植物腺苷5′-磷酰硫酸激酶(APSK)研究进展

腺苷5'-磷酰硫酸激酶(APSK)催化APS磷酸化生成3'-磷酸-腺苷5'-磷酰硫酸(PAPS),PAPS进一步作为硫酸根供体参与胞内的硫酸化反应。因此,在这些生物体中,APS激酶是硫酸盐同化的重要组成部分。介绍APS激酶的结构、功能、作用机制,综述植物APS激酶当前的研究进展。     

响应面法优化提取安吉白茶多糖工艺

采用超声波辅助热水浸提法从白茶中提取茶多糖,并用硫酸-蒽酮法计算多糖提取率,研究茶多糖提取率与料液比、超声时间和提取次数之间的交互关系,并以响应面试验设计优化工艺条件。结果表明,提取次数对白茶多糖的提取率影响程度最大,其次是料液比及超声时间;响应面试验的最佳条件为料液比1∶62(g/m L)、超声时间94 min、提取次数3次,在此条件下,茶多糖得率的预测值达到9.7%。采用ABTS法检测茶多糖的抗氧化能力发现,所得茶多糖具有一定的抗氧化能力,且其能力随茶多糖浓度的增加呈递增趋势。     

天胡荽抗肿瘤活性成分研究

[目的]研究天胡荽的抗肿瘤活性成分.[方法]利用色谱手段进行分离纯化,应用NMR方法鉴定结构,并进行MTT法抗肿瘤试验.[结果]从天胡荽中分离鉴定了4种化合物（化合物1～4）.天胡荽的各萃取部位对LA795细胞株有一定的抑制作用,其中以正丁醇层萃取物在高浓度800雌/ml时的抑制作用较强,而石油醚和乙酸乙酯萃取物的抑制作用相对较弱.单体化合物对LA795细胞株的抑制作用均较弱.[结论]4个化合物有一定抑制肿瘤细胞生长作用.     

人工RNA结合骨架的可溶性表达及其与寡核苷酸链的相互作用分析

为了分析ERBS与其目标寡核苷酸的相互作用,研究设计合成了对应目标寡核苷酸的ERBS基因,并进行了蛋白的原核表达、纯化以及其与目标寡核苷酸的相互作用分析。结果发现,ERBS在Escherichia coli BL21(DE3)中表达时呈现包涵体状态,而改变宿主细胞为Escherichia coli Rosetta(DE3),可极大提高其可溶性表达水平;纯化的ERBS与FAM标记的寡核苷酸互作分析发现,其解离常数为(9.76±0.62)nmol/L。试验结果可为深入研究不同ERBS与其目标寡核苷酸的相互作用奠定基础。     

超声波提取安吉白茶茶多酚工艺的优化

为安吉白茶茶多酚的工业化开发应用提供参考,通过响应面试验优化安吉白茶中茶多酚的超声波提取工艺。结果表明:安吉白茶提取茶多酚的最优提取工艺条件为安吉白茶与水的比例为1∶50,超声波水浴提取66min,提取3次,该提取条件下的茶多酚提取含量最高,为182.6mg/g。     

银杏内生细菌JX-3生长条件优化

为提高银杏内生细菌JX-3的生长速度,缩短培养时间,试验选取培养温度、pH、接种量和培养时间进行单因素试验,来确定菌株的最佳生长条件;再由单因素试验结果选择3个影响较大的因素进行正交试验,根据正交试验结果获得更优化的生长条件。结果表明,单因素优化试验得出菌株JX-3生长的最优条件为:温度35℃,pH值7.0,最佳接种量12%,培养时间4 h;正交试验得出的JX-3最佳生长条件为:时间5 h,pH值7.0,接种量8%。     

HPLC-DAD测定大茶树和小茶树的西湖龙井茶中EGCG的含量

[目的]采用HPLC-DAD对西湖龙井茶中的表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的含量变化进行分析.[方法]采用AgilentC18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相：甲醇：水（2％乙酸）15∶85;流速：1.0 ml/min;检测波长：276 nm;柱温：35℃.[结果]EGCG线性范围为0.152～3.040 μg,相关系数r为1,平均回收率97.61％,RSD为6.61％.[结论]该方法精密度、准确度良好,稳定性高,能简便、快速地测定大小茶树的西湖龙井茶中的EGCG含量.     

地方植物资源在优化药用植物学课程教学中的研究

通过挖掘地方植物资源,开展研究性学习,运用多种教学手段,使学生更好地理论联系实践。从而达到优化药用植物学课程教学内容,促进药用植物分类学知识学习的目的,也为后续的药物分析与检验、中药炮制学、药品质量管理等课程教学奠定基础。     

嗜热芽孢杆菌丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的基因克隆、蛋白表达纯化及活性分析

偶联法测定酶的活性是常用酶活测定方法之一。核苷二磷酸(NDP)是核苷三磷酸的β,γ高能磷酸键水解产物之一,丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)是用来测定NDP生成的常用偶联酶。为了分析嗜热菌苍白空气芽孢杆菌(Aeribacillus pallidus JH-7)(最适生长温度为50℃)的PK和LDH是否可以作为50℃条件下的偶联酶,研究从Aeribacillus pallidus JH-7基因组中克隆pk和ldh,连接到表达载体pET24a。结果表明,经诱导表达、纯化得到纯度达95%以上的Ap PK和Ap LDH。并利用分光光度法,分别对Ap LDH和Ap PK的动力学常数及催化效率进行了分析。结果表明,Ap PK对NDP的最适底物为ADP,催化效率为5×104 mol/(L·s),最适p H值为8.0,最适温度为45℃;NADH为Ap LDH的最适底物,催化效率为3.7×105 mol/(L·s),最适pH值为5.8,最适温度为35℃。虽然50℃不是Ap LDH和Ap PK的最适温度,但它们在此温度下的kcat分别为16.4,64.5 s-1,暗示它们可以作为此温度下的偶联酶。     

PUF蛋白的研究进展

RNA结合蛋白在细胞代谢中有非常重要的作用,PUF蛋白作为其中的特点之一在于其具有碱基识别特异性。在大多数真核生物中都存在PUF蛋白,并且在基因调控过程中起到了重要的作用。其独特的结构赋予了PUF蛋白特有的碱基识别功能,而这让PUF蛋白具有很多可以开发的潜在用途。为了解PUF蛋白的研究进展,综合了近些年来对于PUF蛋白的相关研究,包括PUF蛋白的识别特异性、结构研究与功能研究等方面。