以培养学习兴趣为基本出发点的生物化学教学探索

针对生物化学内容抽象、复杂,学生易产生厌倦、懈怠思想的实际情况,在教学中从绪论课入手,通过创造良好的课堂气氛,采用案例教学法、PBL教学法等多样的教学方法和形式,激发学生学习兴趣,提高学习积极性,从而有效地提高课堂教学质量.     

重组人成骨生长肽治疗去卵巢大鼠骨质疏松的实验观察

目的探讨重组人成骨生长肽(recombinanthumanosteogenicgrowthpeptide,rhOGP)对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用。方法通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松模型,经rhOGP治疗12周后,测定骨密度(BMD)、血清中的酸性磷酸酶(TRAP)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)。结果rhOGP治疗组碱性磷酸酶(233.77±42.07)U/L、骨钙素(1.95±0.15)μg/L和骨密度明显高于骨质疏松模型组(156.23±23.38)U/L、(1.33±0.24)μg/L(P<0.01),而酸性磷酸酶(19.27±4.24)U/L,明显低于骨质疏松模型组(29.98±3.08)U/L(P<0.05)。结论rhOGP能刺激成骨细胞的活性,增加骨密度,提高骨量,对去卵巢大鼠所引起的骨质疏松有效,有可能成为治疗骨质疏松症的有效药物。     

人内皮抑素基因改造、表达、纯化及活性检测

目的克隆诱变的人内皮抑素(human endostatin,hES)氨基端基因,并检测其活性。方法双酶切已诱变的人内皮抑素基因,电泳回收氨基端片段,与质粒pTYB-2重组,转化E．coli BL-21(DE3)。通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验,MTT实验,HE染色及流式细胞术检测重组小分子人内皮抑素对新生血管生成、细胞增殖和细胞凋亡的影响。结果基因重组小分子内皮抑素对鸡胚尿囊膜新生血管生成具有明显的抑制作用;对脐静脉内皮细胞和肝癌细胞增殖的抑制存在量效关系;作用24h后,观察到细胞凋亡现象;与对照组相比,细胞凋亡数增加。结论成功构建了人内皮抑素氨基端基因工程菌,得到了具有生物活性的氨基端小分子内皮抑素,为便利临床应用奠定了基础。     

电针对脑缺血再灌注大鼠内质网应激关键因子GRP-78、Caspase-12表达的影响

目的观察电针对脑缺血再灌注大鼠不同时间点脑缺血区脑神经细胞凋亡及内质网应激凋亡通路信号分子葡萄糖调节蛋白(GPR78)和Caspase-12影响。方法 126只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,其中假手术组6只,模型组和电针组各60只。模型组和电针组再随机分为再灌注6、12、24、48、72h组,每组12只,采用改良线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型。电针组电针百会和大椎,每次30min,每12h治疗1次,假手术组和模型组大鼠捆绑固定30min,不做任何治疗。假手术组于手术后24h、各组大鼠于相应时间进行神经学分级评定后处死大鼠并提取脑组织,观察海马CA1区形态学改变。TUNEL法检测各组神经细胞凋亡指数,免疫组化法和Western blot检测脑组织GRP78、Caspase-12蛋白表达的变化。结果模型组和电针组海马CA1出现不同程度细胞凋亡变形。与本组前一时间点比较,模型组及电针组再灌注12、24、48、72h神经功能评分降低(P0.05,P0.01),再灌注12、24h神经细胞凋亡指数、Caspase-12阳性细胞数、Caspase-12蛋白表达升高(P0.05,P0.01),再灌注48、72h神经细胞凋亡指数、Caspase-12阳性细胞数及蛋白表达降低(P0.05,P0.01),再灌注12hGRP78阳性细胞数、GRP78蛋白表达升高(P0.05,P0.01),再灌注24、48、72hGRP78阳性细胞数及蛋白表达降低(P0.05,P0.01)。与模型组同期比较,电针组再灌注12、24、48、72h神经学评分、Caspase-12阳性细胞数降低(P0.05,P0.01);电针组各时间点神经细胞凋亡指数、GRP78阳性细胞数及蛋白表达、Caspase-12蛋白表达降低(P0.05,P0.01)。结论缺血再灌注24h为神经元凋亡高峰,Caspase-12的免疫活性出现的时间晚于GRP78。电针可能通过抑制GRP78、Caspase-12的释放和激活减轻脑缺血再灌注后不同时间所致缺血脑神经细胞凋亡。     

肿瘤抑素相关肽抗肿瘤活性研究

[目的]评价肿瘤抑素相关肽19肽和21肽抗肿瘤活性.[方法]已构建好的19肽和21肽重组质粒在大肠杆菌BL-21(DE3)中表达,经几丁质亲和层析柱纯化出19肽和21肽.用SDS-PAGE聚丙烯酰胺电泳对表达及纯化结果进行初步鉴定,进行19肽、21肽和19肽 21肽的腹水型转移型小鼠H22肝癌实体瘤模型大体抑瘤实验,并做组织病理学切片分析.[结果]经一步亲和层析可获得可溶性19肽和21肽.19肽,21肽,19肽 21肽联合用药组在小鼠抑瘤实验中抑瘤率分别达48.46%,42.86%,53.94%.组织病理学切片结果可见3种给药方式都可促进小鼠肿瘤组织坏死,血管数量减少.联合用药组抗肿瘤作用强于单独用药组.[结论]肿瘤抑素相关肽19肽和21肽,具有抗肿瘤活性.     

高等职业教育医学基础精品课程建设中的问题与思考

医学基础课程具有概念多、医学术语多、内容多、知识更新快、难度大等特点.高等职业教育医学基础精品课程建设中存在着医学生在校学习时间短、课时大量削减、理论与实践教学过程难以体现高等职业教育的特点等问题；其主要表现为教学内容选择难,“教、学、做”一体化难,基于工作过程的教学设计、项目及工作任务驱动难,工学交替难,特色与创新难等难点.因此,医学基础精品课程建设不应当硬套评审标准,而需要更加注重如何更好地在为专业课程服务方面创出特色.     

五位一体教学法在生物化学检验实验教学中的应用

目的:探讨五位一体教学法在生物化学检验实验教学中的应用,完善医学检验教学方法,提高学生的实践能力。方法:2016年9月-2017年12月以我院2015级检验专业大专3班的学生为研究对象,随机选取其中25人为对照组采用传统的教学法,另外25人为实验组采用五位一体教学法,比较两组学生的教学效果。结果:实验组教学效果明显高于对照组(P0.05)。结论:采用五位一体教学法有利于提高检验学生的实践能力,提高教学质量,适应当前检验形势发展的需求。     

大麻受体激动剂WIN对白血病K562细胞增殖和诱导凋亡作用的研究

目的探讨大麻受体激动剂W／N-55,212-2（WIN）对白血病K562细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法将细胞分成对照组和不同剂量大麻受体激动剂wIN用药组。CCK-8测定WIN对K562细胞增殖的影响;DAPI染色观察细胞核形态变化;JC-1分析线粒体膜电位变化;分光光度法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性;流式细胞仪分析细胞凋亡率变化;Western印迹法分析Bax、Bcl-2及C-myc蛋白的表达。结果与对照组相比较,5、10、20μmol／L的WIN处理K562细胞24、48h后,增殖抑制作用明显且具有剂量依赖性,差异有统计学意义（P〈0．05）。DAPI染色和线粒体膜电位检测结果显示,K562细胞发生凋亡。流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率升高。WIN处理24h后,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性均增加（P〈0．05）。Western印迹法显示,Bax蛋白表达增加,C-myc、Bcl-2蛋白表达下降。结论大麻受体激动剂WIN能抑制白血病K562细胞增殖,并诱导凋亡,其机制可能通过上调Bax蛋白表达,下调C-myc、Bcl-2蛋白表达,以及促使线粒体跨膜电位下降。激活Caspase．3、Caspase-8、Caspase-9蛋白而实现。     

经典PBL与讨论自主型PBL教学方法在生物化学教学中的比较研究

目的：比较经典PBL与讨论自主型PBL在生物化学教学中的应用.方法：随机选取三个班分别进行传统教学法,经典PBL和讨论自主型PBL教学法,并对教学效果进行比较.结果：三个班学生考核成绩无差异.问卷分析显示两种PBL方式在综合能力等方面无差异,而在对导师评价上有差异.结论：讨论自主型PBL同样有助于提高学习积极性、自主性及综合能力培养,但对临床思维培养和学生评价有待完善.     

重组人内皮抑素的纯化及抗肿瘤活性研究

[目的]从高效表达的基因工程菌中纯化重组人内皮抑素,对其抗肿瘤活性进行研究.[方法]经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,重组人内皮抑素在大肠杆菌基因工程菌中以包涵体形式高效表达.通过凝胶层析纯化重组内皮抑素蛋白.应用鸡胚绒毛尿囊膜实验(CAM),肺癌细胞MTT试验及细胞迁移抑制实验,裸鼠皮下移植喉癌抑瘤实验、病理组织切片、免疫组化指标的测定等检测研究重组人内皮抑素的抗肿瘤活性.[结果]重组内皮抑素的复性率可达40%.重组内皮抑素在体外直接抑制肺癌细胞的增殖及迁移.用药21天,对裸鼠皮下移植喉癌的抑瘤率达到40.66%,HE染色、免疫组化及CAM实验表明其对肿瘤组织新生血管的生成有较强的抑制作用.[结论]重组人内皮抑素具有抑制肿瘤组织新生血管生成和直接抑制肿瘤细胞生长和迁移的双重抗肿瘤活性.