2018年至2019年浙江省绍兴市新确证人类免疫缺陷病毒1型感染者的分子传播网络特征分析

目的分析浙江省绍兴市新确证人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)感染者传播关系的分子网络特征,为疫情流行趋势和防治提供依据。方法纳入2018年8月至2019年12月绍兴市新确证未经抗病毒治疗的423份HIV-1感染/艾滋病病例血液样本,获得375份样本序列,采用反转录聚合酶链反应和巢式聚合酶链反应扩增HIV-1的pol基因,采用MEGA 6.0软件构建系统进化树分析亚型,并采用HyPhy软件和Cytoscape 3.7.2。生成不同基因距离的分子网络,通过美国斯坦福大学HIV耐药数据库在线软件工具分析耐药突变位点。结果375份样本序列中发现8种亚型,优势亚型为流行重组型(circulating recombinant form,CRF)07BC 215份(57.33%),CRF01AE 103份(27.47%),其他包括CRF08BC、CRF85BC、CRF5501B、B、C和CRF01AE/B亚型。在基因距离为1.50%时,共形成24个分子簇,194条序列入网,入网率为51.73%。在分子簇最多的0.75%基因距离时,共形成30个分子簇,129条序列入网,入网率为34.40%,35例以老年人为主的病例聚集成CL1簇。42份样本存在监测性耐药突变(surveillance drug resistance mutation,SDRM),耐药传播率为11.20%(42/375),其中非核苷类反转录酶抑制剂耐药突变38例,分别为K103N(32/375,8.53%)、K103S(4/375,1.07%)、Y188L(1/375,0.27%)和G190A(1/375,0.27%),蛋白酶抑制剂耐药突变4例,分别为M46I(3/375,0.80%)和V82A(1/375,0.27%)。分子簇C2序列携带高比例耐药突变(94.29%,33/35)。结论绍兴市HIV-1亚型丰富多样,CRF07BC亚型传播迅速;在0.75%基因距离仍聚集的CL1簇老年病例亟待干预,防止该耐药毒株的进一步快速传播。     

核酸定量检测试验应用于HIV-1感染诊断的评价

正1型艾滋病病毒(HIV-1)感染的诊断依赖于实验室检测,不同的检测方法由于标志物的不同而有不同的窗口期。常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)+蛋白印迹试验(WB)的检测策略存在早期感染漏检的风险。在可疑人群中应用更高效的检测策略,可以有效地诊断HIV-1的早期感染。对2018年本确证实验室复检的第四代HIV筛查试剂有反应而WB结果为阴性或不确定的样本进行HIV-1核酸定量检     

68家艾滋病实验室室间质评结果分析

目的了解绍兴市艾滋病实验室HIV抗体检测质量,探讨存在的问题,提高检测质量。方法每年对辖区内有资质的艾滋病实验室进行盲样考核,分析2005--2012年室间质量考评结果。结果参评实验室数量8年间增加126．67％,增加的实验室以医疗机构为主。检测试剂以国产第三、四代为主,部分使用进口第四代试剂。定性结果判断正确率100．00％,每年定量结果满意率≥90．00％,但相应的原始记录和室内质控还不够规范。结论通过实验室室问质评反映本市的艾滋病抗体检测水平总体较好,证明实验室检测系统的准确性和可靠性,但质量控制和规范化管理还有待提高。     

HIV抗体不确定样品的随访结果

目的了解HIV抗体检测产生不确定结果的特点及随访情况。方法对绍兴市2007—2013年HIV抗体确证检测为不确定结果样品的来源、复检结果及蛋白印迹试验(WB)带型特点进行分析并跟踪随访。结果 955份复检阳性标本经WB试验报告结果为不确定29份,占3.03%。对29份标本的人作追踪随访,完成随访16人,复检ELISA和RT结果均为阳性的8人随访后均转为阳性;复检单项阳性的8人随访后均转为阴性。29份不确定结果中共检测到6种带型,gp160(+)、p24(+)和gp160(+)p24(+)3种带型最为常见,占89.65%。结论复检结果双阳性的样品阳转率较高,应加强随访并寻求替代确认策略,以减少非特异性反应导致假阳性结果。     

HBV-LP与HBV-DNA检测法在HBeAg阴性乙肝患者及正常人中的比较

目的:通过检测餐饮从业人员、学生等公共卫生体检人员中乙肝病毒大蛋白(hepatitis B virus large proteins,HBV-LP)的情况,探讨HBV-LP与HBV-DNA检测法在HBeAg阴性HBV患者和正常人中检测效果的异同。方法:采用酶联免疫法(ELISA)测定乙肝两对半(HBV M)以及乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP);采用Real-time PCR法检测HBV-DNA,对各类体检人员的709份血清标本和200份正常人的血清标本分别进行检测。结果:(1)在489份HBeAg阴性乙肝患者的标本中,HBV-LP与HBV-DNA检测法的检测结果差别无统计学意义(χ2=0.58,P>0.05)。(2)HBV-LP S/CO值与HBV DNA拷贝数呈正相关(r=0.951,P<0.05)。(3)在乙肝二对半(HBV-M)均阴性200份餐饮从业人员的标本中,两种方法的检测结果差别亦无统计学意义(χ2=0.40,P>0.05)。结论:乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)像HBV-DNA一样能够有效、真实地反映HBV病毒复制情况,该方法可以在体检领域推广使用。     

鲍曼不动杆菌整合子研究

目的明确我院鲍曼不动杆菌中整合子的分布及基因盒结构。方法采用K-B法测定68株鲍曼不动杆菌对12种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)分析其整合子。结果鲍曼不动杆菌对含舒巴坦制剂头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦耐药率最低分别为20.6%和47.1%,亚胺培南、美洛培南的耐药率分别为77.9%、75.0%,对其他抗菌药物的耐药率均在70%以上。36株细菌整合子PCR阳性,片段长度为2939bp,携带有aacA4、catB8和aadA1基因。结论鲍曼不动杆菌整合子主要介导对氨基糖苷类及氯霉素的耐药性。     

对鲍曼不动杆菌整合子相关的耐药基因分析

目的明确我院鲍曼不动杆菌中整合子的分布及基因盒结构。方法采用K-B法测定68株鲍曼不动杆菌对12种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)分析其整合子。结果鲍曼不动杆菌对含舒巴坦制剂头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦耐药率最低分别为20.6%和47.1%,亚胺培南、美洛培南的耐药率分别为77.9%、75%,对其他抗菌药物的耐药率均在70%以上。36株细菌整合子PCR阳性,片段长度为2939bp,携带有aacA4、catB8和aadA1基因。结论鲍曼不动杆菌整合子主要介导对氨基糖苷类及氯霉素的耐药性。     

重症医学科耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌耐药基因研究

目的了解鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型,探讨其耐药性与治疗策略。方法分离2014年-2016年重症医学科(ICU)耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌208株,用VITEK 2全自动微生物鉴定系统进行菌种鉴定及药敏检测,PCR法检测OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXA-58基因。结果耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对ICU常用药物除头孢哌酮/舒巴坦外耐药率均 50%。OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXA-58基因的检出率分别为89. 95%、0. 00%、100. 00%、67. 72%。结论 ICU耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌广泛携带OXA型耐药基因,需要调整用药,加强监测。     

浙江省绍兴市50岁及以上人群HIV-1分子网络和传播簇特征分析

  目的   分析浙江省绍兴市2018年7月至2020年6月报告的50岁及以上中老年人HIV-1分子网络特征,掌握HIV-1在该人群中传播网络的危险因素和特点,为制订有效的干预措施提供依据。  方法   2018年7月至2020年6月连续收集新报告感染HIV-1的50岁及以上中老年人血液样品147份,采用反转录聚合酶链式反应和巢式聚合酶链式反应扩增HIV-1的pol基因,构建系统进化树分析亚型和不同基因距离的分子网络,对研究对象进入网络的相关因素及成簇病例特征进行分析。  结果   147份样品序列中检测到4种基因型,其中以CRF07_BC（76例,51.70%）为主,其次为CRF01_AE（36例,24.49%）、CRF08_BC（33例,22.45%）和B（2例,1.36%）。 共74条序列进入网络,入网率为50.34%,形成12个分子簇,簇内个体数分别在2 ~ 30例。 对进入网络的影响因素分析,发现文化程度和艾滋病相关知识知晓率低、确诊前不关注艾滋病相关话题、商业性行为从未使用安全套和暗娼价格低于50元更容易进入网络。 多因素logistic回归结果显示,暗娼价格低是进入网络的影响因素。 入网病例中,CRF07_BC亚型的构成比最高（30例,40.54%）,并形成一个包含30例病例的大簇,其病例大多居住在越城区城南街道及附近,均在附近有商业性行为;此外CRF01_AE亚型形成一个包含暗娼感染者在内的7例病例分子簇,簇内病例居住在齐贤街道及附近;12个分子簇中有12对夫妻双阳性病例,均为男性商业性行为引起的家庭内传播。  结论   绍兴市50岁以上中老年感染者HIV-1亚型多样,进入网络的相关因素主要为对艾滋病防治知识匮乏和与低档暗娼发生不安全性行为;簇内病例呈现地理的相对聚集性以及家庭内传播,应加强疫情聚集街道中老年人群干预和HIV筛查,有效遏制艾滋病的传播。     

浙江省绍兴市46例男男性行为者HIV感染基因特征分析及流行病相关因素分析

目的 了解浙江省绍兴市男男性行为者(MSM)人群中HIV-1感染者的亚型类型和特征 。方法 分析2013年1月至2014年7月本地区新确证未经抗病毒治疗的50例MSM感染者样本,采用RT-PCR和nest-PCR方法扩增HIV-1的gag和pol全长基因区,成功扩增46份样品,构建系统进化树分析基因亚型。结果 46份样品中发现CRF01_AE、CRF07_BC和B三种亚型和1株AE、BC重组亚型,各占52.17%、39.13%、6.52%和2.17%。结论 绍兴市 HIV-1感染的MSM人群中主要流行的亚型为CRF01_AE和CRF07_BC,该人群感染率高,应加强监测。