肺炎链球菌蛋白质疫苗研究进展

随着肺炎链球菌(SP)耐药菌株的不断出现使得疫苗研发备受关注,但目前使用的荚膜多糖及其结合疫苗有很大局限性。因此,针对SP主要毒力因子的蛋白质疫苗迅速发展,其中SP单一蛋白质疫苗包括溶血素、表面蛋白A、表面黏附素A、三组氨酸蛋白D、黏附毒力因子A,蛋白质联合疫苗包括多价重组蛋白质联合疫苗、多价蛋白质融合疫苗,已取得一定实验和临床效果,有望替代多糖疫苗。     

肺炎链球菌SP2108蛋白的原核表达及免疫原性分析

目的制备纯化的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)SP2108蛋白,分析其在常见S.pn菌株中的保守性,并评价其作为S.pn候选疫苗的可行性。方法利用PCR法扩增全长SP2108基因,将其克隆至原核表达载体p Cold TF中,转化E.coli BL21(DE3)后IPTG诱导蛋白表达,经Ni-NTA树脂纯化获得高纯度的目的蛋白;将纯化蛋白免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA检测效价,Western blot鉴定该蛋白在6种常见S.pn菌株的保守性。从Genebank中找出不同S.pn菌株的SP2108蛋白质氨基酸序列,并用Clustal X 2.1软件分析其序列保守性。结果获得了可溶性形式的SP2108蛋白,该重组蛋白免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体;Western blot验证了SP2108蛋白在6株常见S.pn菌株中均有表达;SP2108蛋白在不同型别S.pn中氨基酸序列保守性为100%。结论原核表达并纯化了SP2108蛋白,该蛋白保守性高,免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体,可能是一种较好的S.pn候选蛋白疫苗。     

一株致多器官功能衰竭非O1/O139群霍乱弧菌的鉴定

目的对1例不洁饮食致多器官衰竭患者血液中霍乱弧菌进行鉴定。方法取患者静脉血进行细菌的分离培养,观察细菌的形态特征,并进行生化试验、质谱鉴定、血清学检测、16SrRNA分析、毒力基因检测。结果分离菌初步鉴定为非O1/O139群霍乱弧菌。MALDI-TOF MS鉴定该菌为霍乱弧菌,置信度99.9%。16SrRNA扩增产物测序后经blast分析,与数据库中霍乱弧菌相似性为99%。该菌无毒力基因ctx、Tcp,毒力基因lolB、toxR、rtxC、hlyA、Hap、PrtV、ompU均阳性。结论该致病菌为非O1/O139群霍乱弧菌,患者发生急骤性多器官功能衰竭死亡可能与该菌携带lolB、toxR、rtxC、hlyA、Hap、PrtV、ompU等毒力基因密切相关。