武汉地区支气管哮喘患儿过敏原特异性IgE分析

目的：探讨武汉地区支气管哮喘儿童特异性过敏原分布及规律。方法：应用德国欧蒙公司生产过敏原特异性IgE检测试剂盒（中国组合）,采用免疫印迹法对216例武汉地区支气管哮喘儿童进行吸入性和食入性过敏原的血清学检测;并按年龄分为婴幼儿组（52例）和儿童组（164例）。对各组过敏原状况进行分析比较。结果：216例患儿中吸入性过敏原呈阳性162例（75％）。其中尘螨152例（70．3％）最高,屋尘89例（41．2％）、真菌组合78例（36．1％）分列其后;儿童组对吸入性过敏原及3种常见吸入性过敏原的阳性率比婴幼儿组高（P〈0．05）。食入性过敏原呈阳性52例（24％）,以虾蟹34例（15．7％）、海鱼26例（12％）、淡水鱼18例（8．3％）分居前3。不同年龄组阳性率差异无统计学意义。结论：过敏是哮喘发病重要因素,引起武汉地区儿童支气管哮喘的过敏原以吸入性过敏原为主并且阳性率随年龄增长而升高;尘螨是最重要的过敏原,食物性过敏原对哮喘的影响亦需重视。     

Exercise training attenuated chronic cigarette smoking-induced up-regulation of FIZZ1/RELMα in lung of rats

FIZZ/RELM is a new gene family named "found in inflammatory zone" (FIZZ) or "re- sistin-like molecule" (RELM). FIZZ1/RELMα is specifically expressed in lung tissue and associated with pulmonary inflammation. Chronic cigarette smoking up-regulates FIZZ1/RELMα expression in rat lung tissues, the mechanism of which is related to cigarette smoking-induced airway hyperresponsive- ness. To investigate the effect of exercise training on chronic cigarette smoking-induced airway hyper- responsiveness and up-regulation of FIZZ1/RELMα, rat chronic cigarette smoking model was estab- lished. The rats were treated with regular exercise training and their airway responsiveness was meas- ured. Hematoxylin and eosin (HE) staining, immunohistochemistry and in situ hybridization of lung tissues were performed to detect the expression of FIZZ1/RELMα. Results revealed that proper exercise training decreased airway hyperresponsiveness and pulmonary inflammation in rat chronic cigarette smoking model. Cigarette smoking increased the mRNA and protein levels of FIZZ1/RELMα, which were reversed by the proper exercise. It is concluded that proper exercise training prevents up-regulation of FIZZ1/RELMα induced by cigarette smoking, which may be involved in the mechanism of proper exercise training modulating airway hyperresponsiveness.     

湖北汉族人群Tim-3基因启动子及编码区的分子突变

目的：检测湖北汉族人群Tim-3基因启动子区和编码区的单核苷酸多态性，寻找Tim-3基因的遗传标记。方法：采用分段扩增直接测序的方法检测60名湖北汉族人Tim-3基因的启动子区、全部的外显子区及部分内含子区，将测序结果与NCBI及HapMap计划库中其他人种的数据进行对比，确定湖北汉族人群Tim-3基因突变的位置、类型和频率。结果：在Tim-3基因启动子区和外显子区共发现9个SNPs，包含5个已报道的SNPs和4个新发现的突变位点。湖北汉族人群中检出的4个SNPsrs4704853、rs10515746、rs4704846、rs9313439与Ft本人分布相似（P〉0．05），与欧洲人及非洲人的分布则有统计学意义（P〈0．01）。结论：湖北汉族人群Tim-3基因的SNPs分布有别于其他人种，可为在汉族人群中研究Tim-3基因与疾病关联提供依据。     

重组质粒pcDNA3.1/C-sis对大鼠FHF的影响

目的 探讨重组质粒peDNA3.1/C-sis导入大鼠对暴发性肝功能衰竭(FHF)的影响.方法 利用流体力学的方法将重组质粒pcDNA3.1/C-sis导入大鼠肝脏,48 h后用内毒素(LPS)+D-半乳糖胺(D-GalN)诱导大鼠FHF;利用荧光定量PCR及蛋白质印迹法(Western blotting)检测C-sis表达;利用苏木精-伊红(HE)染色及测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性检测凋亡;利用Western Blotting检测Bcl-2和Bax的表达变化;计算大鼠24 h观察期内的死亡率.结果 FHF+C-sis质粒组的C-sis mRNA和蛋白表达水平较正常对照组和FHF+空载质粒组明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组相比,FHF+林格液注射组和FHF+空载质粒组肝脏细胞凋亡增多;与FHF+空载质粒组相比,FHF+C-sis质粒组肝脏细胞凋亡减少.与正常对照组相比,FHF+林格液注射组大鼠肝脏组织中Caspase-3的表达增多(P＜0.01);与FHF+空载质粒组相比,FHF+C-sis质粒组大鼠肝脏组织中Caspase-3的表达减少(P＜0.05).与正常对照组相比,FHF+林格液注射组大鼠肝脏组织中Bcl-2表达明显减少(P＜0.01),Bax表达明显增多(P＜0.01);而与FHF+空载质粒组相比,FHF+C-sis质粒组大鼠肝脏组织中Bcl-2表达增多(P＜0.05),Bax表达减少(P＜0.05).在24 h观察期内,正常对照组大鼠均存活,FHF+林格液注射组及FHF+空载质粒组大鼠死亡率分别为70.0％和80.0％;而FHF+C-sis质粒组大鼠仅2o.0％死亡.结论 C-sis基因可减弱LPS+ D-GalN诱导的大鼠FHF.     

哮喘患者外周血单个核细胞TIM-3及Galectin-9的表达与临床意义

目的 探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM-3)和半乳糖凝集素-9(Galectin-9)基因在急性发作期哮喘患者外周血单个核细胞的表达及临床意义。方法 收集2014年1月～10月门诊急性发作期哮喘患者60例(排除不符合者15例,确定入选45例)及30例健康体检者(对照组),以实时定量RT-PCR法分别对哮喘患者及体检者外周血单个核细胞(PBMCs)中的TIM-3,Galectin-9和IFN-γ的表达情况进行同步测定,初步探讨TIM-3,Galectin-9在哮喘发病中的潜在作用。结果 急性发作期哮喘患者PBMCs中TIM-3,Galectin-9及IFN-γ mRNA水平均分别高于健康对照组(U=458.5,P=0.019; U=437.5,P=0.010; U=260,P<0.001),二者间的差异均有统计学意义。结论 TIM-3/Galectin-9可能参与了哮喘的发生、发展,TIM-3或(和)Galectin-9有可能为治疗哮喘提供一个新的靶点。     

顺铂对HeLa细胞6-磷酸葡萄糖脱氢酶表达和活性的影响

目的：探讨化疗药物顺铂在体外对HeLa细胞6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)mRNA表达和活性的影响。 方法:5 mg/L顺铂作用于HeLa细胞一段时间后，MTT法检测细胞的生长抑制情况。Beutler改良法测定胞内还原型谷胱甘肽的含量，速率法测定G6PD活性，采用实时荧光定量RT-PCR观察G6PD mRNA的表达水平。结果:顺铂在体外能明显抑制HeLa细胞的生长。顺铂作用4 h和24 h后，G6PD mRNA的表达水平增强，且G6PD活性高于未加药对照组（P＜0.05）。4 h实验组GSH含量低于对照组。结论:顺铂能诱导HeLa细胞G6PD mRNA表达增加，G6PD活性增强。     

基于家系的Tim-3基因多态性与儿童变应性哮喘的关联研究

目的 以家系资料为基础,利用遗传不平衡原理探讨染色体5q33.2区Tim-3基因启动子两个多态性位点rs10053538和rs10515746与中国湖北地区汉族儿童变应性哮喘的关系.方法 应用限制性片段长度多态性技术结合测序方法,分析了118个儿童变应性哮喘核心家系Tim-3基因rs10053538和rs10515746的基因型;采用基于家系的关联分析方法,包括单体型相对风险分析(HRR)和传递不平衡检验(TDT),分析基因分型数据;应用Transmit软件构建单体型并进行单体型关联分析.结果 118个核心家庭HRR分析显示Tim-3基因启动子区两个多态性位点rs10053538和rs10515746不使病人具有更高的发病风险(X2=2.430,P>0.05;x2=1.368,P>0.05).118个满足经典TDT分析的核心家庭中,杂合子父母传递给患病子代的等位基因频率不比预期值高(x2=2.042,P>O.05;x2=0.750,P>O.05).Transmit双位点单体型分析也未见父母传递给子女各个单体型的观察值和期望值有明显差异(P>O.05).结论 中国湖北地区汉族人群中,Tim-3基因启动子区两个多态性位点rs10053538和rs10515746与儿童变应性哮喘不具有相关性.     

Distribution Characteristics and Linkage Disequilibrium of TIM4 Promoter Polymorphisms in Asthma Patients of Chinese Han Population

To investigate the distribution characteristics and linkage disequilibrium of T cell immunoglobulin domain and mucin domain protein 4 （TIM4） promoter polymorphisms in asthma patients of Chinese Han population, the promoter region of TIM4 was re-sequenced by PCR-sequencing, and linkage disequilibrium was analyzed by SHEsis software. Four single nucleotide polymor- phisms （SNPs） in the promoter region of TIM4 were detected, including two new SNPs （at positions -1609, -153） and two reported SNPs （rs6874202, rs6882076）. The frequency distribution of rs6882076 was different among different races （P〈0.05）. In addition, linkage disequilibrium among the SNPs of the promoter region of TIM4 was found and GGTG was the predominant haplotype. There were four SNPs in the promoter region of TIM4 in asthma patients of Chinese Han population, which were in linkage disequilibrium.     

异常淋巴细胞与转氨酶的联合检测诊断传染性单核细胞增多症

传染性单核细胞增多症（IM）是EB病毒所致的机体淋巴细胞反应性增生的急性传染性疾病，是引起儿童长期发热的主要病因。IM虽然属于良性自限性疾病，但有时会出现一些致死性的并发症，例如肝功能衰竭、脾破裂、呼吸道阻塞、持续性感染等。由于IM的确诊性试验（抗-EBV抗体的检测或EB病毒病原学诊断）多在省级以上医院开展，加之本病临床表现呈多样化，所以临床上易造成误诊及漏诊。异常淋巴细胞（简称异淋）与转氨酶的联合检测诊断IM简单易行，对IM的早期诊断具有重要意义。