阿奇霉素对大鼠气道平滑肌细胞瘦素和白介素-8、肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)经哮喘致敏血清刺激后炎性细胞因子的表达变化并探讨阿奇霉素对哮喘的干预作用。方法:贴壁法体外培养大鼠ASMC。建立大鼠哮喘模型,采血收集致敏血清,以此血清刺激体外培养的ASMC,分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、阿奇霉素组(C组),采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组上清中瘦素(LP)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western-blot法检测各组LP蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应半定量(RT-PCR)法检测各组LPmRNA表达。结果:B组上清中LP、IL-8及TNF-α表达较A组增加(P<0.05),LP表达水平与炎性细胞因子的表达水平呈正相关(r=0.995,0.946,P<0.05);C组上清中LP的表达及ASMC中LP蛋白及mRNA的表达较B组明显下降(P<0.05)。结论:ASMC在致敏状态下LP的表达显著增强,参与哮喘发生过程;阿奇霉素可以部分抑制哮喘ASMC分泌炎性因子,提示阿奇霉素可能对哮喘起抗炎作用,为哮喘的防治提供新的观点。     

胸腔镜术前CT引导下改良的Seldinger人工气胸法的安全性及有效性

回顾性分析2019年6月至2020年12月日照市中医医院呼吸与危重症医学科32例患者资料,胸腔镜术前均行CT引导下改良的Seldinger人工气胸法（简称CTSAP）,统计分析人工气胸操作时间、成功率、并发症等评估其安全性及有效性。32例患者CTSAP操作时间（22.3±5.1）min,首次成功率96.9%。并发症：3...     

体位选择结合自体血胸腔注入治疗术后持续漏气伴肺复张不全前瞻性研究

前瞻性研究2020年10月至2022年3月因自发性气胸或巨型肺大疱就诊于日照市中医医院行内科胸腔镜介入治疗、术后经胸腔闭式引流3 d仍持续漏气且行胸部CT提示肺复张不全或术后持续漏气经体位选择结合凝血酶胸腔注入(简称"体位加1.0")干预失败, 应用体位选择联合自体血(100 ml)及凝血酶(5 000 U)胸腔注入(简称"体位加2.0")治疗的17例患者资料。"体位加2.0"干预的成功率为16/17, 复发率为3/17, 4例患者出现发热, 4例出现胸腔积液, 1例发生脓胸, 余无其他不良反应。本研究显示, 对于内科胸腔镜治疗大疱性肺-胸膜疾病术后持续漏气并肺复张不全或"体位加1.0"干预失败者, "体位加2.0"干预安全、有效, 且操作简单。     

维生素D3对IL-4和TNF-α诱导的气道平滑肌细胞TARC表达的影响

目的:探讨维生素D3(vitamin D3,VD3)对白介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的气道平滑肌细胞(ASMCs)胸腺和活化调节趋化因子(thymus and activated regulation chemokine,TARC)表达的影响.方法:体外培养ASMCs,给予IL-4和TNF-α诱导后分为5组:空白对照组(A组)、IL-4+TNF-α诱导组(B组)、地塞米松干预组(C组)、VD3干预组(D组)、地塞米松+VD,干预组(E组),采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中TARC和嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TARC mRNA的表达.结果:(1)ASMCs培养上清液中TARC和eotaxin的浓度.B组较A组表达明显增加,C、D、E组较B组表达降低(均P<0.05).(2)TARC mRNA的表达.B组较A组表达明显增加,c、D、E组较B组降低,较A组升高(均P<0.05).结论:VD3抑制了ASMCs内TARC的表达,降低了细胞因子eotaxin的表达水平.     

阿奇霉素对哮喘大鼠瘦素表达及气道炎症的影响

目的探讨阿奇霉素对肥胖哮喘大鼠气道炎症肺组织内及气道平滑肌细胞(ASMC)内瘦素表达的变化及抗炎作用。方法将大鼠随机分为正常对照组、正常哮喘组、正常干预组和肥胖对照组、肥胖哮喘组、肥胖干预组,建立肥胖、哮喘模型以及体外培养大鼠ASMC,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)及细胞上清液中瘦素浓度,Westernblot法检测肺组织和ASMC内瘦素蛋白的表达。结果肥胖对照组、肥胖哮喘组和肥胖干预组BALF白细胞总数及中性粒细胞数,肺组织瘦素蛋白表达及血清、BALF和细胞上清液中瘦素浓度与体质量正常相应组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肥胖哮喘大鼠气道炎症肺组织内瘦素表达增加,阿奇霉素能抑制气道炎症并部分降低哮喘大鼠瘦素的表达。     

脂联素对气道平滑肌凋亡的作用及对AMPK活性的影响

目的 探讨脂联素对气道平滑肌细胞凋亡的影响及相关机制的研究.方法 体外培养大鼠气道平滑肌细胞株,逆转录-聚合酶链反应法检测气道平滑肌细胞脂联素受体的表达.将体外培养的大鼠气道平滑肌细胞于不间浓度的脂联素中孵育48 h,流式细胞仪测定细胞的凋亡率;Western blot法检测活性的一磷酸腺苷激活蛋白激酶(pho-AMPK)蛋白的表达.结果 脂联素能够促进气道平滑肌细胞凋亡,并存在浓度依赖性(r=0.952,P<0.01);Western blot显示随着脂联素浓度的升高pho-AMPK的表达增加(r=0.907,P<0.01).结论 脂联素可能通过激活一磷酸腺苷激活蛋白激酶进一步激活凋亡信号通路诱导气道平滑肌细胞凋亡.     

沙丁胺醇对大鼠气道平滑肌细胞内eotaxin表达的影响及其机制探讨

目的 观察气道平滑肌细胞(ASMC)经致敏血清刺激后嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)的表达变化及沙丁胺醇对其表达的影响,探讨其可能的作用机制及β2受体激动剂在哮喘治疗中的作用.方法 无菌条件下分离SD大鼠气管段,组织块贴壁法体外培养ASMC.建立SD大鼠哮喘模型,采血收集血清.以致敏动物血清刺激体外培养的ASMC并收集培养上清及细胞.采用酶联免疫吸附法测定培养液上清中的eotaxin水平；放射免疫法测定培养细胞胞内环磷酸腺苷(cAMP)的表达；逆转录-聚合酶链反应半定量检测培养细胞中的eotaxin mRNA的表达.结果 哮喘大鼠被动致敏后,气道平滑肌细胞可表达eotaxin(n =4,P＜0.05),其表达水平与胞内的cAMP水平呈负相关(P＜0.01,r =0.788)；沙丁胺醇干预后,ASMC中eotaxin的表达明显下降(n=4,P＜0.05).结论 气道平滑肌细胞在致敏状态下eotaxin的表达显著增强,作为炎性分泌细胞参与哮喘发生过程,是哮喘发病机制的重要组成部分.沙丁胺醇可以在哮喘发病中有效抑制炎性细胞因子的表达.     

氨茶碱对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞中HDAC2及气道炎症的影响

目的 观察氨茶碱对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导下气道平滑肌细胞(ASMC)中炎性细胞因子及组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)蛋白表达的影响,探计HDAC2与气道炎症的关系.方法 将ASMC传代培养,TNF-α诱导后,加入氨茶碱,ELISA法检测上清中IL-6、IL-8和Eotaxin的水平,免疫印迹(Western-blot)法检测HDAC2的蛋白含量.结果 TNF-α诱导后.IL-6、IL-8和Eotaxin水平较正常组升高,HDAC2蛋白表达降低,差异有显著性(P<0.05);氨茶碱组IL-6、IL-8和Eotaxin水平较TNF-α诱导组降低,HDAC2增加,差异均有显著性(P<0.05).IL-6、IL-8和Eotaxin水平与HDAC2蛋白含量呈线性负相关(P<0.05).结论 氨茶碱可增加HDAC2的表达,HDAC2可下调IL-6、IL-8和Eotaxin的表达,减轻气道炎症.