上海地区中国人群中ABO亚型的研究

目的研究中国人群中各种ABO亚型分布的特点,以及在A、B亚型中不规则ABO抗体的发生率。方法用常规方法对本中心2003~2004年的献血者血样共440617份进行筛选,对于正反定型不符的血样进一步作血清学以及分子生物学分析,并分类。另外,使用抗-H和抗-A1,筛选A2、A2B亚型。结果最常见的亚型为A2和A2B,分别占人群总数的0.156%和0.443%。确认其它ABO亚型(不包括A2,A2B和类孟买)共66例,占人群总数的1.50/万(66/440617)。A、B亚型中分别检出不规则抗-A,抗-B(同时存在A抗原和抗-A或B抗原和抗-B)54例,分别占A亚型和B亚型总数的91%和56%。通过本研究发现“A亚型B”的检出率明显高于期望值(4.08~9.97倍),而这一现象在“AB亚型”中表现不明显(0.865~1.65倍)。结论除A2,A2B之外,中国人群中B亚型明显多于A亚型,而A亚型产生抗-A的比例明显多于B亚型产生抗-B的比例;ABO亚型中普遍存在的不规则抗体现象提示正确鉴定ABO亚型的重要性;各种AB亚型的检出率明显高于期望值,显示了A,B亚型基因之间存在相互作用。     

免疫性输血反应的调查及预防研究

目的　对各类输血反应进行调查研究 ,同时建立输血前免疫血液学检查新技术 ,以预防和治疗免疫性输血反应。方法　对上海地区 13家医院的 30 776名输血病人进行调查 ,并应用改良Polybrene、简易致敏红细胞血小板血清学试验 (SEPSA)等新技术 ,进行同种特异性抗体的筛选、鉴定及交叉配型试验。结果　发生各类输血反应5 0 8例 (1.6 5 % ) ,其中检出引起免疫性输血反应的同种抗体 6 4例 (12 .6 % ) ,抗体特异性分别为血小板抗体 (包括HLA) 5 1例 ,红细胞不规则抗体 13例 ;各项新技术的应用对预防免疫性输血反应的发生具有显著相关性 (χ2 >3.84 ,P <0 .0 5 )。结论　使用研究建立的输血前免疫血液学新技术能有效地诊断、预防和治疗免疫性输血反应的发生 ,提高了输血的安全性和有效性     

应用多重PCR-RFLP技术检测头发、口腔腭粘膜的ABO基因型

目的探讨对头发、口腔腭粘膜等组织标本进行ABO基因分型的可行性.方法应用多重聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(多重PCR-RFLP)技术,检测8例头发和6例口腔腭粘膜标本的ABO基因型,标本的基因组DNA经2对引物同时进行扩增,扩增后的产物同时用Msp Ⅰ和Kpn Ⅰ 2种限制酶进行消化,通过消化后产生的片段即可判断结果.然后将分析结果与血清学技术检测的ABO表现型和受检者血液标本的基因型进行比较.结果 14例标本共检出6种ABO基因型,与表现型和血液标本的基因型结果完全一致.结论该方法操作方便,重复性、稳定性好,可鉴定15种基因型,应用于法医学鉴定具有可行性.     

ABO血型系统分泌型研究进展

ABO血型抗原表达的红细胞表面以外，还以可溶性血型物质的形式存在于大部分人的唾液或其它形式的分泌液中，产生可溶性血型物质的能力由19号染色体长臂的SE基因（又称FUT2基因）位点决定。本从分子生物学角度阐述ABO血型系统分泌型与非分泌型的最新研究进展。     

血型基因检测对照品的制备及其在三种稀有血型筛选中的应用

目的 应用基于聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)的基因定点诱变技术(sitedirected mutagenesis,SDM)制备s、Oka血型等位基因检测对照品.用多重聚合酶链反应(multiplex PCR)技术建立3种血型Fy2、s和Ok2的基因分型方法,以了解这3种血型在中国随机献血者中的多态性分布状况.方法 采用基于PCR的基因定点诱变技术对s和Oka血型等位基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点构建了含有突变SNP位点(GYPB基因cDNA 153位C/T突变和BSG基因cDNA 274位G/A突变)的标准质粒,作为s和Oka血型等位基因检测的对照品.同时针对血型抗原Fya、s和Oka等位基因的SNP位点设计序列特异性(sequence specific primer,SSP)引物,构建多重PCR体系,对438份随机献血者样本进行Fya、s和Oka血型抗原的基因筛选.结果 成功应用定点诱变技术完成了s和Oka基因检测中等位基因对照品的制备,并建立了可同时检测Fya、s和Oka血型的多重PCR体系,438份随机献血者样本中共检出2例Fy(a-)样本,未检出s-和Ok(a-)样本.结论 基于PCR的基因定点诱变技术能够得到难以获得的血型基因检测等位基因对照品,用于验证基因分型方法.本实验建立的多重PCR体系是一种有效的进行Fya、s和Oka血型基因检测的方法.     

ABO血型系统分泌型研究进展

ABO血型抗原除表达在红细胞表面以外 ,还以可溶性血型物质的形式存在于大部分人的唾液或其它形式的分泌液中。产生可溶性血型物质的能力由 19号染色体长臂的 SE基因 (又称 FUT2基因 )位点决定。本文从分子生物学角度阐述ABO血型系统分泌型与非分泌型的最新研究进展     

汉族和维吾尔族Knops血型系统基因多态性筛查

目的了解中国人群中Knops血型系统基因(CR1基因)分布多态性以及汉族与维吾尔族之间的差异。方法采用测序方法对5份汉族样本和12份维族样本CR1基因第29外显子进行检测,同时采用序列特异性引物聚合酶链反应(polymerases chain reaction-sequence-specific primer,PCR-SSP)技术对103份汉族样本和33份维吾尔族样本的CR1基因进行分型检测。结果108份汉族样本,CR1基因4646位均为A/A纯合,4780位A/A纯合73份(67.6%)、A/G杂合31份(28.7%)、G/G纯合4份(3.7%);针对45份维吾尔族样本的2个位点(4646位和4870位),分别有36份(80%)和34份(75.6%)A/A纯合、8份(17.8%)和7份(15.5%)A/G杂合、1份(2.2%)和4份(8.9%)G/G纯合被检出。结论汉族和维族人群的Knops血型系统在CR1基因4870位均存在多态性,而维吾尔族人群同时在4646位上存在多态性。中国人Knops血型系统基因型相对稳定,但汉族和维吾尔族之间存在差异。     

作者更正说明

《中国输血杂志》编辑部:您好!本人刊登在中国输血杂志2020年第33卷第11期1156页1.2部分发现1处错误: 按100 mL 每孔铺96孔培养板,现请更正为:按100 uL 每孔铺96孔培养板。谢谢!     

人类红细胞血型抗原基因分型多重PCR体系的构建及应用

目的 建立可同时检测血型抗原Dib、k、Jsb1910、Jsb2019的一套稳定的基因分型方法,通过筛选获得所检测人群的稀有血型数据,可扩大中国稀有血型资料库.方法 应用基于PCR的基因定点诱变技术制备Dib、k、Jsb1910、Jsb2019血型等位基因检测对照品.分别针对血型抗原Dib、k、Jsb1910、Jsb2019等位基因的单核苷酸多态性位点设计序列特异性引物,通过优化PCR条件建立多重PCR体系,并对4190份随机献血者样本进行Dib、k、Jsb1910、Jsb2019血型抗原基因分型.结果 成功制备出Dib、k、Jsb1910、Jsb2019基因检测对照品,并成功构建检测血型抗原Dib、k、Jsb1910、Jsb2019的多重PCR体系,所建立的多重PCR体系具有良好的重复性和稳定性,4190份随机献血者样本中共检出2例Di(b-)样本,未检出k-和Js(b-)样本.结论 多重PCR具有快捷、高通量且成本低的优点,可用于筛选稀有血型.获得的稀有血型可存入稀有血型数据库,为稀有血型患者及长期输血患者提供相配合的血液,减少输血不良反应的发生.     

红、白系细胞具有不同形式的KEL基因mRNA 转录本

目的 了解不同细胞KEL基因转录本的差异.方法 分别抽取K阴性、K阳性、K0的DNA、红系细胞RNA和总RNA,应用逆转录PCR、巢式PCR分别扩增、测序及克隆测序分析KEL基因第1～19外显子以及第2～8外显子.同时,4种单抗标记后流式细胞术检测红、白细胞上的Kell蛋白表达情况.结果 红系RNA均为忠实于基因组序列的正常KEL转录本,而K0产生4种不同的转录本.但总RNA作模板时,可以发现不同个体产生不同的转录本,以正常、缺失第3外显子、第7外显子之前插入16 bp内含子的转录本为最常见,这些异常拼接也见于K0的红系RNA;总RNA第1～19外显子扩增片段虽然电泳条带只有一条,但测序显示为多种序列的混合.流式细胞技术检测证实K0红细胞上无Kell抗原的表达,其余个体的红细胞均有Kell抗原的强表达,但其白细胞上有不同程度Kell抗原的弱表达或无表达.结论 KEL基因在不同细胞中存在不同的转录本,可能导致Kell抗原在红、白细胞上有表达或无或弱表达.证实了KEL基因的表达转录研究中红系mRNA比总RNA更可靠.