结肠炎大鼠炎症黏膜提取液对骨髓间质干细胞增殖和表面分化抗原的影响

背景:动物实验和临床试验均表明间质干细胞(MSCs)对受损肠道组织有一定修复作用,然而目前尚不清楚肠道炎症微环境对MSCs移植治疗炎症性肠病(IBD)有何影响。目的:通过体外实验观察结肠炎大鼠模型肠道炎症黏膜提取液对骨髓MSCs增殖和表面分化抗原的影响。方法:以全骨髓贴壁法分离和原代培养大鼠MSCs并行传代扩增。取三硝基苯磺酸(TNBS)结肠炎大鼠模型肠道炎症黏膜提取液(0、1、2、3 ml)与MSCs共培养,倒置相差显微镜观察各组细胞贴壁和生长情况,绝对计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面分化抗原表达。结果:全骨髓贴壁法可成功分离MSCs,所获细胞CD29、CD44表达阳性,CD105表达低度阳性,CD34、CD45表达阴性。3 ml炎症黏膜提取液处理组MSCs接种6 h后见细胞贴壁,36 h开始克隆性增生,此后细胞增殖速度较空白对照组明显加快,第6 d即达100%融合,但表面分化抗原表达与空白对照组相比无明显变化。结论:结肠炎大鼠炎症黏膜提取液可促进骨髓MSCs增殖,但对细胞表面分化抗原无明显影响。     

硫唑嘌呤对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的: 研究硫唑嘌呤(AZA)对SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖、凋亡和细胞周期的影响,为炎症性肠病的临床治疗提供实验依据。方法: 含10%FBS的低糖DMEM培养基培养大鼠MSCs,50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L、300 mg/L的AZA分别作用于大鼠MSCs 24 h、48 h和72 h,用显微镜下直接计数法检测MSCs的增殖情况并绘制生长曲线,用流式细胞术检测MSCs凋亡和细胞周期。结果: MSCs经过3次传代后可纯化。在小于100 mg/L浓度下,AZA对MSCs的增殖、细胞周期与凋亡无显著影响(P>0.05),而AZA在大于200 mg/L浓度下作用72 h后,MSCs生长受到明显抑制,抑制率大于66%,凋亡率明显升高(P<0.05);在300 mg/L浓度下作用72 h时,MSCs的凋亡率则明显降低,而MSCs坏死率明显升高(P<0.05)。在大于200 mg/L的AZA作用下,随着作用时间延长,MSCs进入G₀/G₁期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05)。结论: 一定浓度的AZA对大鼠MSCs的增殖、细胞凋亡和细胞周期均有明显的影响。大剂量的AZA会直接造成MSCs死亡。     

超声导入胃肠宁治疗急性胰腺炎的效果观察

目的:探讨超声导入胃肠宁治疗急性胰腺炎的效果.方法:60例急性胰腺炎患者随机分为对照组和观察组,对照组予常规治疗,观察组在常规治疗的基础上,予腹部超声导入胃肠宁治疗,比较两组腹痛缓解时间、腹胀缓解时间、肠鸣音恢复时间及平均住院天数.结果:观察组腹痛缓解时间、腹胀缓解时间、肠鸣音恢复时间及平均住院天数均明显短于对照组(P<0.05).结论:超声导入胃肠宁可缓解AP患者腹痛、腹胀症状,缩短肠鸣音恢复时间,促进患者康复.     

应用噬菌体展示肽库技术淘选大鼠CCR5膜外第一、二胞外环特异性结合的活性拮抗肽与初步鉴定

目的:利用噬菌体展示肽库技术淘选与大鼠CC趋化因子受体5(CCR5)膜外第一、二胞外环特异性结合的短肽,并鉴定其与CCR5的结合能力。方法:在蛋白质数据库中查得大鼠CCR5第一、二胞外环的氨基酸序列,合成相应的线性短肽作为淘选的靶分子,利用噬菌体展示7肽文库进行3~4轮淘选,用ELISA法鉴定所选肽与靶分子的结合,并测定其与浓度的关系。结果:与CCR5第一、二胞外环特异性结合的噬菌体展示的短肽序列分别为GHWKVWL和HYIDFRW,ELISA鉴定呈阳性反应,且短肽与靶分子的结合具有浓度依赖性和可饱和性。结论:利用噬菌体展示技术成功获得了2条CCR5特异性结合的短肽,并在体外证明其可与CCR5第一、二胞外环具有结合能力。     

炎症性肠病的现代内科治疗

炎症性肠病（inflammatory bowel diseases,IBD）包括溃疡性结肠炎（ulcerative colffis,UC）、克罗恩病（Crohn’s disease,CD）和中间型结肠炎（intermediate colitis,IC）,其发病机制仍不明确,可能与基因遗传、肠道免疫反应异常与环境等因素有关。     

骨髓间充质干细胞、肿瘤坏死因子受体Ⅱ-抗体融合蛋白和美沙拉嗪对TNBS诱导的结肠炎大鼠疾病活动指数与组织损伤指数的影响

 目的： 研究骨髓间充质干细胞（MSCs）、肿瘤坏死因子受体Ⅱ-抗体融合蛋白（TNFRⅡ-IgG）和美沙拉嗪对2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的结肠炎大鼠疾病活动指数（DAI）与组织损伤指数(TDL)的影响。方法： MSCs应用含10%胎牛血清的低糖DMEM培养。TNBS/乙醇灌肠诱导SD大鼠结肠炎模型。81只SD大鼠随机分成正常对照组（n=15,A组）、结肠炎组（n=15,B组）、MSCs治疗1组（3×106 MSCs,n=15,C组）、MSCs 治疗2组（5×106 MSCs,n=15,D组）、TNFRⅡ-IgG治疗组（n=6,E组）和美沙拉嗪治疗组（n=15,F组）。采用DAI描述大鼠的表现,大体CMDI描述肠道的肉眼下表现,TDI评价肠道组织学改变。结果： MSCs经过3次传代后可纯化。B组大鼠各时点DAI、CMDI和TDI评分均显著高于A组（P<0.05）;第6天除A组外各组大鼠评分之间无明显差异（P>0.05）;第9天 C组、D组和F组各评分均低于B组（P<0.05）,C组评分与D组无显著差异（P>0.05）;第14天 C、D、E和F组评分均低于B组（P<0.05）,其中F组评分最高（P<0.05）,E组次之（P<0.05）,D组评分最低（P<0.05）。结论： MSCs、TNFRⅡ-IgG和美沙拉嗪灌肠液可显著改善TNBS诱导的结肠炎大鼠第14天的DAI、CMDI和TDI指标,其中效果最好的是MSCs,其次是TNFRⅡ-IgG,美沙拉嗪灌肠液效果较差。     

CCR5在炎症性肠病患者肠黏膜的表达及其与β-arrestin 2表达的关系

 目的: 通过分析CCR5在炎症性肠病(IBD)患者活检肠黏膜的表达及其与β-arrestin 2表达的相关性,探讨CCR5与β-arrestin 2在IBD发病中的作用。方法: IBD活动期组53例、IBD缓解期组26例和正常对照组30例纳入研究,用EnVision二步免疫组化方法检测活检肠黏膜CCR5和β-arrestin 2的表达。结果: IBD活动期组CCR5阳性表达率及免疫组化评分均高于正常对照组和IBD缓解期组(P<0.05),CCR5表达与IBD活动期组的临床严重程度、病变范围及内镜下分级无明显关联性;β-arrestin 2在IBD活动期组的阳性表达率均明显低于IBD缓解期组和正常对照组(P<0.05),并且在IBD活动期β-arrestin 2表达与CCR5表达呈负相关性(P<0.05)。结论: 在IBD活动期组肠黏膜CCR5呈高表达,β-arrestin 2呈明显低表达,CCR5与β-arrestin 2表达呈负相关性。     

CC趋化因子受体与炎症性肠病

炎症部位白细胞聚集和活化是炎症性肠病(IBD)的重要特征,趋化因子受体是趋化白细胞的重要调节因子。在IBD中,多种趋化因子受体表达上调,触发多种炎症反应。本文就CC趋化因子受体(CCR)在IBD中的作用及其作为IBD治疗靶点的可能性作一综述。     

克罗恩病和肠结核的临床内镜和病理特征分析

目的 研究克罗恩病(Crohn's disease,CD)和肠结核(intestinal tuberculosis,ITB)鉴别诊断特点.方法 回顾性分析住院确诊的55例CD和35例ITB患者临床资料,应用Lee评分方法评估CD与ITB的诊断符合率.结果 血便与肛周疾病在CD常见(P＜0.05),发热、盗汗、腹胀、合并肺结核、腹水、PPD皮试强阳性在ITB常见(P＜0.05);CD内镜下见纵行溃疡、鹅卵石征、病灶常＞4节段者明显多于ITB(P＜0.05),而ITB内镜下更常见回盲瓣哆开、病灶常＜4节段(P＜0.05).内镜活检标本对二者鉴别价值有限,手术标本透壁性全层炎、裂隙状溃疡、粘膜下层增宽在CD中更常见(P＜0.05),CD微肉芽肿检出率更高(P＜0.05),干酪样肉芽肿则只存在于ITB中(P＜0.05),肉芽肿位置于粘膜下层和浆膜层肉芽肿更常见于ITB(P＜0.05),肉芽肿数目ITB高于CD(P＜0.05);应用Lee评分系统分别对CD组及ITB组进行评分,CD组＞0分者为42%,ITB组＜0分者为88%(P＜0.05).结论 CD与ITB的鉴别诊断需要综合临床、内镜、病理与Lee评分方法进行分析.