赖氨酸修饰对梯棱羊肚菌黑色素结构和理化特性的影响

为了进一步提高梯棱羊肚菌黑色素的提取率及溶解性,本试验采用单因素、Plackett-Burman试验、响应面试验对纤维素酶-超声波协同提取梯棱羊肚菌黑色素的提取工艺进行优化研究。通过赖氨酸修饰,并对修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素进行结构表征、理化性质及稳定性研究。结果表明,在NaOH浓度为1.54 mol/L,纤维素酶添加量为20 mg/g,纤维素酶酶解时间为78.6 min,料液比为1:30,酶解温度为40 ℃,超声时间为80 min条件下提取的梯棱羊肚菌黑色素最优。未修饰的梯棱羊肚菌黑色素不溶于水,色价值为480.24,修饰后的黑色素溶解度为1 016 g/L,色价值为1 771.18,比未修饰的黑色素在溶解性、色价值方面均有所提高。此外,在不同的温度、光照、pH条件下,修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素均比较稳定。以上研究结果为梯棱羊肚菌黑色素的高效提取及其产品的开发利用奠定了理论基础。     

pIRES2-EGFP-prnd真核表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达

为探讨叠朊蛋白(Doppel)在正常生理条件及相关疾病中的临床及生物学意义,构建BALB/c小鼠Doppel基因prnd的重组真核表达质粒pIRES2-EGFP-prnd,并转染BHK细胞,IFA检测其表达情况。结果表明,Doppel蛋白通过pIRES2-EGFP-prnd在BHK细胞中表达。试验可为进一步研究Doppel蛋白的结构、正常的生理生化功能及其与相关疾病的关系提供重要工具。     

超声波辅助提取绣球菌麦角甾醇的工艺优化

采用超声波辅助提取绣球菌麦角甾醇的方法,通过单因素试验和正交试验,对影响绣球菌麦角甾醇提取效果的主要因素提取溶剂、料液比和超声波处理时间进行研究,并建立了绣球菌中麦角甾醇紫外分光光度法(UV法)快速检测方法。结果表明,对绣球菌麦角甾醇提取量影响的因素按先后顺序依次为提取剂、超声波提取时间和料液比;最佳提取工艺条件为以三氯甲烷为提取剂、料液比1∶20(g/m L)、超声波提取时间80 min,在此条件下,得到的麦角甾醇含量最高。UV法测定麦角甾醇的线性范围为5.00～50.00μg/m L,相关系数为0.994 5,该方法的精密度、稳定性和重复性都表现良好,适用于绣球菌生产及对生物量的间接测定。     

獭兔睾丸组织形态观察

獭兔是一种典型的经济动物,它既是毛皮动物又可食用,普遍应用于人类生产生活。目前已有研究报道了多种哺乳动物生精周期研究,但很少有关于獭兔的报道。本实验对2只完全性成熟的健康獭兔进行睾丸结构,生精周期相对频率,支持细胞效率研究。獭兔睾丸经石蜡包埋,HE染色以便进行组织形态学观察。不同的生殖细胞组合分析显示30%的曲精小管显示两个或两个以上的生精上皮周期阶段。獭兔生精周期阶段频率(%)分别为:阶段1:(15.5±2);阶段2:(14.0±1);阶段3:(11.5±1);阶段4:(8.5±1);阶段5:(10.5±1);阶段6:(18.5±2);阶段7:(13.0±1);阶段8:(8.5±1)。支持细胞效率(圆形精子:支持细胞=7:1)。本研究结果表明獭兔的生精效率较其他哺乳动物高。     

氯甲基蛋氨酸对冷冻-束缚应激大鼠消化器官组织学结构的影响

为探讨氯甲基蛋氨酸对应激性胃溃疡的预防效果,制备了大鼠急性冷冻-束缚应激模型,通过观察冷冻-束缚应激所致大鼠消化系统器官的损伤性变化及氯甲基蛋氨酸对应激状态下大鼠消化器官组织结构的影响,判定氯甲基蛋氨酸对应激性胃溃疡的作用。结果表明,氯甲基蛋氨酸对大鼠冷冻-束缚应激性胃溃疡的消化系统器官具有明显的保护作用。     

SD大鼠层粘蛋白受体基因的克隆与序列分析

以大鼠大脑皮质神经元的总RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增了SD大鼠层粘蛋白受体基因, 并将其克隆到pMD18-T Simple载体中进行测序,运用分子生物学软件对获得序列进行了分析.结果表明所克隆的SD大鼠层粘蛋白受体基因的ORF片段包含了朊蛋白基因的完整编码区,共888个核苷酸, 该基因内无内含子,编码295个氨基酸的前体蛋白,推测其相对分子质量约32.6 kD.与已报道的绵羊、家鼠、猪、牛、人相应序列作比较,发现其核苷酸序列和氨基酸序列具有较高的同源性.氨基酸序列分析表明,SD大鼠层粘蛋白受体的氨基酸点突变位点为V176M,G243E.研究结果为探讨层粘连蛋白受体基因的功能及其在疾病发生、发展过程中的作用提供了基础数据.     

双孢蘑菇酶解液的制备及GC-MS分析

采用碱性蛋白酶、纤维素酶和碱性蛋白酶复合纤维素酶对新鲜双孢蘑菇子实体进行水解,设计L9(34)正交试验考查温度、pH值、酶添加量和时间对蛋白水解度的影响,制备蛋白水解度最高的酶解液,利用GC-MS对其中的挥发性物质进行分析。结果表明,纤维素酶最佳酶解参数为温度50℃,pH值5.0,酶添加量0.8%,时间120 min;碱性蛋白酶最佳酶解参数为温度40℃,pH值10.5,酶添加量0.9%,时间150 min。用碱性蛋白酶复合纤维素酶水解双孢菇后,水解度达20.80%,共有33种挥发性成分。     

短波紫外线处理对采后香菇褐变的影响

为了控制采后香菇在贮藏过程中的褐变并提高其贮藏品质,本试验采用不同剂量(2、4、6和8 kJ·m^-2) 短波紫外线(UV-C)对新鲜香菇进行预处理,研究不同剂量UV-C处理对香菇色泽、总酚含量、多酚氧化酶(PPO)活性、过氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性、可溶性蛋白含量、还原糖含量、游离氨基酸含量以及香菇表面微生物的影响。结果表明,UV-C处理延缓了香菇色泽的下降,保持了较高的总酚含量,并且有利于POD、SOD、CAT和PAL活性维持在较高水平,抑制了PPO活性,同时可以保持较高的还原糖和可溶性蛋白含量,在一定程度上延缓了蛋白质的降解,而且可以有效抑制微生物的生长,其中4 kJ·m^-2 UV-C处理效果最佳。综上所述,UV-C处理可以有效地抑制香菇褐变,延长其贮藏期。本研究结果为香菇的贮藏保鲜提供了理论依据。     

促糖基化对香菇蛋白质消化特性及消化产物抗氧化活性的影响

为探讨促糖基化对香菇（Lentinula edodes）蛋白质消化特性及消化产物抗氧化活性的影响,采用碱溶酸沉法提取子实体蛋白质,并制备糖基化和谷氨酰胺转氨酶（transglutaminase, TGase）促糖基化蛋白质,通过模拟胃肠消化分别测定蛋白质组（C）、糖基化蛋白质组（G）和促糖基化蛋白质组（TG）的蛋白质消化率、水解度、蛋白质消化产物中的游离氨基酸和多肽含量,以及蛋白质消化产物的DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、羟基自由基清除率和总抗氧化能力。结果表明：与C组相比,G组在模拟消化90、120、180、240、270min时和TG组在模拟消化90、120、210、240、270min时消化率显著降低,且G与TG组间无显著性差异;在模拟消化60 min时G组水解度显著增加,在90～360 min时显著降低,TG组在模拟消化30、60、150～240、300 min时显著增加,且在模拟消化60～360 min时显著高于G组;G组在模拟消化60、210～360 min时和TG组在模拟消化0、60～360 min时游离氨基酸含量显著增加,且在模拟消化0、120、300～3...     

SD大鼠和BALB/c小鼠PRND基因的克隆和序列分析

以睾丸总RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增了SD大鼠和BALB/c小鼠的叠朊蛋白(PRND)基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行测序,运用生物信息学软件对这些序列进行了分析。结果表明获得的SD大鼠和BALB/c小鼠PRND基因的完整ORF片段,基因无内含子,分别编码178和179个氨基酸的前体蛋白。与GenBank登录的其他同品种鼠相应序列进行比较,SD大鼠发生了G187C点突变,相应地引起了G63R的氨基酸改变;BALB/c小鼠发生了G12T、C13G和C528T点突变,但只发生了L5V的氨基酸改变,其余均为同义置换。氨基酸一级结构分析显示2种PRND编码的Dopple蛋白均由氨基端的信号肽、中间的成熟蛋白和羧基端的GPI锚定结合区组成。二级结构预测表明,Dopple蛋白由3个α-螺旋和2个β-折叠片层组成。研究结果为进一步研究Dopple蛋白的结构、功能及其在传染性海绵状脑病发生发展中的作用提供了基础数据。