HIV口腔黏膜渗出液快速检测试剂的方法学评价北大核心CSCD

目的构建艾滋病病毒（HIV）口腔黏膜渗出液（OMT）快速检测试剂（RDTs）评价盘,评价HIV OMT RDTs的质量。方法采集健康志愿者的口腔黏膜渗出液,用稀释液稀释HIV抗体阳性和阴性的血浆样本,分别构建实验室基础盘、实验室干扰盘、实验室线性稀释系列盘和实验室精密度盘。用6家HIV OMT RDTs（编号：试剂AF）分别检测构建的评价盘和HIV抗体口腔黏膜渗出液快速试剂的国家参考品,肉眼判读检测结果并测定GOD值。结果根据肉眼判读,试剂AF的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%（39/41）,分析灵敏度≥3/5;试剂D的批内精密度高于其他试剂,试剂F的线性范围为28214。根据GOD值,试剂AE的特异性,阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%（39/41）,敏感性≥92.50%（37/40）,阳性参考品符合率≥95.00%（19/20）,分析灵敏度≥3/5,线性范围分别为28216、27217、26216、26215、25212,批内精密度介于4.91%34.28%之间。结论试剂AF的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、分析灵敏度、分析特异性较好,试剂BD的线性范围较宽,但饮食因素可能造成试剂D、E出现假反应性,试剂的批内精密度差别较大。     

尿液HIV-1抗体检测实验室能力验证质控品的制备及应用

目的研发制备尿液1型艾滋病病毒(HIV-1)抗体检测实验室能力验证质控品,并应用于艾滋病检测实验室的尿液HIV-1抗体检测能力的验证工作,提高艾滋病检测实验室对尿液HIV-1抗体的检测水平。方法对20份HIV-1抗体阳性和8份HIV-1抗体阴性的尿液样本,用酶联免疫吸附试验筛选后,选择3份阳性样本和2份阴性样本,制备能力验证质控品,并对能力验证质控品进行稳定性、均一性评价。将能力验证质控品分发给参加尿液HIV-1抗体检测的实验室,对其检测结果进行分析,评价各实验室的尿液HIV-1抗体检测能力。结果能力验证质控品均一性试验中,5份样本的变异系数(CV)分别为5.40%、27.96%、12.04%、20.24%、5.77%。能力验证质控品稳定性试验中,尿液质控品在37℃放置时,5份样本的CV值分别为5.62%、9.19%、7.98%、57.81%、7.43%;在20℃放置时,5份样本的CV值分别为18.57%、3.41%、5.21%、43.93%、5.58%;在4℃放置时,5份样本的CV值分别为7.67%、14.35%、9.61%、6.35%、9.43%;在-20℃放置时,5份样本的CV值分别为25.83%、17.29%、35.97%、20.73%、22.22%。共12家艾滋病检测实验室参加本次尿液HIV-1抗体检测能力验证,得分情况:11家实验室得分为100分,1家实验室对两份样本检测错误,得分为60分;检测数值(S/CO)偏离情况:4家实验室对阳性质控检测结果有偏离,3家实验室分别对3份阳性样本(164 101、164 103和164 105)检测结果有偏离。结论尿液HIV-1抗体能力验证质控品具有较好的稳定性、均一性,可以用于实验室能力验证。参加此次尿液HIV-1抗体能力验证的实验室结果判定大都正确,但是个别实验室在检测数值(S/CO)方面存在偏离。     

干血斑样本用于ELISA 法检测HIV抗体的稳定性研究

目的研究干血斑样本用于艾滋病病毒(HIV)抗体检测的稳定性。方法使用两个品牌HIV酶联免疫吸附试验(ELISA)法抗体检测试剂盒与HIV1/2重组免疫印迹(RIBA)法抗体检测试剂盒,对不同保存形式下干血斑(DBS)存放不同时间后的样本进行HIV抗体光密度(OD)值与条带测定,分析DBS在HIV抗体检测中的稳定性。结果同一份样本经ELISA法试剂A与试剂B检测所得结果存在差异。在室温下,中阳、弱阳、阴性样本放置2周后用试剂A检测均出现OD值增高现象,而用试剂B检测均未出现OD值变化;在37℃下,中阳、弱阳、阴性样本在放置1周后用试剂A检测即出现OD值显著增高现象,而用试剂B检测时,只有放置4周后的弱阳和阴性样本出现OD值升高现象;4℃下,试剂A与试剂B检测各样本OD值均比较稳定,只有在用试剂A检测中阳样本时发现6周后出现OD值升高现象; RIBA检测发现4℃下放置16周后样本稳定性良好,而室温和37℃下随放置时间延长会导致弱阳和中阳样本条带变弱,而阴性样本在37℃密封无干燥剂情况下放置1周后会出现p31、p24、p17等条带;冻存在-20℃的DBS洗脱后样本反复冻融1～6次后OD值无明显变化。结论用国产耗材试剂制备的DBS样本在4℃和-20℃下稳定性较好,不同试剂检测出的样本稳定性差异较大,DBS样本洗脱液可反复冻融使用至少6次。     

美国HIV自检试剂注册要点

正艾滋病病毒(HIV)自我检测作为医疗机构检测服务的有效补充途径,能够让个人在隐秘环境下主动了解自身的HIV感染状态,有助于扩大HIV检测服务,为个人提供早期诊断的机会。由于隐秘性好,避免检测结果被他人知晓受到歧视,而获得高危人群的欢迎。HIV自我检测的结果不仅会影响自检者本人,也将会影响HIV传播、预防和控制,因此HIV自我检测试剂的审批受到多部门的重视。美国食品药     

干血斑样本用于HIV抗体检测方法学优化与应用

目的探讨用于干血斑样本中艾滋病病毒(HIV)抗体检测的最佳洗脱条件。方法选取并制备中值(24)与低值(26)的干血斑样本,利用HIV抗体诊断试剂盒(酶联免疫吸附试验法),对不同洗脱温度、不同洗脱液组分、不同洗脱液体积、不同洗脱时间分别进行组合后,进行干血斑(DBS)样本洗脱液中抗体OD值测定分析,从而选出最适宜、最方便用于HIV抗体检测的DBS洗脱条件。结果室温与4℃条件下洗脱样本差异无统计学意义(P=0.979,P=0.704);不同洗脱液体积对样本洗脱的影响差异无统计学意义(P=0.183);洗脱液组分对低值(26)样本的洗脱效果有统计学意义(P=0.033),其中以含0.5‰Tween20的PBS对样本洗脱的影响更为显著(P=0.02,P=0.004);洗脱时间对中值(24)与低值(26)样本均有显著影响(P=0.00,P=0.00),其中4小时和6小时为显著差异分界点。670份临床已知样本的检测应用中,试剂盒现成Cutoff值计算判定阳性样本时,存在2.63%的假阳性,无假阴性。结论用于DBS中HIV抗体最佳洗脱条件为:用300μL含有0.5‰Tween20的PBS在室温下(24±2℃)洗脱4~6小时。试剂盒Cutoff值不适用于DBS样本结果判定,需进一步研究设定用于该方法的Cutoff值。     

HIV-1新发感染实验室检测能力的评估

目的评估各实验室利用限制性抗原亲和力酶联免疫试验(LAg-Avidity EIA)检测1型艾滋病病毒(HIV-1)新发感染的能力,提高我国HIV-1新发感染实验室检测的准确性。方法按照GB/T 27043-2012、CNASGL02:2014、CNAS-GL03:2015文件,选择8份临床样本,制备能力验证质控品并进行均一性和稳定性检验,分发给各实验室,组织实验室能力验证和进行结果分析。结果能力验证质控品均一性分析表明,各组质控品的CV值15%,单因素方差分析质控品无统计学差异;稳定性检验结果,各组质控品室温放置一周后,检测结果与均一性结果经t检验无差异。此次制备的能力验证样本均一性和稳定性良好,满足能力验证要求。参加能力验证的35家实验室,均按期回报结果,34家试剂盒内控有效,检测结果有效率97.14%;31家能够正确判定8支能力验证样品的感染状态,满意率88.57%,4家实验室误判1例样本;在正确判定能力验证样本的实验室中,有4家实验室各存在1例离群的ODn值。结论参加能力验证的多数实验室可以准确完成新发感染检测,但检测中仍存在一些问题,应加强对相关实验室的培训,提高各实验室HIV-1新发感染检测能力。     

LAg-avidity EIA HIV-1新发感染检测试剂性能评估

目的对国产限制性抗原亲和力法1型艾滋病病毒(HIV-1)新发感染酶联免疫检测试剂盒(LAg-avidity EIA HIV-1新发感染检测试剂)进行性能评估。方法抽取三批LAg-avidity EIA HIV-1新发感染检测试剂,分别由三个人检测同一批及一个人检测三批试剂,以评估该试剂批内与批间精密度;将其三批试剂2℃～8℃贮存组分于37℃放置7天,-20℃贮存组分于2℃～8℃放置7天后,评价试剂盒的热稳定性;利用81份HIV-1抗体阳性临床样本评估不同批次试剂与不同实验人员新近感染与既往感染样本检测结果的一致性。结果国产LAg-Avidity EIA HIV-1新发检测试剂批内弱阳质控(LPC)与强阳质控(HPC)光密度(OD)值批内变异系数(CV)分别为8.52%与9.06%,批间CV分别为9.25%与10.07%;加速热处理7天后,试剂批内LPC与HPC的CV分别为8.01%与5.66%,批间CV分别为6.24%与10.95%,同时三批新近感染与既往感染检测一致率分别为98.70%、100.00%与97.53%;三个不同实验人员新近感染与既往感染一致率分别为100.00%、97.53%与98.70%;三个不同批次试剂检测的新近感染与既往感染一致率分别为100.00%、98.70%与100.00%。结论国产LAg-Avidity EIA新发检测试剂批内与批间精密度、稳定性与一致性均较好,能够满足实验室HIV-1新发感染检测与应用。     

运用限制性抗原亲和力酶联免疫法估计云南省德宏州婚检与孕产妇人群HIV新近感染率

目的了解云南省德宏傣族景颇族自治州(简称德宏州)2009—2017年婚检与孕产妇人群艾滋病病毒(HIV)新发感染情况。方法婚检人群血浆样本210 486份和孕产妇血浆样本220 703份进行HIV检测,婚检和孕产妇人群HIV检测阳性分别为1 409例和1 475例。对德宏州2009—2017年血浆样本符合新发感染检测条件的388例婚检人群和336例孕产妇人群HIV阳性样本进行限制性抗原亲和力酶联免疫法检测以确定HIV新近感染,估计婚检人群和孕产妇HIV新近感染率。结果 2009—2017年婚检人群各年度HIV新近感染率分别为0.01%、0.04%、0.02%、0.05%、0.05%、0.08%、0.01%、0.03%和0.01%,总体相对稳定,差异无统计学意义(χ~2=13.805,P0.05)。2009—2017年各年度孕产妇人群HIV新近感染率分别为0.02%、0.11%、0.07%、0.04%、0.04%、0.08%、0.02%、0.04%和0.04%,总体相对稳定,差异有统计学意义(χ~2=15.608,P0.05)。结论德宏州2009—2017年婚检与孕产妇人群HIV新近感染率均保持较稳定的水平。     

二阶导数差示脉冲极谱法用于扑尔敏及其制剂的定量研究

本文研究建立了扑尔敏及其制剂的二阶导数差示脉冲极谱法。扑尔敏在水溶液中,于—0.400v(vs Ag/Agcl)处出现一良好的二阶导数差示脉冲极谱峰,在2.0～8.0×10~(-4)mol/L范围内,药物浓度与其导数差示脉冲极谱峰幅值呈非常显著的线性关系(P<0.01)。检测限为2.0×10~(-9)mol/L。操作简便、迅速、灵敏,结果准确。     

二阶导数差示脉冲极谱法用于扑尔敏及其制剂的定量研究

本文研究建立了扑尔敏及其制剂的二阶导数差示脉冲极谱法。扑尔敏在水溶液中，于－０．４００ｖ／（ｖｓ Ａｇ／Ａｇｃｌ）处出现一良好的二阶导数差示脉冲极谱峰，在２．０￣８．０×１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ范围内，药物浓度与其导数差示脉丫极谱峰幅值呈非常显著的线性关系（Ｐ〈０．０１）。检测限为２．０×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ。操作简便、迅速、灵敏、结果准确。