小菜蛾钙黏蛋白片段对Cry1Ac蛋白的增效作用

根据已报道的昆虫毒素结合区钙黏蛋白片段对Cry1Ac蛋白有增效作用,本文以3龄小菜蛾幼虫为研究对象,选取其钙黏蛋白相同功能区的两个片段,将两个片段进行克隆。通过pGEX-6p-1载体,在大肠杆菌中表达了功能区片段PxCAD1及PxCAD2。使用致死中浓度剂量的CrylAc蛋白(1μg/mL)及较高浓度的PxCAD1(556μg/mL)与PxCAD2(551.25μg/mL)对小菜蛾幼虫进行体外复配生测,结果表明,PxCAD1可使小菜蛾幼虫的致死率上升为85.56%,PxCAD2则不能增强CrylAc蛋白的杀虫活性;而PxCAD1与PxCAD2本身对于小菜蛾幼虫并无毒性。研究结果为筛选有效的协同片段提供了理论依据,对于揭示Bt杀虫蛋白的毒理机制和害虫对Bt杀虫蛋白的抗性机制具有重要意义。     

不同寄主种群B型烟粉虱体内营养和成虫体长差异比较

［目的］ 探讨以黄瓜、番茄、棉花及甘蓝4种不同植物为寄主对B型烟粉虱体内主要营养物质及成虫体长的影响。［方法］ 以长期隔离饲养的4个B型烟粉虱寄主种群为材料,测定不同寄主种群身体含水量、总糖、总脂、总蛋白及成虫体长,比较不同种群上述各项指标的差异。 ［结果］ 4个不同寄主种群B型烟粉虱体内总糖和总脂肪含量存在显著差异,而含水量和总蛋白含量差异不显著。总糖含量以棉花种群最高,占干重的9.62%;而黄瓜种群总糖含量最低,占干重的6.15%。总脂肪含量以棉花种群最高,占干重的49.57%;而番茄种群仅占干重的34.96%,含量最低。不同寄主植物对B型烟粉虱成虫的体长影响显著。雌成虫体长变化表现为：黄瓜种群>番茄种群>棉花种群>甘蓝种群;而雄虫体长变化为: 黄瓜种群>棉花种群>甘蓝种群>番茄种群。［结论］ 不同寄主植物对B型烟粉虱体内总糖、总脂含量及成虫体长有明显影响。     

湖南农业大学校园昆虫的多样性调查

为优化湖南农业大学校园的生态多样性提供理论依据,于2017年春季对校园进行昆虫采样调查,并进行分类,以明确校园昆虫的种类及分布。结果表明:在湖南农业大学校园共采集到昆虫11目76科157种,其中,鞘翅目44种、鳞翅目38种、双翅目22种、半翅目17种、蜻蜓目11种、膜翅目10种、直翅目10种、蜚蠊目2种,等翅目、革翅目和脉翅目均为1种,其中,害虫71种,天敌37种。综合考虑校园环境情况,可通过增加校园植被类型和改善种植方式,使校园内的生态系统结构进一步优化。     

烟蚜传播黄瓜绿斑驳花叶病毒的可能性及方式

为确定烟蚜体内携带的是否为黄瓜绿斑驳花叶病毒（CGMMV）,采用RT-PCR和序列测定方法对其进行鉴定。本研究通过采集湖南宁乡、郴州、浏阳三个地区的田间烟蚜,提取RNA后反转录成cDNA,并以cDNA作为模板,通过设计引物进行PCR扩增,摇菌后测序。测序结果显示,在烟蚜体内扩增出与黄瓜绿斑驳花叶病毒相似度为99%的RNA病毒。对包括该分离物在内的22个基因核苷酸序列进行同源性比较和系统进化树构建,并结合地域来源进行分析,结果表明烟蚜体内的黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)来源于其携带的CGMMV。通过分析推测,烟蚜可传播黄瓜绿斑驳花叶病毒,且传毒方式为持久性。     

昆虫抗菌肽的研究进展

昆虫抗菌肽是昆虫体内分泌合成的免疫效应因子,具有广谱的杀菌效果。近年来,随着人们对抗菌肽的深入研究,人们发现当病原微生物入侵时,昆虫体内最终合成大量的抗菌肽来应对病原微生物对虫体的破坏。因此,其在昆虫的生长发育过程中具有重要意义,本文从抗菌肽的种类和作用机制两方面做了简述。     

湖南常德地区草地贪夜蛾肠道细菌的鉴定及其寄主分析

对湖南常德地区草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)幼虫的肠道细菌进行分离培养,结合16Sr DNA测序,共分离得到11个细菌分离株,分别归为肠杆菌属(Enterobacter)、泛菌属(Pantoea)、莱略特氏菌属(Lelliottia)、芽孢杆菌属(Bacillus)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)5个属,与分离自玉米粘虫(Mythimna separata)幼虫肠道细菌归属的肠杆菌属、芽孢杆菌属及克雷伯氏菌属在种类上相似;发现草地贪夜蛾幼虫在玉米、豇豆、辣椒和甘蓝等植物上均可存活,存活率分别为70%、50%、17%和10%,这些植物可能是湖南地区的潜在寄主。     

沉默cadherin基因对小菜蛾敏感性的影响

钙粘蛋白(cadherin)是许多鳞翅目昆虫中苏云金芽孢杆菌(Bt)毒素的受体。利用RNAi技术对小菜蛾中肠cadherin基因进行沉默处理,明确了cadherin基因沉默对小菜蛾对Cry1Ac毒素敏感性的影响。结果表明,注射目标dsRNA后的第1天至第5天,Cry1Ac敏感及抗性小菜蛾品系cadherin的基因表达量均显著减少,尤以第2天的减少量最为明显;Cry1Ac毒力测定结果表明,沉默cadherin基因能在一定程度上提高幼虫的成活率,即可使小菜蛾对Cry1Ac毒素的敏感性降低。研究初步表明,cadherin基因的功能与小菜蛾对Cry1Ac毒素的抗性有关。     

Cry1Ac敏感和抗性小菜蛾bre-3和bre-5 基因mRNA的表达差异研究

在室内选用Cry1Ac对小菜蛾Plutella xylostella 3龄幼虫进行抗性选育,获得相对抗性为356倍的抗性种群DBM1Ac-R品系。应用实时定量基因扩增荧光检测(real time quantitative PCR,real-time qPCR)技术检测敏感小菜蛾DBM1Ac-S和抗性小菜蛾DBM1Ac-R品系鞘糖脂(Glycosphingolipids,GSLs)合成酶基因bre-3和bre-5 mRNA在2龄、3龄、4龄和老熟幼虫、蛹及4龄中肠的表达情况。结果显示:bre-3和bre-5在两个品系的5个时期和4龄中肠均有表达,其中DBM1Ac-S品系的bre-3 mRNA在3龄、4龄和老熟幼虫的相对表达量显著高于DBM1Ac-R品系(PPBacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白受体之一GSLs的进一步研究提供了一定的基础。     

昆虫免疫信号转导途径的研究进展

昆虫免疫信号转导途径在昆虫免疫过程中发挥重要作用,当面对不同的病原微生物入侵时,昆虫体内会产生不同的效应机制。目前研究的最多是Toll和Immune deficiency(IMD)两个主要的信号转导途径,它们都能产生免疫活性物质——抗菌肽,但是其诱发的病原微生物有所区别。在昆虫体内存在很多的模式受体,其中肽聚糖识别蛋白是比较重要的免疫受体,不同的受体类型分别参与不同的免疫信号转导途径,为昆虫的生长发育提供保障。本文主要从模式受体和信号转导途径两方面做了简述。