提高抗体芯片检测灵敏度的方法

抗体芯片作为蛋白质芯片的一种,具有高通量、高特异性及平行性分析的优点,目前已被应用到许多领域,成为蛋白质组学研究过程中不可缺少的技术。但是如何构建高敏感度、微型化及检测动力学范围广的抗体芯片以满足样品检测的需要,仍然是抗体芯片发展过程中所面临的重要挑战。就如何提高其检测灵敏度作一综述。     

慢性肾脏病生物标志物及其检测研究进展

一、生物标志物的定义 生物标志物首先是在1989年作为医学主题词被提出来的,当时定义为"可测量和定量的生物学参数".     

基于直接标记法抗体微阵列的初步构建

目的:初步构建基于直接标记法的抗体微阵列,并评价其应用于临床的可能性. 方法:选择白蛋白作为目标蛋白,通过琼脂糖铺片、玻片活化、机器点样、点样后固定等步骤构建抗体微阵列,经封闭非特异位点、标记抗原、加样后对白蛋白进行检测,对关键步骤--抗原标记进行最佳条件摸索,通过对临床标本的检测评价其潜在应用价值.结果:应用BCA蛋白定量试剂盒测定尿液样本总蛋白浓度做出的标准曲线,其R2均大于0.99;温度为37 ℃时抗原标记效果最佳;标记后抗原存放1周对信号的影响无统计学意义(P＜0.01);本方法能够检测出临床检测为阴性的尿微量白蛋白浓度.结论:本研究构建了基于直接标记法的抗体微阵列,并对关键的抗原标记环节进行了最佳工作条件优化,有应用于临床检测的潜力.     

慢性肾脏病生物标志物及其检测研究进展

一、生物标志物的定义 生物标志物首先是在1989年作为医学主题词被提出来的,当时定义为"可测量和定量的生物学参数".     

血管紧张素Ⅱ介导高糖诱导的人主动脉内皮细胞转分化

目的探讨高糖对内皮细胞转分化的影响及其与血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）的关系。方法将人主动脉内皮细胞分成正常浓度葡萄糖（NG）组、高糖（HG）组和厄贝沙坦干预（HG＋Irb）组。放射免疫法检测细胞上清液中ATⅡ的浓度。共聚焦显微镜观察CD31和成纤维细胞特异蛋白1（FSP1）的双染色结果。Western blot检测FSP1蛋白水平的表达。结果与NG组比,高糖刺激的内皮细胞导致ATⅡ和FSP1表达增加（P〈0．05）,呈浓度和时间依赖性。共聚焦显微镜可见CD31和FSPl表达重叠,且一些细胞获得纺锤样的改变并失去CD31染色。厄贝沙坦可抑制高糖引起的上述改变（P〈0．05）。结论高糖可能通过ATⅡ介导的内皮细胞转分化导致内皮细胞损伤,而厄贝沙坦抑制内皮细胞转分化。     

抗体的选择——从传统免疫分析到蛋白质芯片

随着后基因组时代（post—genome era）的到来和人类蛋白质组计划（human proteome project，HPP）的启动，蛋白质组学的研究开始受到越来越多的关注。蛋白质微阵列是蛋白质组研究中的一项重要技术，由三大紧密联系的技术支撑，即固相载体的选择与修饰，捕获分子和检测系统的选择。其中，捕获分子的选择和表征是蛋白质微阵列发展的关键技术之一，这里就蛋白质芯片构建过程中抗体的选择作一综述。     

临床蛋白质组学研究中值得注意的问题

后基因组时代的到来使临床蛋白质组学成为各种疾病的研究热点.然而,由于研究过程中一些共识性规范的缺乏,研究设计缺乏合理性和科学性,尤其是在研究分组设计、样本量、样本处理、数据质量控制、统计学评价以及独立的结果验证等环节,导致研究结果难以充分解释或重复性较差.本文针对目前临床蛋白质组学研究存在的问题结合文献进行综述.     

慢性肾脏病生物标志物及其检测研究进展

一、生物标志物的定义 生物标志物首先是在1989年作为医学主题词被提出来的,当时定义为"可测量和定量的生物学参数".     

尿液exosome：肾脏病研究的新载体

Exosome是细胞分泌的微小脂质双层微囊结构,最新的研究发现,除了传统的抗原递呈、诱导免疫耐受等功能外,还存在多种重要的新型生物学作用.自从Pisitkun等人于2004年首次发现尿液中exosome结构之后,exosome作为肾脏病研究的新载体,正逐渐开始引起了人们的关注.本文就exosome的最新生物学功能研究、尤其是尿液exosome作为肾脏病生物标志物研究载体的应用作一综述.     

血管内皮细胞在进展性肾病中的作用

内皮功能紊乱(endothelialdisfunction)即内皮源性舒张(endotheliumdependentrelaxation,EDR)功能障碍,并处于炎症发生、血栓形成前状态,其与许多心血管疾病及慢性肾衰的发生密切相关。越来越多的证据表明内皮源性舒张功能障碍、炎症反应及微血管内皮细胞的减少在启动肾脏纤维化,促进肾脏病进展的过程中起重要作用。