动物源性农产品产地溯源技术研究

产地溯源技术对于保障农产品安全、保护地区优质农产品尤为重要。本文重点围绕稳定同位素技术、矿物元素指纹图谱技术、近红外光谱技术等在动物源农产品产地溯源方面的研究进展进行了介绍,并对动物源性农产品产地溯源技术的研究和应用提出了一些建议。     

基于体外细胞模型的霉菌毒素毒性评价

霉菌毒素是由多种真菌产生的次级代谢产物,广泛存在于食品和饲料中。霉菌毒素污染的粮食和饲料会给畜牧业生产和畜产品质量安全带来极大隐患。研究霉菌毒素致毒机理,为今后研究其对动物及人的影响开展更深入更全面的研究提供理论依据。细胞模型作为一种常用的体外试验方法广泛用于毒理学研究中。本文简述了黄曲霉毒素B_1(AFB_1)、赭曲霉毒素A(OTA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEA)和展青霉素(PAT)的一般特性,并综述了利用细胞模型进行AFB_1、OTA、DON、ZEA和PAT毒性、联合毒性及致毒机理研究的进展。     

免疫分析技术在兽药残留检测中的应用

兽药残留对环境和人类健康构成严重威胁,使得动物源性食品安全问题日益突出,迫切需要开发简便、价廉、快速的兽药残留快速检测技术.目前各种免疫分析技术已广泛应用于兽药残留快速检测领域,本文主要概述了酶联免疫分析法(ELISA)、量子点荧光免疫分析(QIA)、放射免疫分析法(RIA)、荧光偏振免疫分析(FPIA)、胶体金免疫层析法(GICA)及蛋白质芯片免疫分析技术.     

利用侧流核酸试纸条快速检测非洲猪瘟病毒

为满足基层普通实验室或养殖场等资源有限的实验室对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的检测需求,该研究开发了一种简单、快速、低成本的检测技术,可以用肉眼观察检测结果。研究将传统聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与胶体金试纸条技术结合,开发一种低成本的侧流核酸测定试纸条(lateral flow nucleic acid assay,LFNAA)。该体系设计了独特的尾引物,避免了传统核酸试纸条的半抗原标记及抗体的使用。经过PCR扩增后产生一端带着单链寡核苷酸尾巴的双链DNA产物,能够与胶体金标记的寡核苷酸捕获探针结合,从而在试纸条上形成可以用肉眼观察的目标产物。该LFNAA试纸条能够在猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CFSV)、猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪圆环病毒1型(Porcine circovirus 1,PCV1)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)、猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus virus,PPV)中特异的鉴定出ASFV的存在,其灵敏度与琼脂糖凝胶电泳的分析结果一致,均能达到103 copies/μL。因此,仅需要一台普通PCR仪,即可对ASFV进行快速灵敏的鉴定(<2 h),其低成本、操作简便的特点非常适合资源有限的实验室中非专业人员的操作。此外,该技术可进一步结合等温扩增技术,能够在食品安全和医学诊断中实现更快更简便的现场检测。     

β_2AR表达纯化及其在β_2激动剂多残留检测中的应用

β2肾上腺素受体(β2adrenergic receptor,β2AR)激动剂(β2激动剂)是一类结构和功能类似肾上腺素的苯乙醇胺类化学合成衍生物,主要用于防治人、兽支气管哮喘和支气管痉挛,对动物具有促进     

适配体试纸在霉菌毒素检测中的应用研究

适配体试纸是将核酸适配体的灵敏特异性与试纸条技术的简单快速相结合而开发的一种新型检测方法,在食品安全检测、环境污染物监测以及临床诊断方面具有很好的应用前景。本文在介绍适配体以及适配体试纸基本原理的基础上,综述了目前已经筛选到的霉菌毒素适配体以及适配体试纸在霉菌毒素检测中的应用研究进展,讨论了适配体试纸在霉菌毒素检测领域的发展趋势。     

SNP检测方法在动物研究中的应用

单核苷酸多态性(SNP)作为第三代分子标记技术,以其数量丰富、遗传稳定性高、易于快速自动化检测等优点备受关注。该文综述了基于不同原理的SNP分型检测方法,包括几种常见的测序技术、基于酶学及杂交原理的分析检测技术和基于色谱及质谱的相关技术。阐释了方法的原理、分析了方法的优缺点及适用范围。总结了目前在动物遗传育种、亲缘鉴定、动物品种及产品溯源等方面的应用研究现状。为下一步开发更灵敏准确、简便易行、高通量及低成本的SNP检测方法及拓展SNP的应用领域提供参考。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮对癌细胞的促增殖和促迁移作用

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)对人结直肠腺癌细胞(HCT116细胞)、人肺癌细胞(A549细胞)、人肝癌细胞(Hep G2细胞)的促增殖和促迁移作用。设空白对照组,并以赭曲霉毒素A(OTA)作为阳性对照,采用噻唑蓝(MTT)比色法和细胞划痕愈合试验分别检测细胞活力和细胞迁移能力。结果表明:与空白对照组相比,0.080、0.400μmol/L OTA能显著或极显著增强HCT116、A549和Hep G2细胞活力(P0.05或P0.01),50.000μmol/L OTA则能极显著降低HCT116、A549和Hep G2细胞活力(P0.01);DON在低浓度(0.016、0.080μmol/L)时对HCT116和A549细胞活力无显著影响(P0.05),但能极显著增强Hep G2细胞活力(P0.01),而在DON中高浓度(2.000、10.000、50.000μmol/L)时则能极显著降低HCT116、A549和Hep G2细胞活力(P0.01);ZEN浓度在0.016~50.000μmol/L时能显著或极显著增强Hep G2细胞活力(P0.05或P0.01),ZEN在高浓度(50.000μmol/L)时能极显著降低HCT116和A549细胞活力(P0.01)。细胞划痕愈合试验结果表明,与空白对照组相比,1、10 nmol/L OTA、DON和ZEN作用24、48 h能极显著促进Hep G2细胞迁移(P0.01)。由此可见,在0.016~50.000μmol/L浓度内,DON和ZEN对Hep G2细胞有显著的促进增殖和迁移的作用,表明DON和ZEN在Hep G2细胞系上具有潜在的致癌性。     

毛干DNA的快速提取及其对PCR的影响

[目的]建立毛干DNA快速稳定的提取扩增策略,使这一简便取材能在畜牧、野生动物保护等采样困难的领域得以普及应用.[方法]采用PCR缓冲液快速提取及2轮PCR逐级稀释扩增的策略提取扩增黄牛毛干DNA微卫星位点.[结果]该方法可从低至0.1mg（约1 cm长）的毛干中提取得到DNA,并成功扩增核DNA微卫星位点.48份黄牛牛毛样本均成功提得DNA.72份扩增样本,除4份样本扩增效果较差,其余样品均能正常扩增.[结论]该研究方法可快速稳定的提取扩增目标基因,为毛干在相关领域的普及应用奠定了基础.     

适配体制备技术及其在农产品化学污染物检测中的应用

通过指数富集配体系统进化技术筛选的核酸适配体,依靠其特定的三维结构可以和包括小分子、蛋白、核酸,甚至细胞、组织等在内的各种靶分子高亲和力高特异性结合。与传统识别分子抗体相比,具有制备简单、性能稳定、便于标记等优点,成为分析化学领域一种新的分析工具。本文综述了适配体制备技术以及适配体在农产品中农兽药残留、违禁添加物、生物毒素检测方面的应用研究进展。