miR-374促进急性心肌梗死诱导心肌纤维化的机制

目的研究微小RNA(miR)-374通过调控白细胞介素(IL)-10对急性心肌梗死(AMI)诱导心肌纤维化的影响。方法采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测AMI患者和健康对照组血清中miR-374的表达水平。构建AMI小鼠模型,随机分为假手术组(n=6)、AMI组(n=12)、AMI+miR-374组(n=12,AMI小鼠心肌注射miR-374)。采用qRT-PCR检测假手术组和AMI组心肌组织中miR-374的表达水平及各组Ⅰ型胶原(COL1)A1和Ⅲ型胶原(COL3)A1 mRNA表达水平。检测各组心脏功能,记录左室射血分数(LVEF)、左室长轴缩短分数(FS)、左室舒张末期内径(LVDd)和左室收缩末期内径(LVDs)。比色法检测各组半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3和Caspase8活性。Massontrichrome染色检测各组心肌纤维化程度。miR靶基因数据库预测IL-10为miR-374的潜在靶基因并采用荧光素酶报告基因法验证。采用qRT-PCR检测转染miR-374 mimics对IL-10 mRNA表达的影响。采用Western印迹检测AMI组和AMI+miR-374组心肌组织中IL-10、P65和P50蛋白表达。结果AMI患者血清中miR-374的表达水平明显高于健康对照组(P<0.001)。AMI组心肌组织中miR-374表达水平明显高于假手术组(P<0.001)。相比AMI组,AMI+miR-374组LVEF和FS明显降低、LVDd和LVDs明显升高、Caspase3和Caspase8活性明显升高、COL1A1和COL3A1 mRNA表达水平明显升高、心肌纤维化程度增加(P<0.05、P<0.01、P<0.001)。miR-374可靶向调控IL-10并抑制其mRNA表达。相比AMI组,AMI+miR-374组心肌组织中IL-10蛋白表达明显降低,而P65和P50蛋白磷酸化明显增加(P<0.05)。结论miR-374可能通过抑制IL-10的表达显著促进心肌梗死诱导心肌纤维化的发展。     

半相合基因DCs-CTL对小鼠黑色素瘤的抑制作用及GVHD反应

目的:探讨半相合基因来源肿瘤特异性树突状细胞活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞(the special cytotoxic T lymphocytes activated by dendritic cells,DCs-CTLs)体外静脉注射荷瘤鼠后观察其抑瘤效果及其移植物抗宿主反应(graft-versus-host disease,GVHD)的程度.方法:将B16黑色素瘤体外种植于健康C57BL/6小鼠成功后,全部在第10天给予60CO 7 Gy全身照射.将荷瘤小鼠随机分为阴性对照、自体治疗及半相合治疗组,分别于第10、17天给予小鼠自体红细胞、自体来源DCs-CTLs效应细胞、半相合鼠来源DCs-CTLs细胞经尾静脉注射治疗后,行GVHD评分;治疗后处死小鼠,取脾脏、肾和皮肤行病理检查,观察有无移植物抗宿主反应表现,并绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率.结果:(1)3组GVHD反应评分结果:阴性对照组与自体治疗组、半相合治疗组相比差异均有统计学意义(P0.05);自体治疗组与半相合治疗组之间比较无统计学意义,分别取3组小鼠的脾脏、皮肤和肾脏行病理检查,各组均未见明显移植物抗宿主反应的病理变化;(2)肿瘤生长曲线显示,自体治疗组和半相合治疗组均能明显抑制肿瘤生长,而阴性对照组对肿瘤的生长无明显抑制作用.自体治疗组和半相合基因治疗组瘤质量均低于阴性对照组,差异有统计学意义(P0.05);自体治疗组和半相合基因治疗组之间瘤质量对比差异无统计学意义(P0.05);自体治疗组和半相合治疗组抑瘤率对比差异无统计学意义(P0.05).结论:自体治疗组及半相合基因治疗组均有明显抑瘤作用,治疗后观察半相合基因治疗组未见明显移植物抗宿主反应.     

胰岛素样生长因子在胃癌中的表达与意义

目的 探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growth factor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)在胃癌中的表达及与胃癌浸润转移等生物学行为的关系.方法 对胃癌患者40例的癌组织、距原发灶5cm以上切缘组织和正常胃组织标本10例进行IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ免疫组织化学染色.结果 ①胃癌组织中IGF-Ⅰ的表达率显著高于切缘组织和对照组(P＜0.05);切缘组织和对照组中表达率差异无统计学意义(P＞0.05);病理分期中Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较差异有统计学意义(P＜0.05);无淋巴结转移组与淋巴结转移组相比差异有统计学意义(P＜0.05);未侵及全层组与侵及全层组相比差异有统计学意义(P＜0.05).②胃癌组织中IGF-Ⅱ的表达率显著高于切缘组织和对照组(P＜0.05).切缘组织和对照组中表达率差异无统计学意义(P＞0.05).病理分期中Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较差异有统计学意义(P＜0.05);无淋巴结转移组与淋巴结转移组相比差异有统计学意义(P＜0.05);未侵及全层组与侵及全层组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的高表达与胃癌的发生有关,且均参与了胃癌的侵袭和转移.     

IGF—Ⅰ，IGF—IR在胃癌中的表达及其与临床病理的关系

目的研究胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF—Ⅰ）、胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF—IR）在胃癌中的表达及其与临床病理的关系：方法对40例胃癌患者的癌组织、距原发灶5cm以上胃组织和10例正常胃组织标本进行IGF—Ⅰ,IGF—IR免疫组织化学染色将结果与患者的临床病理指标进行综合分析。结果①胃癌组织中IGF—Ⅰ的表达率显著高于切缘组织和对照组（P〈0．05）。切缘组织和对照组中表达率差异无显著性（P〉0．05）。PTNM分期中Ⅰ,Ⅱ期及Ⅲ,Ⅳ期两组比较差异有显著性（P〈0．05）;无淋巴结转移组及有淋巴结转移组相比差异有显著性（P〈0．05）;未侵及全层组及侵及全层组相比差异有显著性（P〈0．05）。②胃癌组织IGF—IR的表达率显著高于切缘组织和对照组（P〈0．05）。切缘组织和对照组中IGF—IR的表达率差异无显著性（P〉0．05）。PTNM分期中Ⅰ,Ⅱ期及Ⅲ,Ⅳ期两组相比差异有显著性（P〈0．05）。无淋巴结转移组及有淋巴结转移组相比差异有显著性（P〈0．05）。结论IGF—Ⅰ,IGF—IR的高表达与胃癌的发生有关,且均参与了胃癌的侵袭和转移。     

螺内酯对急性心肌梗死心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2mRNA及BaxmRNA表达影响

目的 研究醛固酮受体拮抗剂螺内酯对心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2mRNA及BaxmRNA表达的作用.方法 结扎左冠状动脉前降支制造大鼠左心室大面积心肌梗死模型.术后存活大鼠共72只,随机分为心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)对照组(AMI组)、螺内酯(spironolactone,Spi)治疗组(Spi组)及假手术组(Sham组),每组24只.分别于术后48h,7、14、21d用PCR方法测定非梗死区心肌细胞Bcl-2mRNA和BaxmRNA的表达.结果 与Sham组相比较,AMI组和Spi组大鼠非梗死区心肌细胞Bcl-2表达在48h,7、14、21d显著降低(P＜0.01),BaxmRNA 表达均显著升高(P＜0.01);与AMI组比较,Spi组大鼠非梗死区心肌细胞Bcl-2和BaxmRNA基因表达在48h、7d差异无统计学意义(P＞0.05),14、21d时心肌细胞BCL-2基因表达均升高(P＜0 05和P＜0 01),BaxmRNA基因表达均显著降低(P＜0.05和P＜0.01).结论 螺内酯可增加急性心肌梗死后大鼠非梗死区心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2mRNA的表达和减弱BaxmRNA的表达.     

胃癌中IGF-Ⅰ、Ⅱ及IGF-ⅠR的表达与临床病理关系的研究

目的探讨在胃癌中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR及IGF-Ⅱ的表达以及与临床病理的关系。方法取原发胃癌组织、距胃癌组织5cm以上癌旁组织的标本共计40例和胃溃疡切除后经病理证实为正常胃组织的标本共计10例,采用免疫组织化学SP法检测3组IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、IGF-Ⅱ的表达,将结果与患者的临床病理指标进行综合分析。结果癌旁组织和正常胃组织中IGF-Ⅰ的表达率明显低于胃癌组织(P<0.05)。PTNM分期中Ⅰ～Ⅱ期低于Ⅲ～Ⅳ期(P<0.05);淋巴结阴性组低于淋巴结阳性组(P<0.05);未侵及全层组低于侵及全层组(P<0.05)。癌旁组织和正常胃组织中IGF-ⅠR的表达率明显低于胃癌组织(P<0.05)。PTNM分期中Ⅰ～Ⅱ期低于Ⅲ～Ⅳ期(P<0.05);淋巴结阴性组低于有淋巴结阳性组(P<0.05);未侵及全层组及侵低于全层组(P<0.05)。癌旁组织和正常胃组织中IGF-Ⅱ的表达率明显低于胃癌组织(P<0.05)。PTNM分期中Ⅰ～Ⅱ期低于Ⅲ～Ⅳ期(P<0.05);淋巴结阴性组低于有淋巴结阳性组(P<0.05);未侵及全层组低于侵及全层组(P<0.05)。结论 IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、IGF-Ⅱ的显著表达与胃癌的发生发展有关,且在胃癌的侵袭和转移中起重要作用。     

同型半胱氨酸水平在急性心肌梗死患者伴充血性心力衰竭中的临床价值

目的探讨急性心肌梗死患者血清同型半胱氨酸水平变化情况,分析其与心力衰竭发生的关系。方法选取2012年10月~2013年10月期间在石家庄市第一医院CCU病房住院的急性心肌梗死患者100例,其中男性84例,女性16例,年龄49~84(63.6±3.4)岁。将患者分为两组:高同型半胱氨酸组(Hcy10.8μmol/L,H组,n=49);对照组(Hcy10.8μmol/L,C组,n=51)。检测患者入院时Hcy、脑钠肽(BNP)、左室射血分数(LVEF)水平,以及肌酸激酶(CK)、肌钙蛋白T(Tn T)峰值等。记录入院后心力衰竭发生情况。结果 H组的HCY水平明显高于C组[(17.4±1.4)μmol/L vs.(8.2±0.3)μmol/L],差异有统计学意义(P0.01)。采用Kaplan-Meier曲线对两组患者的心力衰竭发病率进行比较,H组的发病率明显高于C组(43.7%vs.12.5%,P0.001)。入院时心功能分级为KillipⅠ级(没有心力衰竭的相关症状)的患者81例,H1组38例,C1组43例。结果显示,H1组患者的血清同型半胱氨酸水平显著高于C1组[(17.4±1.6)μmol/L vs.(8.2±0.3)μmol/L],充血性心力衰竭发病率也显著高于C1组(28.9%vs.7.0%),差异有统计学意义(P均0.05)。多因素Cox回归分析表明高于10.8μmol/L的血清HCY(HR=7.175,95%CI:1.152~44.707)是发生心力衰竭的独立预测因子。结论部分急性心肌梗死患者血清半胱氨酸水平升高,而较高的血清同型半胱氨酸水平是发生心力衰竭的危险因素。     

短发夹RNA对胰腺癌细胞PANC-1突变型K-ras基因表达的影响

目的:研究短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对人胰腺癌细胞PANC-1中突变型K-ras基因表达的抑制作用.方法:构建特异性针对胰腺癌PANC-1细胞突变型K-ras基因的重组质粒pGensil-1-P1,阴性对照质粒pGensil-1-HK并采用脂质体介导的方法转染胰腺癌细胞.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测K-ras基因mRNA和蛋白的表达,CCK-8方法测量细胞生长曲线.并建立人胰腺癌细胞PANC-1裸鼠皮下移植瘤模型,分别注射Pgenesil-1-P1、Pgenesil-1-HK质粒,动态观察并处死裸鼠计算肿瘤体积.结果:测序证实质粒表达载体构建成功,短发夹RNA(shRNA)使胰腺癌细胞PANC-1突变型K-ras基因的mRNA较未治疗组、阴性对照组相比明显减少(P=0.01);未治疗组、阴性对照组及治疗组的K-ras蛋白表达率分别为100%,99.0%±0.73%,39.9%±2.1%,前两组K-ras蛋白表达差异无统计学意义,治疗组较未治疗组K-ras蛋白表达下调了约60.1%;细胞生长受到明显抑制(P=0.02);经重组质粒治疗14 d后,裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,相较于对照组瘤体明显缩小(P=0.03).结论:shRNA对特异性转染组的胰腺癌细胞的突变K-ras基因表达有抑制作用,使细胞以及裸鼠移植瘤的生长受到抑制.     

探讨调整基础代谢率对脑血管病患者治疗转归的影响

目的：探讨调整基础代谢率对脑血管病患者治疗转归的影响。方法100例脑血管病患者,将患者随机分为观察组和对照组,各50例,对对照组患者进行常规药物治疗,观察组的患者在此基础上采用调整基础代谢率,观察两组患者于入院后2 d内与第15天按简化Fugl-Meyer评分法和日常生活评价的Barthel记数记分法进行肢体功能缺损评定,以及患者满意度等方面的情况。结果观察组患者的肢体功能较对照组更好,差异具有统计学意义（P〈0.05）,两组对于护理的满意度差异有统计学意义（P〈0.05）。结论调整基础代谢率治疗脑血管病的效果较好,缩短病程,提高患者生活质量,具有推广价值。