1例宫颈腺样囊性癌的临床、病理特点及诊断

目的 总结宫颈腺样囊性癌的临床、病理特点及诊断方法。方法 回顾性分析1例宫颈腺样囊性癌的临床资料。结果 患者女，40岁，“以性生活阴道出血2+月”入院。外院HPV检测显示HPV16型阳。核磁提示宫颈外口少许异常强化灶，专科查体宫颈肥大，余触诊未见异常。镜下肿瘤组织由导管腺上皮和变异肌上皮这两种细胞组成。肿瘤细胞巢呈圆形、椭圆形，有的细胞巢周围呈栅栏样排列，可见明显的粉刺样坏死。免疫表型P16、CK7、CD117、Bcl2弥漫阳性，P63、P40、CEA、CK5/6部分阳，Syn、CgA阴性，Ki-67指数热点区80%+。结论 宫颈腺样囊性癌主要表现为阴道出血，但缺乏特异性表现，具有易复发及远处转移的特点，肿物可通过阴道镜检查发现，大体上与其他宫颈肿瘤不易区分，明确诊断需行病理检查；病理检查显示肿瘤细胞巢呈圆形、椭圆形，有的细胞巢周围呈栅栏样排列，可见明显的粉刺样坏死，免疫表型P16、CK7、CD117、Bcl2弥漫阳性及P63、P40、CEA、CK5/6部分阳性；通过病理组织学及免疫组化P16、CD117等可以明确诊断，但应与腺样基底细胞癌、基底样鳞状细胞癌、神经内分泌癌进行鉴别。宫颈...     

pTAT-XIAP融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得pTAT-XIAP融合蛋白;为其用于神经系统疾病的治疗奠定基础。方法体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,转入大肠杆菌表达菌株BL21plysS进行诱导表达。SDS-PAGE及Western blot法鉴定融合蛋白。结果表达产物经SDS-PAGE及Western blot分析后,于64 kD处有一明显表达条带,与理论结果相符。结论成功构建了pTAT-XIAP原核表达载体并成功表达出目的融合蛋白,该载体成功表达pTAT-XIAP融合蛋白,有望用于临床神经系统疾病的治疗。     

反式转录激活因子-X连锁凋亡抵制蛋白融合蛋白对阿尔茨海默病模型大鼠Caspase-3表达与活性的抑制

目的:探讨β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)海马内注射所致的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑内Caspase-3表达与活性变化及反式转录激活因子-X连锁凋亡抵制蛋白(TAT-XIAP)融合蛋白的干预作用.方法:SD大鼠随机分为盐水对照组、AD模型组及治疗组,采用双侧海马内注射Aβ25-35建立AD模型,造模后6周尾静脉注射TAT-XIAP融合蛋白,连续给药4周后处死动物,通过RT-PCR和免疫组织化学研究AD大鼠大脑皮质与海马Caspase-3 mRNA表达及蛋白的活性变化,TATXIAP融合蛋白对上述作用的干预.结果:AD模型组大鼠大脑皮质与海马Caspase-3 mRNA表达上调,模型组大脑皮质和海马Caspase-3表达分别是对照组的2.03倍和1.72倍;活化的Caspase-3位于细胞核,AD模型组大鼠大脑皮质与海马Caspase-3蛋白活性增强,模型组大脑皮质和海马Caspase-3活性分别是对照组的1.62倍和1.64倍.应用TAT-XIAP融合蛋白后,大鼠皮质与海马Caspase-3表达与活性均降低;治疗组与模型组比较大脑皮质和海马Caspase-3表达分别下降了9％和44％,Caspase-3活性分别下降了36％和28％.结论:本实验结果表明Aβ25-35可上调Caspase-3 mRNA表达,活化Caspase-3;TAT-XIAP融合蛋白可抑制AD模型大鼠Caspase-3 mRNA的表达和活性.     

阿尔茨海默病治疗手段的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是以认知功能障碍和记忆损害为主要临床特征的神经退行性疾病,AD的发生隐匿,早期不易被发现,且病程呈渐进性发展,其典型临床症状的产生给家庭和社会都带来了诸多问题。目前已成为世界上继心脏病、肿瘤和脑卒中之后的第四大死亡原因,其早期诊断及防治成为一个世界性难题。现就AD的药物治疗及非药物干预治疗手段的最新研究进展予以综述。     

莪术油对鼻咽癌细胞X-连锁凋亡抑制蛋白mRNA表达的影响

目的:研究莪术油对鼻咽癌细胞X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)mRNA表达的影响及其作用机制。方法:体外培养鼻咽癌CNE-2细胞,MTT(噻唑蓝)法观察莪术油(400,300,200,100 mg·L-1)对CNE-2细胞的抑制作用,RT-PCR法检测莪术油对CNE-2细胞XIAPmRNA表达的影响。结果:MTT法结果显示,莪术油对CNE-2细胞的抑制率呈时间-剂量依赖性(P<0.01)。与对照组相比,莪术油139.41 mg·L-1组XIAPmRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论:莪术油能明显抑制鼻咽癌CNE-2细胞生长,其机制可能是通过抑制XIAP基因的表达。     

吡柔比星对鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨吡柔比星对鼻咽癌（NPC）CNE2细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养NPC细胞株CNE2,加入不同浓度的吡柔比星。用MTT法检测细胞增殖情况;用RT-PCR法检测NPC细胞株中X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）mRNA的表达情况。结果吡柔比星对NPC细胞的增殖有抑制作用,并诱导其发生凋亡,且呈明显的时效和量效关系,其作用随着浓度及时间的增加而增加;RT-PCR法检测显示XIAP mRNA表达下调。结论吡柔比星可抑制体外培养的NPC细胞株CNE2的增殖和诱导细胞凋亡,其作用与下调XIAP基因表达有关。     

pTAT-XIAP融合蛋白的原核表达及纯化

目的将X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)插入质粒pTAT-HA,构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得高产量、高纯度的pTAT-XIAP融合蛋白。方法将pTAT-XIAP融合蛋白表达载体转入大肠杆菌BL21plysS,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白表达,产物经镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)亲和层析纯化,并用Western blot方法鉴定。结果 pTAT-XIAP融合蛋白在大肠杆菌中获得表达,纯化后蛋白呈单一条带,表达产物经Western blot分析证实目的蛋白表达。结论构建重组融合表达载体,在大肠杆菌中成功表达并纯化pTAT-XIAP融合蛋白。     

融合蛋白pTAT-XIAP的原核表达及穿透血脑屏障功能的鉴定

目的 构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得pTAT-XIAP融合蛋白,并研究该融合蛋白穿透血脑屏障的功能.方法 在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,转入大肠杆菌表达菌株BL21plysS进行诱导表达.pTAT-XIAP融合蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western印迹鉴定融合蛋白.pTAT-XIAP融合蛋白腹腔注射SD大鼠体内,免疫荧光法检测在脑组织的分布.结果 表达产物经SDS-PAGE及Western印迹分析后,在64kD处有一明显表达条带,与理论结果相符.免疫荧光法检测,pTAT-XIAP融合蛋白在大脑皮质、基底节等广泛分布.结论 重组融合蛋白pTAT-XIAP成功表达并可穿透血脑屏障,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.     

TAT-XIAP融合蛋白对Aβ(25～35)诱导的阿尔茨海默病大鼠行为学的影响

目的 研究TAT-XIAP融合蛋白对阿尔茨海默病(AD)大鼠空间学习记忆能力的影响.方法 将SD大鼠随机分成三组,对照组海马区注射生理盐水,模型组海马区注射Aβ (25 ～35),给药组尾静脉注射TAT-MAP融合蛋白10 mg/kg.采用Morris水迷宫法检测AD大鼠的空间学习记忆能力.结果 与模型组比较,给药组AD大鼠的Morris水迷宫实验逃避潜伏期缩短(P＜0.05);游泳轨迹路线多在平台所在象限附近,呈趋向型.结论 TAT-XIAP融合蛋白能够改善AD大鼠空间学习记忆能力.