膜蛋白LRRC8A在小鼠心肌细胞的表达及电生理特性

目的探讨容积敏感性氯通道蛋白主要成分LRRC8A在小鼠心肌细胞的表达及电生理特性。方法采用原代培养的小鼠乳鼠心肌细胞,上海吉玛公司合成4个不同LRRC8A的小干扰RNA(siRNA),片段依次为A组、B组、C组和D组,另将1个不包含siRNA的片段作为NC组。将含LRRC8AsiRNA片段的腺病毒感染心肌细胞,用等渗、低渗、低渗加DCPIB、低渗加siRNA外液灌流。RT-PCR法和Western Blot法检测各组LRRC8A在心肌细胞的表达;应用膜片钳检测各种状态下LRRC8A电生理特性(I_(Cl,vol))的变化。结果心肌细胞能正常表达LRRC8A,腺病毒成功感染细胞后,与NC组比较,A、B、C和D组LRRC8A mRNA及蛋白表达量均降低(P0.05)。与等渗外液比较,低渗外液I_(Cl,vol)明显升高,与低渗外液比较,低渗加DCPIB外液的I_(Cl,vol)降低,抑制率达到(96.48±2.63)%(P0.01),与低渗外液比较,低渗加siRNA外液的电流密度值下降达(83.04±8.41)%(P0.01)。结论 LRRC8A是小鼠心肌细胞膜重要的组成成分,是容积敏感性氯通道的重要构成蛋白。     

4,4’-二异硫氰基茋-2,2’-二磺酸对高糖诱导心肌细胞损伤的保护作用

目的：探讨高糖诱导心肌细胞损伤过程中氯离子浓度的变化以及氯离子通道阻断剂4,4’-二异硫氰基茋-2,2’-二磺酸（DIDS）对受损心肌细胞的作用。方法原代培养乳鼠心肌细胞,应用葡萄糖浓度为33mmol/L DMEM培养基,作用72h,构建心肌细胞损伤模型。实验分为对照组、高糖组、高糖＋DIDS组和DIDS组。用MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,氯离子荧光探针（MQAE）检测细胞内氯离子浓度。结果高糖作用下的心肌细胞存活率呈浓度及时间依赖性降低（P＜0.05）,流式细胞仪检测显示受损心肌细胞以凋亡性损伤为主。MQAE检测结果显示,与对照组比较,高糖组细胞内氯离子浓度显著下降（P＜0.05）。心肌细胞存活率及细胞内氯离子浓度,DIDS组与对照组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。与高糖组比较,高糖＋DIDS组心肌细胞存活率显著升高,细胞内氯离子浓度下降明显减少,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论氯离子通道参与了高糖诱导的心肌细胞损伤过程,DIDS可在一定程度上减轻以凋亡为主的心肌细胞损伤。     

黄芩苷对衣霉素诱导的内质网应激性心肌细胞损伤的影响

目的:观察黄芩苷(BC)对衣霉素(Tm)诱导的心肌细胞内质网应激(ERS)损伤的作用。方法:原代新生SD大鼠心肌细胞培养,随机分为对照组、BC组、Tm组、Tm+BC组。用MTT比色法检测心肌细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测心肌细胞损伤,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,Western blot检测CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的水平。结果:①Tm能够损伤心肌细胞并呈现明显的时间依赖关系,各作用时间点心肌细胞的存活率差异显著(P0.05)。Tm可显著增加ERS的CHOP表达及细胞凋亡的水平。②相对与Tm组,50μmol/L的BC能够显著抑制Tm对心肌细胞的损伤,使心肌细胞存活率增加(P0.05)。同时,BC能够显著抑制Tm诱导的心肌ERS损伤,使CHOP表达及细胞凋亡的水平明显下调(P0.05)。结论:BC可通过抑制Tm诱导的心肌ERS及心肌细胞的凋亡,达到保护受损心肌细胞的作用。     

4,4′-二异硫氰基芪-2,2′-二磺酸对内质网应激诱导心肌细胞损伤的影响

目的探讨氯离子通道阻滞剂4,4′二异硫氰基芪2,2′-二磺酸(DIDS)对衣霉素诱导心肌细胞损伤以及内质网应激标记性分子糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白样同源蛋白(CHOP)的影响。方法取乳鼠心肌细胞培养后,应用衣霉素构建心肌细胞内质网应激模型,随机分为对照组、衣霉素组、衣霉素+DIDS组、DIDS组。应用100ng/ml衣霉素处理24、48、72、96 h;另用DIDS 25、50、75和100μmol/L处理72 h,噻唑蓝法检测心肌细胞存活率,Western blot法检测GRP 78和CHOP蛋白表达水平。结果与对照组比较,衣霉素组48、72和96 h心肌细胞存活率明显降低(P<0.05);与衣霉素组比较,DIDS 50、75和100μmol/L处理明显增加心肌细胞存活率(P<0.05)。与对照组比较,衣霉素组GRP78和CHOP蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与衣霉素组比较,衣霉素+DIDS组GRP78和CHOP表达水平明显下调(P<0.05)。结论 DIDS可以抑制衣霉素诱导的大鼠心肌细胞损伤,其机制可能与拮抗GRP78和CHOP的表达,减轻内质网应激有关。     

老年高血压患者心血管危险因素分层与认知功能障碍的相关性

<正>中华老年心脑血管病杂志,2014,16(4):1038-1040.该文探讨老年高血压患者心血管危险因素分层与认知功能障碍的关系。方法:通过随机整群抽样的方法,选择西安地区老年高血压患者329例,根据心血管危险因素分层分为低危组62例,中危组77例,高危组108例,极高危组82例,又按简易智能状态检查量表     

衣霉素激活的心肌细胞氯通道及其电生理学特性

目的探讨内质网应激（ERS）的激活剂衣霉素（Tm）能否激活心肌细胞的氯通道,并观察其电生理学特性。方法原代培养新生SD大鼠心肌细胞,用等渗外液灌流作为对照,然后改变灌流液为低渗或者含有衣霉素的等渗外液,同时通过膜片钳全细胞模式记录电流。结果 （1）在等渗外液下,仅记录到低幅度的基础电流。与等渗外液相比,低渗外液灌流细胞时电流的密度在＋40、＋60、＋80及＋100mv时明显增加（P〈0.05）,并且电生理学特性类似于容积敏感氯通道（VSOR）的电流,包括：外向整流、正电压依赖性失活,以及对氯离子通道阻断剂4,4’-异二硫氮氏-2,2’-二磺酸（DIDS）敏感。（2）与等渗外液对比,含有衣霉素（2.5μg/ml）的等渗外液灌流同样可以记录到电流密度的显著增加,电生理学特性类似于低渗外液诱导的VSOR氯通道电流。结论衣霉素可以诱发乳鼠心肌细胞的氯通道电流,并且符合VSOR的电生理学特性。     

颅磁刺激治疗脑梗死后患者抑郁疗效及对5-HT和BDNF的影响

目的 探讨颅磁刺激治疗脑梗死后抑郁疗效及对5-羟色胺(5-HT)和血清脑源性神经营养因子(BDNF)的影响.方法 选取于2019年2月至2020年8月我院治疗脑梗死病人120例为观察对象,随机将其分为两组,对照组60例,接受常规药物治疗;研究组60例,在使用常规药物治疗的基础上联合颅磁刺激治疗.比较两组病人BI和HAMD评分、治疗有效率和NE、5-HT、BDNF水平,以及MoCA和MMSE分值.结果 治疗后,两组病人BI评分高于治疗前,HAMD评分低于治疗前,研究组BI和HAMD评分均显著优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组病人的治疗有效率(78.33％)较研究组治疗有效率(91.67％)低,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗前,两组病人NE、5-HT、BDNF水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05),治疗后两组NE、5-HT、BDNF水平均较治疗前升高,研究组各项水平均优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗前,两组病人MoCA和MMSE分值比较,差异无统计学意义(P＞0.05),治疗后,研究组MoCA和MMSE分值均比对照组高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 颅磁刺激治疗脑梗死后抑郁症病人,对治疗有效率的提高具有显著影响,对认知能力的提升同样具有明显的作用,改善病人的不良情绪.值得推广和应用.