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<正> 我院自1996年1月-1998年12月收治重型颅脑损伤患者131例,由于患者常伴有多脏器创伤,伤情复杂多变。因此密切观察病情的变化,全面细致做好各项工作对降低死亡率、减少后遗症有极其重要的作用。现报告如下。 相似文献
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p14ARF基因通过p53途径对肝癌细胞的生长的影响 总被引:7,自引:2,他引:5
目的 探讨 p14 ARF对含有野生型 p5 3(wtp5 3)的肝癌细胞生长的影响及其作用机制。方法 将含p14 ARF的基因转染到人肝癌细胞HepG2中 ,通过流式细胞仪及生长曲线观察其对HepG2细胞周期及细胞生长的影响。利用Western Blotting方法及 p2 1waf1启动子荧光素酶活性检测p14 ARF对HepG2细胞 p5 3蛋白表达的影响。 结果 转染p14 ARF基因的HepG2细胞的生长速度从第 3天开始较空载体 pcDNA 3组减慢 ,处在G0 G1期细胞数 ( 70 .6 6 % )与空载体组 ( 6 1.5 5 % )相比明显增加 ,转染 pcDNA3p14 ARF( 1.0 92 3± 0 .0 370 ) p2 1waf1启动子荧光素酶活性较空载体组( 0 .76 73± 0 .0 180 )明显升高 ( P <0 .0 5 )。Westernblotting结果表明 ,p5 3表达也明显增加。 结论p14 ARF基因通过上调HepG2细胞的 p5 3表达导致 p2 1waf1的表达升高使细胞阻滞于G0 G1期 ,从而抑制细胞的生长。 相似文献
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在肿瘤的形成过程中,有两条通路研究的较为深入,即pRb(p16-pRb-cyclin D1)和p53(ARF-Mdm2-p53-p21WAF/CIP1)通路,由于p53突变在胰腺癌中是一主要事件,我们利用传统的免疫组化技术并结合新兴的组织芯片技术检测p53通路中相关基因:ARF、Mdm2、p53和p21在胰腺癌、癌旁与良性病变组织中的表达情况,以探讨四种蛋白在胰腺癌组织中的改变情况、临床意义及相互作用关系. 相似文献
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背景与目的:在前期工作中,我们经计算机序列分析发现,在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因组增强子Ⅰ上游1047~1059 bp存在P53样应答元件结合序列5′-TGCC(G)TTGCCT-3′,体外实验应用凝胶迁移方法(EMSA和EMSSA)发现这段序列与P53蛋白能够进行特异性结合.本实验拟观察肝癌细胞中P53蛋白与HBV基因组P53样应答元件结合序列之间的关系.方法:报告基因质粒pX-CAT上游为X基因增强子和启动子序列,其中含有P53样应答元件结合序列5′-TGCGTTGCCT-3′.首先用PCR方法将pX-CAT质粒中5′-TGCGTTGCCT-3′进行点突变,成为5′-TGTATTGTAT-3′,以破坏P53样应答元件结合序列.将pX-CAT和变异后的pX-CAT(mpX-CAT)分别单独或与pCMV-p53质粒共转染HepG2细胞,通过检测报告基因CAT的活化情况,观察P53蛋白与这段DNA序列的作用关系.将HBV基因P53样应答元件结合序列反向构建于真核表达质粒pZeoSV2中(αpZeoXP),转染HepG2.2.15细胞并稳定筛选,以封闭HBV基因上P53样结合位点,观察细胞中P53/P21蛋白表达的改变,以及细胞周期、细胞凋亡的变化.结果:HepG2细胞中,报告基因CAT活性在pCMV-p53与pX-CAT共转染组较pX-CAT单独转染组明显升高(1.353 vs 0.738,P<0.05),而mpX-CAT单独转染组CAT活性则明显降低(0.304),即使与pCMV-p53共转染CAT活性也较低(0.402).与对照组相比,稳定转染了αpZeoXP的HepG2.2.15细胞中,P53、P21蛋白表达水平降低;细胞周期检测显示,与对照组相比,处于S期的细胞数增多(16.37%vs 9.48%),而细胞凋亡数减少(0.95%vs7.84%).结论:P53可促进pX-CAT报告基因在细胞内的表达,进一步提示P53与HBV增强子上游5′-TGCC(G)TTGCCT-3′序列存在结合作用,二者作用可能通过导致细胞内P53蛋白半衰期延长,而使细胞中P53及其下游基因P21蛋白表达水平和活性升高. 相似文献
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不同p53状态的肝癌细胞系DNA损伤修复能力的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察不同p53状态的肝癌细胞在DNA损伤因素存在下,探讨p53在肝细胞癌发生过程中的作用。方法 选用内源性表达野生型p53、突变型p53、p53全基因缺失的HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B肝癌细胞系,将含有p53结合序列的CAT报告基因质粒分别转染各细胞,通过ELISA方法检测报告基因CAT活化情况,观察p53功能状态;用细胞生长曲线比较不同p53状态的细胞生长速度的差异;给予一定剂量的紫外线照射,检测各细胞程序外DNA损伤修复(UDS)能力;观察紫外线照射后细胞克隆形成情况,反映不同细胞系在紫外线照射后细胞存活率的不同。结果 报告基因CAT在HepG2细胞表达最强,而在PLC/PRF/5、Hep3B肝癌细胞均处于较低水平,说明HepG2细胞具有功能性的p53表达;HepG2细胞生长速度明显慢于其他两种细胞;紫外线照射后,HepG2具有较好的DNA损伤修复能力以及较高的细胞生存率。结论 野生型p53具有抑制肝癌细胞生长、保持细胞良好的DNA损伤修复的功能。 相似文献
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目的探讨运动日记在外周静脉置入中心静脉导管(peripherally inserted central catheter,PICC)患者手臂操锻炼中的应用效果。方法将2017年6月-8月在本院住院治疗的30例PICC置管患者设为对照组,采用手臂操锻炼视频和常规护理方法对患者进行功能锻炼的指导;将2017年9月-11月在本院住院治疗的32例PICC置管患者设为观察组,在对照组基础上采用自行设计的运动日记进行干预,共干预31d。比较两组患者干预前后功能锻炼的依从性和干预后静脉血栓的发生率。结果干预后观察组患者手臂操锻炼依从率(90.6%)高于对照组(26.7%);静脉血栓发生率(3.1%)低于对照组(30.0%),两组比较,差异均有统计学意义(P0.001,P=0.004)。结论运动日记可提高PICC置管患者手臂操锻炼的依从性,从而起到预防静脉血栓发生的作用,值得在临床应用和推广。 相似文献
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目的:观察五味地龙汤对实验性支气管哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)的计数和肺、支气管组织形态学的影响。方法:用OVA腹腔注射及气道吸入激发建立哮喘豚鼠模型,对支气管肺泡灌洗液离心后计数BALF中EOS。光镜观察其肺支气管病理组织学变化。结果:①一般情况:哮喘模型组豚鼠均出现不同程度的呼吸次数增加、张口等呼吸困难症状,各药物组豚鼠OVA激发后,地塞米松组和五味地龙汤大剂量组没有出现明显不适症状。②BALF中EOS计数显示:各组与哮喘模型组EOS(15.57±1.51)个/mm3比较,差异均有非常显著的统计学意义(P〈0.01)。五味地龙汤大剂量组和地塞米松组与正常对照组EOS(0.83±0.75)个/mm3比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。哮喘性模型组BALF中EOS数明显增加。③光镜观察:模型组见支气管黏膜下层充血水肿,嗜酸性粒细胞灶状浸润,腔内可见部分粘液及渗出物。地塞米松组:气管及支气管管壁结构正常,无炎性渗出。五味地龙汤大剂量组:气管管壁结构逐渐恢复,炎症减轻,水肿明显消失。管腔炎性渗出物明显减少。结论:五味地龙汤可能通过减少气道EOS浸润,减轻炎性渗出,抑制杯状细胞和平滑肌增生,抑制气道重塑,从而发挥平喘的作用。 相似文献
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