K562细胞转染HLA-B分子对NK细胞杀伤功能的影响

为了研究不同HLA B分子对NK细胞杀伤活性的影响 ,我们分别构建pcDNA3 HLA B 390 5 2、B 2 70 4、B 5 1 0 2 2基因真核表达载体 ;借助脂质体将各质粒转染入K5 6 2细胞 ,经G4 1 8筛选 ,分别获得阳性表达细胞株 ;并应用LDH法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应。结果显示 :与转染了空质粒的对照组相比 ,外周血NK细胞对K5 6 2 B39的杀伤率无明显影响 ,而对K5 6 2 B2 7,K5 6 2 B5 1的杀伤率降低。当使用针对NK细胞受体KIR3DL1的单抗DX9封闭NK细胞后 ,此抑制效应大部分消失。提示靶细胞表达HLA Bw4分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应 ,而表达HLA Bw6分子对NK细胞杀伤功能无明显影响     

结肠癌患者自体瘤细胞对不同来源淋巴细胞功能的影响

目的：研究结肠癌患者自体瘤细胞对肿瘤浸润淋巴细胞、肿瘤引流淋巴结的淋巴细胞、外周血淋巴细胞的影响。方法：比较结肠癌患者自体肿瘤细胞对体外培养TIL、PBL、LNL细胞增殖、诱生细胞因子（IL－2、TNFα、IFNγ）水平的影响。结果：发现结肠癌患者的TIL和PBL、LNL相比，CD8^ 细胞增加，CD4^ 细胞减少。PBL和LNL对PHA、rhIL-2刺激产生的细胞增殖能力比TIL强。PBL能产生较高水平的TNFα和IFNγ，而IL－2产生水平较低；LNL产生高水平的TNFα和IL－2，但仅产生低水平的IFNγ。TIL产生的TNFα、IFNγ水平较PBL、LNL低。实验结果表明结肠癌患者自体肿瘤细胞对不同来源淋巴细胞的细胞因子分泌有不同影响，其机制有待进一步研究。     

线粒体解偶联蛋白1基因缺陷小鼠淋巴细胞的频率及活性变化

目的探讨解偶联蛋白1(UCP1)基因缺陷小鼠体内淋巴细胞的频率及其功能变化。方法利用流式细胞术检测UCP1-/-小鼠和对照组小鼠脾脏、外周血、胸腺或骨髓CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)和B淋巴细胞的频率;并利用胞内染色法,检测CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的频率以及CD4~+和CD8~+产生干扰素-γ(IFN-γ)的活性。结果生理状态下UCP1-/-小鼠和对照小鼠相比,胸腺T细胞、NK细胞及骨髓B细胞的频率无显著差异; UCP1~(-/-)小鼠脾脏总CD8~+T细胞频率、活化性CD8~+T细胞(CD8~+NKG2D~+、CD8~+CD44~+CD62L-)和效应性CD8~+T细胞(CD8~+CD44~+KLRG1~+)频率下降,且IFN-γ分泌减少;脾脏和外周血CD4~+T细胞的频率及其活性,NK细胞和B细胞的频率均无显著变化。结论UCP1缺陷对淋巴细胞的发育无影响,但下调CD8~+T细胞的活性。     

强直性脊柱炎发病的遗传因素研究进展

强直性脊柱是以遗传因素占主导地位的疾病，由B27和其他相关基因参与。本就其在遗传因素上的病因综述了HLA－B27与强直性脊柱炎的关联、家系研究、动物模型、全基因组扫描和其他相关基因方面的研究进展。     

重组可溶性MHC Ⅰ类相关蛋白A对NK细胞生物学活性的影响

目的:研究体外重组可溶性MHC Ⅰ类相关蛋白A(sMICA)对NK细胞杀伤靶细胞活性、分泌IFN-γ、增殖和凋亡的影响.方法:将重组sMICA蛋白与人外周血NK细胞相互作用过夜后,流式细胞仪检测NK细胞杀伤K562靶细胞的能力;ELISA检测培养上清IFN-γ浓度;MTS/PMS法检测sMICA对NK细胞增殖的影响;给NK细胞标记Annexin V和碘化丙啶检测凋亡情况.结果:可溶性MICA抑制NK细胞杀伤K562细胞的活性,下调IFN-γ的分泌,却对NK细胞的增殖和凋亡没有影响.结论:肿瘤细胞表面脱落的sMICA抗原可通过抑制NK细胞活性而逃逸机体的免疫监视功能.     

医学本科生导师制在省属综合性大学的实践与思考

本科生导师制是辅助卓越医学人才培养、改革人才教育模式及促进教师素质提高的一种重要手段.文章就扬州大学临床医学专业本科生导师制的实施模式及成效进行阐述,总结和分析影响导师制效果的因素,对进一步完善导师制具有重要意义.     

MICA基因研究进展

MICA基因是非经典的 HL A- I类基因 ,位于 HL A - B位点着丝粒端的 46 kb左右。由 6个外显子构成 ,具有高度的多态性。分子结构与经典的 I类分子重链相似 ,包括 3个胞外结构域 :α1、α2和α3,加上跨膜区和胞质尾 ,但它不与β2 m结合。MI-CA大量表达在上皮细胞和纤维母细胞的表面 ,却在 T、B细胞表面不表达。受到热应激后表达量大大增强 ,但受 IFN-γ刺激后不能上调表达。其功能主要激活 Vδ1γδT细胞 ,在机体的免疫监视中发挥作用。并且发现 MICA存在与某些自身免疫性疾病(如白塞氏病、强直性脊柱炎 )的关联     

032 KIR研究进展

NK细胞能够识别"自己"和"非已"的特性,主要通过其表面的激活性受体和抑制性受体来执行.杀伤细胞免疫球蛋白样受体是表达在NK细胞和部分T细胞的表面的一类受体,本文拟从KIR的基因结构、多态性、KIR与MHCⅠ类分子的相互作用、胞内信号传导及其功能等方面作一综述.     

三个HLA-B分子影响血清阴性脊柱关节病外周血NK细胞毒活性的研究

目的探讨HLA-B27、B39和B51抗原分别在K562细胞表达后,对血清阴性脊柱关节病(SpA)外周血NK细胞毒活性的影响。方法采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法,分别测定9例SpA病人和9名正常人外周血NK细胞对表达HLA-B27、B39和B51抗原的K562细胞及转染空pcDNA3质粒的K562细胞的杀伤效应。结果SpA病例组和正常对照组均显示B27和B51抗原表达于K562细胞后,能阻断NK细胞毒活性,而B39不能阻断NK细胞毒性;当比较病例组和正常组之间NK细胞分别对K562,K562-B27、B39和B51细胞的杀伤效应时,显示两组外周血NK细胞对K562细胞、转染B27、B39和B51分子的K562细胞的毒性差异均无显著性(P>0.05)。但是,SpA病例组中NK细胞对HLA-B27转染的K562细胞杀伤效应与正常组相比,虽然差异未达到显著水平,但显示了一定程度的偏低(P<0.1)。结论K562细胞表达HLA-Bw4分子后,明显抑制NK细胞的杀伤效应,而表达HLA-Bw6分子对NK细胞杀伤功能无明显影响;而且提示B27阳性的SpA患者体内,外周血NK细胞毒活性偏低。     

HLA-A*0201/CAP-1四聚体在结直肠癌研究中的应用1

目的:应用HLA-A*0201/CAP-1四聚体,分析HLA-A*0201+CEA+结直肠癌患者的外周血及癌旁肠系膜引流淋巴结的特异性CTLs的数量。方法:分离健康人(18例)PBMC和结直肠癌(23例)患者PBMC以及癌旁肠系膜引流淋巴结的淋巴细胞,应用流式细胞术,以HLA-A*0201/CAP-1和HLA-A*0201/FLUmp四聚体检测CAP-1和FLUmp特异性CTLs的频率。结果:在25例HLA-A*0201+个体中,结直肠癌组和正常组外周血单个核细胞中HLA-A*0201/FLU四聚体+CD8+细胞的频率分别为(0.671±0.421)%和(0.564±0.408)%,两组之间无显著差异(P=0.525)。结直肠癌组和正常组外周血单个核细胞中HLA-A*0201/CAP-1四聚体+CD8+细胞的频率分别为(2.409±2.385)%和(0.020±0.021)%,两组之间有显著差异(P=0.008)。结论:HLA-A*0201+结直肠癌患者HLA-A*0201/CAP-1四聚体+CD8+细胞的频率升高,说明CEA特异性CTLs在结直肠癌患者的免疫监视功能中具有重要的作用。对存在针对肿瘤抗原的特异性CTLs却无法阻止肿瘤进展的具体机制需要更加深入的研究。