢性手部湿疹患者外用0.1%他克莫司软膏,2/d,晚间行封包治疗(≥6 h),共4周;于治疗前及治疗后1、2、4周和停药后2周各随访1次,疗效评估使用标准的手部湿疹评分(JHS)和临床严重性分级,并记录不良反应.结果:28例中26例完成临床试验.治疗后2周同治疗前相比JHS明显下降,直到研究结束其分值持续下降,最终12例(46.2%)完全治愈.临床分级也得到明显改善.药物相关性不良反应主要表现为用药部位烧灼感(15.4%)和瘙痒(11.5%),严重程度多为轻到中度,且均为一过性.结论:0.1%他克莫司软膏对治疗慢性手部湿疹具有良好的疗效,安全性较高.     

他克莫司软膏治疗慢性手部湿疹临床观察

目的:评价外用0.1%他克莫司软膏治疗慢性手部湿疹的临床效果和安全性;方法:给予28例慢性手部湿疹患者外用0.1%他克莫司软膏,2/d,晚间行封包治疗(≥6 h),共4周;于治疗前及治疗后1、2、4周和停药后2周各随访1次,疗效评估使用标准的手部湿疹评分(JHS)和临床严重性分级,并记录不良反应.结果:28例中26例完成临床试验.治疗后2周同治疗前相比JHS明显下降,直到研究结束其分值持续下降,最终12例(46.2%)完全治愈.临床分级也得到明显改善.药物相关性不良反应主要表现为用药部位烧灼感(15.4%)和瘙痒(11.5%),严重程度多为轻到中度,且均为一过性.结论:0.1%他克莫司软膏对治疗慢性手部湿疹具有良好的疗效,安全性较高.     

艾滋病抗体治疗的研究现状与展望

艾滋病的发病机制非常复杂 ,到目前为止还没有根治该病的特效药物或疫苗 ,但在实验中发现许多基因工程抗体具有阻断病毒入侵、中和病毒活性和抑制病毒复制作用 ,为艾滋病的治疗带来了希望     

他克莫司软膏治疗慢性手部湿疹的临床研究

目的评价0．1％他克莫司软膏治疗成人慢性手部湿疹的疗效和安全性。方法86例慢性手部湿疹患者按就诊顺序进入试验组和对照组,分别接受0．1％他克莫司软膏（试验组）或丁酸氢化可的松乳膏（对照组）治疗;每日2次,疗程为4周;于治疗前及治疗后每周随访1次,疗效评估使用标准的手部湿疹评分系统（JHS）,患者作视觉尺度VAS瘙痒症状测试及皮炎改善程度的自我评估,并记录不良反应。结果经过4周的治疗后,试验组和对照组的有效率分别为83．7％和46．5％,试验组的有效率高于对照组（P〈0．05）。治疗后,试验组的JHS明显下降,与患者自我评价符合,同对照组JHS相比,差异有统计学意义。试验组9例局部出现不同程度灼热、瘙痒等不适感,均于2—3d后消失;对照组3例出现一过性皮肤发红、刺痛,停药后消失。结论0．1％他克莫司软膏治疗慢性手部湿疹安全且效果良好。     

隆突性皮肤纤维肉瘤1例

临床资料患者女,38岁。因左肩部红斑、结节缓慢增大7年来我院就诊。患者7年前感左肩部不适,搔抓致皮肤破溃,愈合后局部皮肤出现红斑,偶有痒感。红斑逐渐增大,呈暗红色,触之软,自觉皮肤变薄,曾抓破,愈合慢,近1年,红斑边缘开始出现结节,渐增大增多。     

从噬菌体抗体库中筛选抗角蛋白单链抗体

目的　从半合成噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白单链抗体 (scFv)并进行鉴定。方法　以人表皮角蛋白为抗原 ,通过“吸附 洗脱 扩增”过程从噬菌体抗体库中筛选特异性抗角蛋白单链抗体 ,对其抗原结合活性、识别角蛋白的相对分子质量 (Mr)和序列进行分析鉴定。结果　经过筛选 ,获得 6株能与角蛋白特异性结合的阳性克隆 ,所识别角蛋白的Mr 相同 ,均在 5 6 0 0 0～ 5 70 0 0之间 ;序列分析显示 ,所获抗体克隆的可变区基因分别属于免疫球蛋白基因家族的不同亚群。结论　利用噬菌体抗体库技术可以不经免疫制备出高特异性的人源性抗角蛋白单链抗体     

天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的噬菌体呈现的scFv的构建及表达

目的:构建并表达噬菌体呈现的天然抗角蛋白单克隆抗体(mAb)3B4的单链抗体(scFv),并测定其活性。方法:分别以pMD18TmAb3B4VH和pMD18TmAb3B4VL为模板进行PCR,扩增mAb3B4的VH和VL基因,然后将其依次插入噬菌体表达载体pscMH中。经DNA序列测定正确后,转化大肠杆菌,用辅助噬菌体VCSM13超感染诱导表达scFv;用ELISA检测其与亲本mAb3B4的抗原结合活性的改变。结果:对扩增的mAb3B4的VH和VL基因进行测序,结果表明VH基因与原序列完全一致,VL基因在骨架区FR1有1个碱基发生突变。用VCSM13超感染后能检测到scFv的表达,其与亲本一样具有多反应性,但抗原结合模式不完全相同。结论:成功地构建并表达了天然抗角蛋白mAb3B4噬菌体呈现的单链抗体,表达的scFv与mAb3B4的抗原结合活性有一定的差异,为探讨天然自身抗体的抗原结合模式奠定了基础。     

光动力联合皮肤微创清除术治疗重度痤疮的临床疗效观察

目的:探讨3.6% 5-氨基酮戊酸光动力疗法联合皮肤微创清除术治疗重度痤疮的临床疗效和安全性?方法:85例重度痤疮患者应用3.6% 5-氨基酮戊酸光动力疗法联合皮肤微创术,共3次,每次间隔2周,从开始治疗后2?4?8?12周记录疗效及不良反应?结果:大部分患者经3次治疗后皮损明显减少,随着治疗次数的增加有效率和痊愈率逐渐增加,在完成治疗后4周疗效最佳,总有效率90.59%,痊愈率49.41%?治疗不同阶段的有效率比较差异有显著性,而不同性别的治疗效果差异无统计学意义?不良反应轻微,为一过性?结论:3.6% 5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗重度痤疮简单?高效?安全?