胶质母细胞瘤MGMT基因启动子甲基化与蛋白表达

Objective To study the correlation of MGMT gene promoter methylation and protein expression and their regional variation in different specimens obtained from different regions within the tumor in patients with newly diagnosed glioblastoma. Methods Two to four samples in the same tumor were collected from different regions in 30 patients with newly diagnosed glioblastoma patients. In five patients among them,mutispecimens were obtained under assistance of neuronavigation system during the operation. In all samples,MGMT promoter profile were analyzed by Methylation - specific polymerase - Chain - reaction analysis, MSP ,while MGMT protein expression was detected in tissue sections by immunohistochemistry,IHC. Results MGMT promoter methylation was detected in 43. 56% (44/101) specimens. MGMT protein expression in tissue sections was assessed and scored:(1 :no or positive tumor cells < 10%, 2: ≥ 10% ≤50% ,3: > 50%) ,The rate of MGMT staining with a score 1,2,3 in all of tumor sections was 32. 67% ,43.56% ,23. 76% respectively. No significant correlation between MGMT protein expression and promoter methylation(x2 =2. 905, P =0.088) was found. The regional heterogeneity of MGMT protein expression within the same tumor was in 57% (17/30) patients ;and the regional heterogeneity of gene promoter methylation was in37%(11/30)patients. Conclusions MGMT promoter methylation is probably not the only modulating element in MGMT protein expression. The heterogeneity of MGMT protein expression and its promoter methylation in the same tumor questions their guiding significance in making therapeutic scheme for individual patients with malignant glioma in clinical practice.     

血清PDGF预测脑出血微创穿刺治疗短期预后评估

目的探讨血清血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)与脑出血微创穿刺治疗短期预后之间的关系。方法回顾性分析2016年1月至2019年6月在我院接受微创穿刺治疗的118例急性脑出血患者研究资料,并以108例健康体检者作为对照。比较两组研究对象的血清PDGF表达水平。同时收集患者年龄、性别、脑出血量、脑室积血量、发病距手术时长、二次手术、入院时格拉斯哥昏迷评分(GCS)、中线移位等临床信息,并采用改良Rankin量表(mRS)评分对患者术后3个月预后情况进行评估。同时对影响患者术后3个月预后影响因素进行单因素分析和Logistic回归分析,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)研究患者术前PDGF表达水平对患者短期预后的预测价值。结果研究组患者血清PDGF表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.001)。根据3个月mRS评分分为预后良好组75例和预后不良组43例,单因素分析结果表明,术前收缩压、术前血糖、发病至手术时长、术前GCS评分、出血部位、出血量、是否发生中位移位和脑部积血、是否二次手术、血清PDGF水平均对术后短期预后具有显著影响(P值0.05或P0.001);Logistic回归分析结果显示年龄(OR=4.297,95%CI 2.139～8.634)、出血量(OR=10.612,95%CI 3.647～30.833)、术前GCS评分(OR=10.676,95%CI 2.975～38.318)、发病至手术时长(OR=6.417,95%CI 2.515～16.377)、二次手术(OR=8.891,95%CI 3.637～21.731)、血清PDGF(OR=25.946,95%CI 6.452～104.334)是影响患者术后预后的独立影响因素;PDGF截断值为521.23ng/L,0.701(95%CI:0.558～0.844),灵敏度为62.79%,特异度为61.33%。结论脑出血患者血清PDGF表达水平显著高于健康人群,且其表达水平对脑出血患者行微创穿刺治疗后短期预后具有较高的预测价值。     

重型脑外伤后早期颅骨成形改善神经功能及预后

目的 分析重型颅脑外伤去骨瓣减压术后早期颅骨成形术对患者短期、长期神经功能康复及预后的影响.方法 回顾性分析因重型颅脑外伤而进行去骨瓣减压术遗留大面积颅骨缺损的患者27例,在去骨瓣减压后早期进行颅骨成形术(5～8 w),另随机选取常规时间进行颅骨成型术病例27例(术后3～6个月),均采用计算机三维塑性钛网为修补材料.早期结果于术后12 d、1个月进行评估,包括Barthel指数、Fugl-meyer评分、神经功能缺损评分,并评估并发症的发生.术后18个月采用生活质量主观评分及GOS评分评估长期预后.结果 颅骨成形术后12 d各项指标差异无统计学意义,1个月后早期组评价指标优于常规组(P<0.05),尤以Barthel评分显著(P=0.009).早期组患者颅骨成形后1个月、18个月的生活质量评分亦优于常规组,颅骨缺损综合征及硬膜下积液等并发症减少,组间差异有统计学意义,其余并发症无差别;早期组长期预后评分高于常规组,各项并发症术后18个月无明显变化.结论 选择合适的患者和修补材料,大面积去骨瓣减压术后早期进行颅骨成形术是安全的,可减少术后并发症的发生,有助于患者神经功能的恢复,改善远期预后.     

抗血栓药物致脑出血的立体定向血肿抽吸治疗

目的 探讨立体定向血肿抽吸术联合药物治疗在抗血栓药物致脑出血患者治疗中的应用及疗效,以为临床提供更为合理的治疗方案.方法 24例抗血栓药物致脑出血患者,12例经立体定向血肿抽吸术联合药物治疗(联合治疗组),其余12例单纯予以药物治疗(对照组);分别采用Barthel指数评分和GOS预后分级对生存者日常生活活动能力和预后进行评价.结果 联合治疗组患者颅内血肿明显缩小,其中治疗后3 d血肿基本清除者5例,治疗后5 d血肿清除者6例,治疗后7 d血肿清除者1例;而对照组治疗后3d无一例血肿缩小,头部CT检查显示血肿周围呈低密度改变.发病后6个月,联合治疗组和对照组患者Barthel指数评分分别为(60.42±39.40)分和(29.58±32.01)分,两组日常生活活动能力比较差异具有统计学意义(t=2.104,P=0.047);联合治疗组患者GOS预后分级达满意者7例(7/12),对照组2例(2/12),两组比较差异具有统计学意义(P=0.045);联合治疗组死亡2例(2/12),而对照组死亡4例(4/12).结论 在病情严重程度相似的情况下,立体定向血肿抽吸术联合药物治疗的临床效果优于单纯药物治疗.     

人外周血内皮祖细胞转染自杀基因杀伤恶性胶质瘤细胞的体外研究

目的观察5-氟胞嘧啶诱导基因修饰型内皮祖细胞群发生自身死亡及其旁效应对共培养人脑胶质瘤细胞系U251的杀伤作用。方法采用密度梯度离心法分离经体外诱导培养的人外周血内皮祖细胞,经转染获得基因修饰型内皮祖细胞。RT-PCR法鉴定胞嘧啶脱氨酶(CD)基因在基因修饰型内皮祖细胞中的表达变化,观察野生型和基因修饰型内皮祖细胞在不同浓度5-氟胞嘧啶作用下的细胞存活率,以及基因修饰型内皮祖细胞所诱导的旁效应。结果真核细胞表达载体pCEA-CD-CAUP转染成功,CD基因在基因修饰型内皮祖细胞中表达阳性;在不同浓度5-氟胞嘧啶(0.01～1000.00μg/ml)作用下,基因修饰型内皮祖细胞存活率低于野生型内皮祖细胞,组间差异有统计学意义(均P<0.05)。不同比例的基因修饰型内皮祖细胞与人脑胶质瘤细胞系U251共培养72h后,其细胞生长抑制率均高于基因修饰型内皮祖细胞所占的比例,当基因修饰型内皮祖细胞比例占细胞总数的50%时,细胞生长抑制率即已>80%。结论人外周血内皮祖细胞转染CD基因后,在5-氟胞嘧啶的作用下可发生自身死亡并触发旁效应而杀伤共培养的人脑胶质瘤细胞系U251细胞,为抗血管生成药物与自杀基因联合应用治疗恶性胶质瘤的体内实验及后续研究提供了依据。     

法舒地尔联合纳洛酮治疗外伤性脑梗死的疗效观察

目的探讨法舒地尔联合纳洛酮治疗外伤性脑梗死的临床疗效。方法选择2013年1月—2018年1月山东省立第三医院收治的外伤性脑梗死患者110例,随机分为对照组和治疗组,每组各55例。对照组静脉滴注盐酸纳洛酮注射液,0.8mg加入250 mL生理盐水,1次/d。治疗组在对照组基础上静脉滴注盐酸法舒地尔注射液,30 mg加入250 mL生理盐水,1次/d。两组患者连续治疗14 d。观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者神经功能和运动功能FM评分。结果治疗后,对照组和治疗组临床有效率分别为76.36%和92.73%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者Barthel指数和欧洲版神经功能缺损评分(ESS)评分均显著升高(P0.05),美国国立卫生研究卒中量表(NIHSS)显著降低(P0.05),且治疗组神经功能评分明显优于对照组(P0.05)。治疗后,两组患者上肢和下肢及总评分均显著升高(P0.05),且治疗组患者治疗后运动功能FM评分明显高于对照组(P0.05)。结论法舒地尔联合纳洛酮治疗外伤性脑梗死能够显著提高临床疗效,具有一定的临床推广应用价值。     

替莫唑胺改变人胶质瘤细胞系U251耐药机制的体外研究

目的 建立替莫唑胺耐药人胶质瘤细胞系,探讨其耐药性变化规律及耐药机制,以期为临床优化药物化疗方案提供理论依据.方法 采用分步诱导法使人胶质瘤细胞系U251对替莫唑胺耐药,磺酰罗丹明B比色法检测细胞耐药指数和存活率;Western blotting法检测O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达水平,以及倍增替莫唑胺终浓度后MGMT表达水平.结果 成功建立替莫唑胺耐药U251/TR细胞,在替莫唑胺初始诱导剂量0.25μg/ml、终浓度16.00μg/ml培养液中,U251/TR细胞半数抑制浓度为(220.87±2.34)μmol/L,约为U251细胞[(33.12±1.52)μmol/L]的7倍(t=-116.542,P=0.000),其耐药指数约为7;U251/TR细胞MGMT表达水平为(1.47±0.30),较U251细胞(0.19±0.03)明显升高(t=-20.230,P=0.000).与溶媒对照组比较,经倍增替莫唑胺终浓度诱导的U251/TR细胞仍呈现增殖抑制现象,以体外培养第3天时最为明显(P=0.000);MGMT表达水平相应降低(均P=0.000),呈现自身克服耐药现象.结论 采用分步诱导法可于体外成功建立替莫唑胺耐药人胶质瘤细胞系.MGMT表达水平升高是导致U251/TR细胞对替莫唑胺耐药的主要机制,替莫唑胺可以通过自身消耗MGMT而改变U251/TR细胞的耐药特性,发挥抗耐药作用.     

凝血酶血肿腔冲洗预防高风险慢性硬膜下血肿患者颅骨钻孔引流术后复发效果观察

目的：观察凝血酶血肿腔冲洗预防高风险慢性硬膜下血肿患者颅骨钻孔引流术后复发的效果。方法31例高风险慢性硬膜下血肿患者,随机分为观察组17例和对照组14例。均行颅骨钻孔引流术治疗。术中对照组用生理盐水冲洗血肿腔,观察组用稀释后的凝血酶冲洗血肿腔。比较两组复发情况。结果手术均顺利完成。观察组1例（7．1％）、对照组6例（35．3％）复发,观察组复发率明显低于对照组P＜0．05。对照组既往服用抗血小板药物的8例患者中有3例复发,观察组服用同样药物的者的凝血酶8例患者中无复发。观察组未见与凝血酶血肿腔冲洗有关的并发症发生。结论凝血酶血肿腔冲洗可降低高风险慢性硬膜下血肿患者颅骨钻孔引流术后复发发生率。     

急性脑梗死患者血栓弹力图检测及其与血清血管 生成素-1、单核细胞趋化蛋白-1水平的关系

目的 探索血清血管生成素-1（Ang-1）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平与急性脑梗死 患者的血栓弹力图参数的相关性。方法 将2016 年1 月— 2018 年5 月于山东省立第三医院治疗的 60 例急性脑梗死患者定义为观察组，选择同时间段来医院体检的60 例健康成年人为对照组，对比两组 血清Ang-1、MCP-1、不同血栓弹力图（TEG）参数。比较观察组中不同病情严重程度患者TEG 参数、血清 Ang-1、MCP-1 水平并检验其相关性。结果 观察组α角、最大振幅（MA）、凝血综合指数（CI）、MCP-1 水 平高于对照组，反应时间（R 值）、K 值及Ang-1 水平低于对照组（P＜ 0.05）；观察组中不同病情严重程度 患者TEG参数、血清Ang-1、MCP-1水平的比较差异有统计学意义（P＜0.05），病情越重，α角、MA、CI及 MCP-1水平越高，R及K值、Ang-1 越低（P＜0.05）；血清MCP-1与α角、MA、CI呈正相关，与R及K值呈负 相关（P ＜ 0.05）；血清Ang-1 与α角、MA、CI呈负相关，与R及K值呈正相关（P ＜ 0.05）。结论 血栓弹 力图参数与血管保护指标Ang-1、炎性反应指标MCP-1 水平均具有较好的相关性，不仅有助于急性脑梗 死的诊断，还可用于反映患者的病情严重程度，有助于指导诊疗工作。