日本血吸虫尾蚴(中国大陆株)表达序列标签的获取及同源性分析

目的 了解日本血吸虫尾蚴ｃＤＮＡ文库中基因的基本情况,为新基因的筛选鉴定提供依据。方法 日本血吸虫尾 蜘ｃＤＡＮ文库中的噬菌体侵入大肠杆菌ＢＭ２５．８后环化成质粒。筛选出已转入质粒的菌株。提取质粒ＤＮＡ,用质粒上 的一段测序引物序列进行一次性测序,得到一个表达序列标签（ＥＳＴ）。通过ＢＬＡＳＴｘ及ＢＬＡＳＴｎ公共数据库经编辑分 析的ＥＳＴ序列进行同源性比较。经过分析编辑后的新ＥＳＴ序列,以编写好的程序和Ｅ－ｍａｉｌ方式递交,以获得ＧｅｎＢａｎｋ 登录号。通过对同源性比较结果的总结,对该文库的基本情况进行分析。结果与结论 在测出的５８个ＥＳＴ中有３个核 苷酸序列与日本血吸虫已知基因高度同源,有２个核苷酸序列与曼氏血吸虫较高度同源,有７个ＥＳＴ的蛋白质序列与 其他物种有较高同源性而核苷酸序列同源性很低,有２７个ＥＳＴ的蛋白质及核苷酸序列同源性都很低。     

婴儿肠源性紫绀29例临床分析

目的总结婴儿肠源性紫绀病因、特点及治疗。方法29例婴儿服叶菜类蔬菜煎汁30-150 ml/人,最快40 min,最慢4 h起病,全部病例均有皮肤黏膜、指（趾）甲紫绀,抽静脉血振荡后呈紫黑色（巧克力棕色）,确诊后洗胃,美蓝[1 mg/（kg·次）]快速静滴,辅以维生素C[100 mg/（kg·次）]静滴。结果2 h内皮肤黏膜逐渐转红润,6 h内全部症状消失,1-2 d后实验室检查异常者均恢复正常。结论小婴儿食叶菜类蔬菜煎汁可致肠源性紫绀,经洗胃,小剂量美蓝,大剂量维生素C治疗很快痊愈。     

非选择性内皮素受体拮抗剂对肥厚心肌局部血管紧张素系统的影响

目的：探讨内皮素受体拮抗剂对肥厚心肌局部血管紧张素系统的影响及可能作用机制。方法：24只大鼠随机分为对照组、心肌肥厚组和内皮素受体拮抗剂组。测定左室指数,采用免疫组化法测定心肌组织中血管紧张素受体-1（AT1R）,放射免疫法测定心肌组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量,分光光度法测心肌组织血管紧张素转化酶（ACE）活性,部分心肌组织进行HE、VG染色。结果：与对照组相比,心肌肥厚组左室指数、左室全心比、ACE活性、AngⅡ浓度及AT1R阳性表达率增加均有统计学意义（P〈0.05）。与心肌肥厚组相比,内皮素受体拮抗剂组左室指数、左室全心比、ACE活性、AngⅡ浓度及AT1R阳性表达灰度值降低均有统计学意义（P〈0.05）,但ACE活性、AT1R阳性表达灰度值仍高于对照组（P〈0.05）,而其他指标差异无统计学意义。结论：去甲肾上腺素诱导的心肌肥厚大鼠心肌组织局部血管紧张素系统活化,导致心肌细胞肥大,胶原增生。PD142893可以部分抑制这一作用,内皮素可能参与了血管紧张素系统活化过程。     

β-胡萝卜素对去甲肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用

目的:研究β-胡萝卜素(BC)对去甲肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用。方法:去甲肾上腺素(NE)2mg/kg腹腔注射,每日2次,去甲肾上腺处理的大鼠给予BC 250 mg/(kg.d)灌胃进行干预,连续给药15 d。测定全心重量指数(HW/BW)、左心室重量指数(LVW/BW,即LVI);采用放免分析法检测左心室心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,用免疫组织化学方法检测左心室心肌组织中血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的表达,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:NE模型组大鼠的HW/BW、LVI明显升高;左心室心肌组织AngⅡ含量、AT1R表达增高,心肌和血清中MDA含量增高,SOD含量降低。β-胡萝卜素能通过抗氧化作用而明显降低心肌组织AngⅡ、MDA含量和AT1R的表达,提高SOD含量,使HW/BW及LVI下降,抑制心肌肥厚。结论:β-胡萝卜素对去甲肾上腺素所致心肌肥厚有保护作用。     

我的导师之家——神栖

到日本的第3天,就和导师L一起去她在C县L郡神栖町的家里度周末。驾车从东京都到这里要3个小时,再往前不远的地方柏油马路还没铺好,两层小楼一幢幢错落有致地点缀在绿荫间,显得静谧和安祥。从家里出来几步远来到堤上,眼前就是一片开阔的水     

人肠道病毒分类和鉴别方法研究进展

在10多年消灭脊髓灰质炎(脊灰)的肠道病毒(EV)检测中,中国的脊灰实验室网络分离了大量的EV。由于受EV鉴别方法的限制,EV感染的公共卫生学意义一直未能受到应有的重视。随着分子生物学技术的发展,特别是基因测序自动化和生物信息学的进步,基于序列分析鉴定EV的方法发展迅速。该文对人EV最新分类和鉴别方法进行了综述。     

胃癌DNA甲基化差异片段的筛选与分析

目的筛选和分析胃癌和正常胃组织间DNA甲基化差异片段。方法通过甲基化敏感性代表性差异分析法(methylation-sensitive-representationaldifferenceanalysis,MS-RDA),筛选胃癌和正常胃组织间DNA甲基化差异片段,经克隆、测序后进行生物信息学分析。结果获得3个甲基化差异片段CRS1308、CRS1309、CRS1310序列。其中CRS1309和CRS1310已被GenBank收录,登陆号分别为AY887106和AY887107。CRS1309序列与LOC440683基因、LOC440887基因的3'端、DRD5基因均有很高的相似性;CRS1310序列与1999年MinoruToyota在人类结肠癌中分离出的核糖体RNA上的甲基化差异性CpG岛有很高的相似性。结论胃癌和正常胃组织间DNA甲基化存在差异,LOC440683、LOC440887、DRD5基因的异常甲基化可能与胃癌的发生相关,胃癌中CRS1310序列所在核糖体RNA上的CpG岛易发生甲基化。     

抑制性消减杂交分析肌动蛋白细胞骨架和细胞外基质基因在膀胱癌中的表达下调

目的：分析膀胱移行细胞癌的差异表达基因，探讨肿瘤行为的分子生物学基础及筛选有效的肿瘤标记。方法：应用抑制性消减杂交（SSH）方法构建在正常膀胱组织和膀胱癌组织中差异表达序列的消减文库，用差异筛选技术分离差异表达基因。结果：从消减文库中共获得了9个在正常膀胱组织中高表达、在膀胱癌组织中表达下调的基因，分别属于细胞外基质成分和肌动蛋白细胞骨架体系。结论：细胞外基质和肌动蛋白细胞骨架体系中相关基因的表达下调可能反映了肿瘤细胞在细胞粘附、细胞间相互作用、迁移及运动等诸多过程中的异常，可能与癌细胞的侵袭和转移密切相关，对发展成为膀胱癌的分子标记物具有潜在价值；gelsolin、tuopomyosin等抑癌基因在膀胱癌形成过程中可能起了重要作用。     

日本血吸虫一种新腺苷酸激酶全长cDNA的克隆与功能分析

目的：对用表达序列标签（Expression Sequence Tag,EST）策略从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的新基因进行功能预测。方法：用NCBI站点的BLASTx及BLASTn程序对所获得的新基因序列进行同源性搜索；用NCBI BLAST站点的blast two sequence程序对同源性高的基因进行核苷酸及氨基酸水平的同源性比较；利用Motif Scan in a Protein Sequence对cDNA序列所编码的蛋白质进行结构域搜索；利用CD－Search程序对目标蛋白进行保守区域搜索。结果：发现一个与曼氏血吸虫22kDa单核苷酸激酶mRNA高度同源的日本血吸虫新基因，基因与氨基酸水平的同一性均分别为86．0％和87．0％；蛋白结构域搜索及保守区域搜索结果显示，该cDNA序列所编码的蛋白质是一种腺苷酸激酶。结论：用EST策略筛选新基因是一个可行的方法，所筛到的日本血吸虫新基因编码一种腺苷酸激酶，全长编码序列与曼氏血吸虫腺苷酸激酶mRNA高度同源。     

中医古方治疗慢性肾炎述要

慢性肾炎是由多种原因引起、多种病理类型组成的原发于肾小球的免疫性疾病 ,临床以蛋白尿、血尿、水肿、高血压等为主要表现。近年来由于现代医学应用免疫荧光技术及电子显微镜 ,对慢性肾炎的免疫发病机理、病理形态及功能改变有了较深入的认识 ,但在药物治疗方面尚缺乏特效药物 ,而中医药治疗慢性肾炎疗效较好、报道很多。笔者分析这些报道多侧重于临床医师自行组方 ,不便于重复及推广 ,故对近十年应用中医古方治疗慢性肾炎进行了总结 ,以使配伍严密、历史悠久的古方重放异彩。1　补益培本根据第二次全国中医肾病专题学术会议 [1] 通过的“…