禽流感病毒致死哺乳动物的分子基础研究进展

禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)能致死禽类、鸟类,还能致死哺乳动物(包括人类)。通过反向遗传学技术已鉴定出很多关于禽流感病毒致病哺乳动物的分子标记。目前,普遍认为HA基因和聚合酶复合体是禽流感病毒致病哺乳动物的主要基础,而发挥着抗病毒作用的NS1和PB1-F2基因也能影响病毒的致病性。另外,病毒的复制效率以及刺激宿主先天性免疫应答的能力也与病毒的致病力密切相关。本文对目前已知的位于HA、NA、PB2、PB1、PB1-F2、PA、PA-X、NS1、NP、M1和M211个基因上能增强病毒对哺乳动物致病性的关键氨基酸位点及可能的机制进行综述,为抗病毒治疗提供新的思路。     

生产碎片化对供应链集成和农产品滞销的影响——一个被调节的中介模型

以资源基础理论、能力理论和流通理论为基础,在"资源-能力-流通"的理论框架下,探讨生产碎片化通过供应链集成的中介作用和信息网络能力的调节作用影响农产品滞销的方式。通过对桂北地区219份农户的问卷数据进行统计分析,结果表明,生产碎片化对农产品滞销有显著正向影响,对供应链集成有显著负向影响,供应链集成对农产品滞销有显著负向影响;供应链集成在生产碎片化与农产品滞销之间起中介作用;信息网络能力在供应链集成与农产品滞销之间起负向调节作用,信息网络能力也负向调节供应链集成在生产碎片化与农产品滞销之间的中介作用,即信息网络能力越高,供应链集成的中介作用越强,存在被调节的中介作用。     

基于2019-nCoV对大学新开公选课《动物保护概论》教学模式的思考

2019新出现的新型冠状病毒肺炎给社会生活和人民健康带来了巨大的影响。然而关于此次疫情,有很多涉及动物保护有关的关注点：此次疫情是“天灾”还是 “人祸”? 人类新型冠状病毒的自然宿主来源是什么? 其易感动物包括哪些,是否包括宠物,我们怎样科学对待宠物？畜禽养殖业又将何去何从？毫无疑问,类似于2019新型冠状病毒肺炎等新型的社会问题给动物保护概论的教学提出了新的挑战。本文分析了动物保护概论课程的内容特点及其在当前教学中存在的问题,探讨了关于动物保护概论课程的教学内容设计、组织形式以及考核方式的教学改革。旨在为改革传统教学模式,提升教学质量提供借鉴。     

新城疫病毒基质蛋白第23位苯丙氨酸对病毒复制与细胞致病性的作用

副黏病毒科的副流感病毒5型(Parainfluenza virus5,SV5)和腮腺炎病毒(Mumps virus,MuV)的基质蛋白(Matrix protein,M)都编码FPIV-like晚期结构域(Late-domain,L-domain),L-domain中的苯丙氨酸(Phenylalanine,F)对病毒出芽与复制有很重要的作用。新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)M蛋白也包含潜在的L-domain23FPIV26,但23F对NDV的出芽及复制的作用尚不明确。本试验应用反向遗传学技术,以NDV ZJ1株为母本病毒,拯救一株M蛋白F23A突变的重组病毒ZJ1F23A,并在DF1细胞上对ZJ1F23A的复制性能和细胞致病性进行评价。结果显示,ZJ1F23A在DF1上的复制水平显著低于母本病毒ZJ1,ZJ1F23A对DF1的致病性比ZJ1弱。试验结果说明NDV M蛋白23F对病毒复制及病毒的细胞致病性具有重要作用。     

苹果园土壤营养富集管理技术

正土壤是苹果树生长发育的基础,良好的土壤条件才能满足生产优质苹果的要求。吉县地处黄土高原残垣沟壑区,常年干旱缺水,果园生产管理只能采用旱作栽培模式。而旱作果园只有蓄住天上水、保住地下墒,才能最大发挥肥效作用。1果园土壤存在的突出问题1.1土壤板结虽然吉县属黄土高原地区,土层深厚。但因长时间     

鹅源新城疫病毒M基因的原核表达及其多克隆抗体制备

试验旨在制备原核表达鹅源新城疫病毒(NDV)JS/5/05/Go株M蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。以鹅源NDV总RNA为模板,RT-PCR扩增M基因,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET32a-M,转化E.coli BL21(DE3)菌株进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测表达产物;用KCl染色切胶纯化法纯化重组蛋白;采用切胶免疫小鼠的方法制备M蛋白多克隆抗体,抗体效价用间接ELISA检测,特异性用Western blot和间接免疫荧光法鉴定。结果表明,在大肠杆菌中成功表达了分子量约为55 000的重组蛋白,用切胶纯化法获得了纯度较高的重组蛋白;ELISA法检测抗体效价可达1∶102 400,Western blot和间接免疫荧光试验结果表明制备的多克隆抗体能够特异性识别纯化的M蛋白及NDV自身表达的M蛋白。     

两株小鼠致病性差异显著的H5N1禽流感病毒PA蛋白差异互作宿主蛋白研究

为了探索引起H5N1高致病性禽流感病毒(highly pathogenic avian influenza virus,HPAIV)致病性差异的宿主因子,选取了一对主要由PA基因造成在小鼠上致病性差异的H5N1禽流感病毒(CK10与GS10),通过病毒感染A549细胞,利用PA抗体进行免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)试验以筛选与PA互作的宿主蛋白,并进行LC-MS/MS鉴定。结果发现与低致病性的GS10相比,共有160种宿主蛋白能够特异性与高致病性CK10病毒PA蛋白结合。对这160种蛋白进行生物信息学分析,通过Gene Ontology(GO)注释分析发现这些蛋白主要参与翻译、基因表达、病毒转录和病毒感染等生物学进程,通过KEGG通路分析发现这些蛋白主要参与的细胞通路包括翻译、传染病与信号转导等。此后,利用免疫共沉淀技术(co-immunoprecipitation,Co-IP),证实所筛选的宿主蛋白eEF1A1能够特异性地与CK10病毒PA蛋白相互作用。本研究筛选到了致病性不同的禽流感病毒的差异互作宿主蛋白,可为进一步了解流感病毒复杂的致病机制提供参考。     

干扰素刺激基因在人牙髓组织及牙髓细胞中表达的研究

目的：研究干扰素刺激基因（ STING）在人牙髓组织和细胞中的表达。方法：分别采用逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）检测STING在体外培养的人牙髓细胞中的表达,免疫细胞化学和免疫组化技术检测STING在人牙髓组织的表达和定位。结果：STING mRNA在人牙髓细胞中有显著表达;而在牙髓组织中,STING主要表达于牙髓组织表面的成牙本质细胞的胞浆中。结论：在人牙髓组织中,STING在基因和蛋白水平均呈高表达,且主要定位于成牙本质细胞的胞浆中;提示STING调节通路可能对宿主的天然免疫反应发挥调节作用。     

基于“互联网+”的第六产业发展能力评价及协同创新模式——以广西为例

产业集群化的思潮推动了第六产业的形成与发展,"互联网+"思维的兴起与运用驱动了第六产业的协同创新。运用主成分分析法与线性回归模型评价广西第六产业发展能力,找出存在的问题和主要影响因素,凭借"互联网+"对第六产业发展的促进作用,构建基于"互联网+"的第六产业协同创新模式,最后提出其实施策略。广西地区通过加强"互联网+"云服务平台建设,改变农业合作组织结构,完善农产品及加工产品市场体系和终端销售渠道,对促进区域农业产业化发展、有效应对新时代条件下对农业科技创新的新要求具有重要的现实意义。     

表达分泌型与膜结合型HH7N9 AIV血凝素蛋白重组NDV载体疫苗的免疫原性比较

研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱毒且在鸡胚中的繁殖性能较强。此外,LXs HA主要以分泌形式表达HA蛋白,而LXHAF则以膜结合形式表达HA。鸡的免疫试验显示,两株重组病毒在一次免疫后均能诱导针对NDV载体的血凝抑制抗体,但LXHAF能够诱导较高水平的H7N9 AIV特异性Ig Y抗体,而LXs HA不能诱导H7N9 AIV抗体应答。结果表明,表达膜结合型HA的重组病毒具有针对H7N9 AIV较好的免疫原性,而表达分泌型HA的重组病毒免疫原性较差。这为研发H7N9亚型禽流感载体疫苗提供新的信息与参考。