空调隔尘网表面细菌污染情况调查

空调机内环境适宜微生物的繁殖 ,有报道从空调系统的冷却水中分离到引起急性肺炎的细菌及其他病原体。我们采集空调隔尘网样本进行细菌分离、培养和鉴定 ,现报告如下。一、材料与方法1 标本 :浸以无菌生理盐水的棉拭子涂抹空调隔尘网表面后置无菌试管 ,每部空调采样 5份。共采集 36 0部空调180 0份标本 ,包括 18所学校 92部空调、14家饭店 112部空调、2 2个娱乐场所 (包括宾馆、茶楼、歌舞厅和电影院、剧场 )70部空调、12家医院病房 86部空调。2 细菌培养与鉴定 :标本接种于普通营养琼脂 ,置 2 5℃温箱内培养 4 8h ,有菌落生长者判为阳性标…     

间接血凝试验诊断肠螨病

肠螨病 (intestinalacariasis)是由某些螨类寄生人体肠腔或肠壁而引起的一种消化道疾病 ,临床表现多样 ,轻者可无症状 ,重者可出现腹泻、腹痛、腹部不适、乏力和精神不振等 ,临床上常误诊为过敏性肠炎、慢性肠炎、肠神经官能症等而延误治疗〔1- 3〕。为探讨快速、准确的实验诊断方法 ,本文采用间接血凝试验诊断肠螨病。现报告如下。1　材料与方法1 1　待测血清　肠螨病患者和健康献血员血清。肠螨病患者以粪检螨阳性为入选依据 ,作为实验组 ;健康献血员血清3 0份由淮南市中心血站提供 ,作为对照组。1 2　粉尘螨变应原　按照WHO (1984)标准…     

淮南地区矿工幽门螺杆菌vacA、cagA基因分布特征

[目的]研究淮南地区煤矿工人幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)vacA、cagA基因分布特征。[方法]选择经胃镜及病理组织检查诊断证实有相关胃、十二指肠疾病的349名矿工为研究对象,取其胃窦部活检黏膜作H.pylori的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出H.pylori菌株的vacA、cagA基因,并进行分型。[结果]349份样本中共分离培养出244株H.pylori菌株,其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠溃疡幽门螺杆菌培养阳性率分别为61.61%(69/112)、61.54%(48/78)、75%(72/96)及87.30%(55/63);基因测定结果显示,244株H.pylori菌株临床分离株中,84.84%(207/244)含vacA基因,73.36%(179/244)含cagA基因;其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠溃疡cagA、vacA基因检出率分别为66.67%(46/69)、50.72%(35/69)、85.42%(41/48)和70.83%(34/48)与93.06%(67/72)、84.72%(61/72)、96.36%(53/55)和89.09%(49/55),4种疾病间差异均具显著性(P<0.01)。进一步分型发现,慢性胃炎、萎缩性胃炎,胃溃疡及十二指肠溃疡患者中vacA 、cagA 分别为44.93%(31/69)、66.67%(32/48)、79.17%(57/72)、87.27%(48/55),差异具显著性(χ2=30.80,P<0.01)。vacA 、cagA 菌株主要多见于损害较严重的胃黏膜表面,如萎缩性炎症、炎性坏死等,23例腺体不典型增生的胃黏膜表面均为vacA 、cagA 菌株。[结论]淮南地区矿工H.pylori感染多为vacA 、cagA 菌株,vacA 、cagA H.pylori菌株为高毒力菌株,且与较严重的胃黏膜病理改变有关,可能是导致矿工慢性胃炎、消化性溃疡的重要因素,临床应充分重视H.pylori菌株毒力因子的监测。     

古细菌水通道蛋白AqpM四聚体在脂质双分子层的分子动力学模拟

目的通过古细菌水通道蛋白AqpM的分子动力学模拟,为其结构及功能研究奠定基础。方法将AqpM四聚体嵌入在二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(POPE)脂质双分子层,并加入水模型(TIP3P),使之模拟水通道蛋白与脂质和水分子在真实环境中的相互作用。结果模拟过程中RMSD值在最后2.35ns的变化较小,表明蛋白和脂质达到最终结构的平衡。结论成功进行了AqpM脂质平衡系统的分子动力学模拟,并对AqpM通道的结构作了进一步研究,这对了解水通道蛋白结构及其功能具有重要意义。     

ABC-ELISA检测血清粉尘螨特异性IgE

目的　应用ABC -ELISA法检测粉尘螨特异性IgE。 方法　按常规ABC -ELISA法操作 ,以阳性血清光密度值1 0时所需要的条件为最适条件 ,经预实验选择最适抗原包被浓度、血清稀释度和酶结合物浓度 ,并经特异性抑制试验验证。用ABC -ELISA法对 76例哮喘患者和 30例正常人进行粉尘螨特异性IgE检测 ,并与皮肤挑刺试验结果比较。 结果　ABC -ELISA法检测粉尘螨特异性IgE最适抗原包被浓度为 10 μg/ml,血清稀释倍数为 1∶4 0 ,Avidin -HRP为 1∶6 0 0 ,粉尘螨浸液和鼠抗人IgE均能抑制阳性反应。支气管哮喘患者和正常人粉尘螨特异性IgE校正OD值分别为 2 4 1± 1 13和 1 2 5± 0 5 6 ,差异具显著性 (χ2 =5 36 ,P <0 0 1)。粉尘螨浸液皮试与螨特异性IgE测定的符合率为 93 4 0 % (99/10 6 )。 结论　ABC -ELISA法检测粉尘螨特异性IgE耗时短 ,且具有较好的抗原特异性 ,建议临床推广应用。     

盐城地区居室环境中尘螨调查

目的了解江苏省盐城地区居室环境中尘螨孳生现状。方法 2013年5月使用吸尘器收集居民卧室及大学生宿舍内的床面灰尘和枕尘,共采集尘样200份。采用直接镜检法对灰尘样品中的螨类进行分离、鉴定和计数。结果共检获螨类1 284只,隶属于5科8属,总孳生率为51.00%(102/200),平均孳生密度为37.95只/g,其中学生宿舍孳生率及孳生密度均高于居民卧室(P0.05)。屋尘螨和粉尘螨占种群比例分别为36.68%和22.74%。结论屋尘螨和粉尘螨是盐城地区人居环境中的优势螨种。     

医学检验技术专业实训室的建设方案与实施效果

随着高等教育的迅速发展,实训室已成为现代大学中培养动手能力、实现创新教育的平台,实训室的地位和作用愈来愈不可替代。本文介绍了我院建设医学检验技术专业实训室的目的、理念、构成、功能,总结了实施所带来的效果。对今后更好的开展实验实训工作,加强学生实践操作能力的培养具有实际意义。     

尘螨变应原Der p2基因克隆及原核表达

目的 原核表达尘螨主要变应原DerP 2。方法分离屋尘螨总RNA，根据GenBank已公布的DerP2核酸序列设计引物用RT-PcR扩增DerP2编码基因，克隆至pMD19-T载体、亚克隆至表达载体pET28a（＋），将表达质粒转化至Escherichia coliBL21（DE3）并用IFFG诱导表达，并对表达产物进行免疫印迹鉴定。结果成功构建了表达质粒pET28a（＋）-DerP2，SDS-PAGE和Western blotting显示原核表达获得成功。序列分析表明所获得的DerP2编码基因与参考序列同源性达99．54％，推测其编码氨基酸130个，相对分子质量约为14348．5。结论尘螨变应原DerP2原核表达获得成功，为进一步生产重组变应原奠定了基础。     

两种粉螨分离方法的对比研究

目的　比较电热集螨法和振筛分离法分离粉螨的效果。方法　以 2 5W和 60W灯泡作电热集螨器的热源 ,分别收集 3、6、9、12、15、18、2 1和 2 4h 8个时间段分离出的螨 ;分别收集 5、10、 15、2 0、2 5和 3 0min 6个时间段振筛分离法分离出的螨。结果　 2 5W和 60W电热集螨器 2 4h集螨数分别为 (1164 2 .74± 415 5 .62 )只 /份和 (1982 4.5 7±2 168.3 3 )只 /份 ,差异有非常显著性 (t =9.5 6,P <0 .0 1) ;60W灯泡作为电热集螨器的热源 ,分离 3 0份样本 ,前 2个时间段 (3、6h)分离螨数为 5 2 813 1只 ,占 2 4h获取螨数 (5 9473 7只 )的 88.80 % ;以振筛分离法分离 3 0份样本 ,前 4个时间段(5、10、15和 2 0min)分离出螨 5 75 5 63只 ,占 3 0min所获螨数 (5 8782 0只 )的 97.91% ;3 0份样本以 60W灯泡为电热集螨器热源分离 6h获螨 (1760 4.3 7± 2 82 6.5 4)只 /份 ,3 0份样本采用振筛分离法分离 2 0min获螨 (19185 .43± 3 2 87.62 )只 /份 ,差异无显著性 (t =2 .0 0 ,P >0 .0 5 )。结论　电热集螨器以 60W灯泡为热源分离 6h较适宜 ,振筛分离法以 2 0min为适宜分离时间 ;两种方法收集螨的数量差异无显著性 ,但振筛分离法耗时短、收集到的螨纯度高 ,适宜粉螨抗原制备过程中使用。     

尘螨变应原Der f 2基因克隆及序列分析

目的:获得尘螨变应原Der f 2基因及其生物信息学资料.方法:提取粉尘螨总RNA,RT-PCR合成Der f 2的cDNA片段,回收PCR产物并连接至pMD19-T simple,经测序验证后亚克隆入表达载体pET-28a( ),转化大肠杆菌感受态细胞后提取质粒,双酶切鉴定.用ExPaSy,EBI,NCBI网站的在线软件对测序结果进行分析.结果:RT-PCR扩增获得了Der f 2 cDNA片段,酶切、电泳结果表明克隆和亚克隆获得成功.与参考序列相比,测序结果多了87 bp(77～163),但Blastn发现中国广州和德国Reinbek报道的序列中也含此87bp.同源性、相似性、序列比对及分子进化分析提示,该序列与中国广州和德国Reinbek报道的序列亲缘关系较近.推测该变应原由176个氨基酸组成,与附睾分泌蛋白E1具有同源性,信号肽位于1～17aa处,在6～24aa处有一跨膜螺旋.二级结构由a-螺旋(16.57%),延伸链(32.57%)和随机卷曲(50.86%)组成.结论:获得了粉尘螨变应原Der f 2编码基因及其分子特征,为进一步生产基因工程变应原用于临床诊治变态反应性疾病奠定了基础.