苹果离体叶片高效再生不定芽技术研究

苹果不同品种叶片再生不定芽能力不同,嘎拉再生能力最强,其次是乔纳金,富士最难再生。用继代培养３ 年以上、当代培养３０ ～５０ ｄ 的试管苗,取顶部第２ ～４ 叶位幼嫩叶片,远轴面向下接触培养基,再生效率高。诱导叶片再生不定芽适宜培养基为ＭＳ＋ ＴＤＺ１．０ ｍｇ·ｌ－ １（ 富士、乔纳金）或ＢＡ５ ．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ ＮＡＡ０ ．１ ～０．２ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ 蔗糖３５ ．０ ｇ·ｌ－ １ ＋ 琼脂６ ．２ ｇ·ｌ－ １（ 嘎拉） 。     

四个苹果砧木和品种苹果潜隐性病毒的变温热处理脱毒效果分析

以同时携带ASPV、ACLSV、ASGV 3种潜隐性病毒的"八棱海棠"、"小金海棠"、"华红"和"JAZZ"组培苗为试材,分别采用2种变温热处理方式结合茎尖培养的脱毒方法,运用RTPCR技术对组培苗内病毒进行跟踪检测,研究了不同苹果品种和砧木对变温热处理结合茎尖培养脱除苹果潜隐性病毒的反应以及脱毒苗的适宜检测时机。结果表明:变温热处理条件不同,病毒脱除效果不同。同一热处理条件下,不同苹果基因型其病毒脱除率也不同。"小金海棠"脱毒率最高,"JAZZ"和"八棱海棠"次之,"华红"最低。同时,不同病毒种类的被脱除率存在差异,ASPV最容易脱除,ACLSV居中,ASGV最难脱除。脱毒完成后180d,病毒总检出率最高;220d,3种病毒均有检出,检出顺序为ASGV最先,ACLSV次之,ASPV最晚。因此,对脱毒苗进行多次跟踪检测十分必要。     

根癌农杆菌介导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转入苹果主栽品种

研究建立起一套简单、高效的苹果遗传转化系统。利用根癌农杆菌介导的叶圆片转化法将高效启动的豇豆胰蛋白抑制剂基因（ＣｐＴｌ）转入富士、齐纳金、王林、嘎拉等苹果主栽品种中，经卡那霉素抗性、ＰＣＲ、点杂交、Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交检测证明了４个品种均获得转化再生植株，现已移栽成活。     

‘洛阳红’牡丹组织培养快速繁殖技术研究

以"洛阳红"牡丹组培苗为试材,探讨了不同基本培养基、激素配比、培养条件、抗褐化物质对"洛阳红"牡丹继代苗增殖生长、生根及褐化的影响.结果表明:DKW基本培养基适宜"洛阳红"牡丹继代增殖;培养基中附加2.0～3.0mg/L BA与0.5mg/L IAA或0.05mg/L NAA配比有利于继代苗分化、生长,而附加玉米素ZT效果不佳;20～25℃对"洛阳红"继代苗增殖影响不大,30℃下试管苗很快老化、枯死,不宜采用:1/2MS附加0.2mg/LNAA或2.0mg/LIAA与2.0mg/L IBA配比可促进"洛阳红"牡丹试管苗不定根诱导;继代和生根培养基中附加0.5g/L PVP可有效减轻‘洛阳红''牡丹组培苗褐变,促进继代苗分化、生长,但对生根没有明显影响.     

‘红国王’葡萄组织培养快速繁殖

为建立‘红国王’葡萄组培快繁体系,本试验研究了生长素、接种材料类型、培养条件对组培苗继代增殖与生根的影响。结果表明,0.5 mg/L IAA适合‘红国王’的继代增殖,繁殖系数为5.49,在培养基中附加0.3 mg/L NAA,愈伤组织少且根系粗壮;适合‘红国王’组培苗生长的蔗糖浓度为25~30 g/L,在该浓度下植株长势健壮,生根条数多;带半叶单芽茎段为‘红国王’适宜接种材料类型;接种后第1天至第10天暗培养,可促进‘红国王’根系发育;放置于LED灯复合光红∶蓝∶白=3∶1∶1下,可获得长势强、根系强壮的组培苗;继代间隔为40 d时,繁殖速度较快。     

基质及营养液对苹果矮砧组培苗移栽后生长的影响

以苹果矮化砧木SH2s、SH29生根组培苗为试材,研究了不同草炭土与蛭石基质配比、草炭土处理方式及3种营养液浇灌(MS、园试配方、霍格氏配方)对移栽组培苗生长的影响.结果表明:以草炭土与蛭石1∶2或1∶1配比为移栽基质,组培苗移栽成活率较高,分别达90.77％和88.24％,显著高于草炭土与蛭石2∶1配比;同时草炭土与蛭石1∶1配比处理还可有效提高幼苗生长量.草炭土经灭菌处理后,组培苗单株叶面积及单叶片面积显著增加,苗木生长更健壮.基质中添加0.1％枯草芽孢杆菌对幼苗生长量未见显著作用.MS、霍格兰、园试3种营养液浇灌40d后,均可使移栽幼苗生长量显著大于对照,综合效果以MS营养液促苗效果最佳.     

苹果砧木离体培养中玻璃化问题的研究

本试验分别从形态、解剖、生理生化特性、发生因素等方面对苹果砧木试管苗玻璃化现象进行了研究,探讨了玻璃苗成因及有效防治途径。玻璃苗发生的主要原因之一是由于培养体系水分状况不适导致试管苗结构及生理代谢发生了变化。经对比试验,认为在继代培养基中添加1.5—2.0g/l的聚乙烯醇是日前防治玻璃苗行之有效的方法。     

苹果茎尖培养中无菌繁殖系建立的研究

试验以苹果品种新红星、奥查金、美铃７为试材，对影响无菌繁殖系建立的两个主要因素即污染率和分化率进行了研究。结果表明：在４月下旬，各品种均已展叶４￣５片时接种生长点，污染率较低，成活率较高，且易于生长分化。并发现不同品种间分化难易程度有很大差异，新红星是一个较难分化的品种，通过研究，其较适的组培条件是：改良Ｃ１７＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ为起始培养     

苹果轮纹病病菌分生孢子离体人工诱导技术研究

为进一步了解苹果轮纹病菌的生物学特性,解决其在离体培养条件下产生分生孢子很少的问题,研究了培养基pH、培养温度、光源和光照条件对菌丝体生长和分生孢子发生的影响以及刮除菌丝体对分生孢子发生的影响。结果表明,24～28℃较适宜菌丝体生长,24℃时分生孢子囊和分生孢子发生最多;培养基pH5.0以及接种后在黑光灯下培养有利于分生孢子囊和分生孢子产生;菌丝体生长到一定程度后,刮除菌丝体对分生孢子囊和分生孢子的发生有显著促进作用。     

‘洛阳红’牡丹组织培养快速繁殖技术研究

以‘洛阳红’牡丹组培苗为试材,探讨了不同基本培养基、激素配比、培养条件、抗褐化物质对‘洛阳红’牡丹继代苗增殖生长、生根及褐化的影响。结果表明：DKW基本培养基适宜‘洛阳红’牡丹继代增殖;培养基中附加2.0～3.0mg/L BA与0.5mg/L IAA或0.05mg/L NAA配比有利于继代苗分化、生长,而附加玉米素ZT效果不佳;20～25℃对‘洛阳红’继代苗增殖影响不大,30℃下试管苗很快老化、枯死,不宜采用;1/2MS附加0.2mg/L NAA或2.0mg/L IAA与2.0mg/L IBA配比可促进‘洛阳红’牡丹试管苗不定根诱导;继代和生根培养基中附加0.5g/L PVP可有效减轻‘洛阳红’牡丹组培苗褐变,促进继代苗分化、生长,但对生根没有明显影响。