罗格列酮对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究罗格列酮对高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）生长的影响，从而探讨其对糖尿病血管并发症的作用及机制。方法利用组织贴块法体外培养SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞并分组给药，采用MTT比色法检测细胞生长活性；用Western blotting检测细胞增殖核抗原的表达；以流式细胞仪检测细胞周期的进程；RT—PCR检测MMP-2mRNA的水平。结果罗格列酮呈浓度依赖性抑制高糖诱导的大鼠VSMC的增殖；降低PCNA的表达（P〈0．05），明显降低细胞的S期数目百分比（P〈0．01），增加G0／G1期数目百分比（P〈0．01）；明显降低MMP-2mRNA（P〈0．01）的表达。结论从细胞分子水平说明罗格列酮可能通过降低PCNA的表达，阻止细胞进入S期，减少有丝分裂来发挥对高糖诱导的VSMC增殖的抑制作用，MMP-2在罗格列酮改善血管重构的过程中可能发挥了重要的作用。     

17-β雌二醇抑制去卵巢大鼠实验性胰岛素抵抗的形成

目的观察17-β雌二醇对果糖诱导的去卵巢大鼠胰岛素抵抗的影响。方法36只雌性大鼠卵巢切除后用高果糖饲料喂养8周,诱导胰岛素抵抗产生,然后随机分为模型组、雌激素替代组和溶媒对照组,另设立正常对照组大鼠12只,用普通饲料喂养8周。检测各组大鼠的体重、动脉收缩压、血脂、血清雌二醇、糖耐量、空腹血糖和空腹血清胰岛素水平,并计算胰岛素敏感指数。结果与正常对照组相比,模型组大鼠体重增加(P<0.05),收缩压升高(P<0.05),血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和空腹血糖均升高(均P<0.05),空腹血清胰岛素水平升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇降低(P<0.05),胰岛素敏感指数降低(P<0.05),产生了胰岛素抵抗,葡萄糖耐量减低(P<0.05),胰岛β细胞受损;17-β雌二醇替代组逆转上述变化,胰岛素敏感指数增加(P<0.05),抑制胰岛素抵抗的产生。结论17-β雌二醇能够抑制高果糖饮食诱导的去卵巢大鼠胰岛素抵抗的产生、胰岛β细胞的损伤和血脂的异常,这说明雌性大鼠体内的雌二醇可能是其在高果糖诱导胰岛素抵抗的过程中受到保护的决定因素。     

手术型高血压大鼠模型肾脏血管紧张素转换酶、血管紧张素转换酶2表达变化的研究

目的建立手术型高血压大鼠模型,观察肾脏血管紧张素转换酶(ACE)、ACE2mRNA及蛋白在各组中的表达变化情况,进一步探讨高血压发病的变化因素和相关治疗机制。方法 28只SD大鼠,随机分为对照组(n=7)、高血压组(n=7)、依那普利组(n=7,10mg·kg-1·d-1)及氯沙坦组(n=7,15mg·kg-1·d-1),其中除对照组外的21只大鼠通过不完全结扎肾动脉(保留0.7mm的动脉口径)制成高血压模型。使用RT-PCR的方法检测肾脏ACE及ACE2mRNA表达变化情况,使用免疫组织化学的方法检测肾脏ACE及ACE2蛋白表达变化情况。结果术后大鼠血压升高,造模成功;各组之间ACE、ACE2mRNA及蛋白表达程度不同;高血压组ACE表达强于其他各组(IOD=0.592,P<0.05),氯沙坦组ACE2表达强于其他各组(IOD=0.760,P<0.05);高血压组ACE与ACE2表达比例明显失衡(P<0.05),对照组、依那普利组及氯沙坦组ACE与ACE2表达比例较为平衡(P>0.05)。结论结扎肾动脉造模成功,ACE、ACE2表达的失衡是高血压发病的重要影响因素,调整两者表达的平衡是重要的治疗机制。     

硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系与高血压

内源性硫化氢(H2S)是继一氧化氮和一氧化碳之后发现的第三种气体信号分子,与胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)作为一个整体在高血压调节中发挥着重要的作用.它通过直接作用于KATP通道、减少细胞外Ca2+的内流及促进内皮细胞释放内皮超极化因子、与一氧化氮协同作用等方式来舒张血管平滑肌,改善血管舒张功能;同时,还可抑制血管平滑肌细胞增殖,促进其凋亡,改善血管重构.因此,深入研究H2S/CSE体系在高血压调节中的作用,具有重要的理论和临床意义.     

胰岛素抵抗大鼠主动脉内皮功能的机制探讨

目的 探讨胰岛素抵抗(insulin resistant，IR)大鼠主动脉内皮功能的变化及其机制。方法 SD大鼠高果糖(high fructose，HF)饲养8周制备IR模型，采用血管环灌流实验观察血管收缩和舒张功能的变化，同时测定主动脉一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase，NOS)的活性和血清一氧化氮(nitric oxide，NO)的含量。结果 (1)高果糖组离体主动脉对乙酰胆碱(acetylcholine，Ach)的舒张反应明显减弱，对新福林(L-Phenylephrine，PE)的收缩反应明显增强。(2)两组大鼠离体主动脉对硝普钠(sodium nitropmsside，SNP)的舒张反应差异无显著性。(3)高果糖组主动脉：NOS活性明显降低，尤以组织型一氧化氮合酶(constitutive nitric oxide synthase，cNOS)下降明显，同时血清NO显著降低。结论 胰岛素抵抗大鼠主动脉内皮功能异常，其可能机制一方面与cNOs的活性降低、NO释放减少有关，另一方面与高胰岛素血症有关。     

硫化氢／胱硫醚-γ-裂解酶体系与高血压

内源性硫化氢（H2S）是继一氧化氮和一氧化碳之后发现的第三种气体信号分子，与胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）作为一个整体在高血压调节中发挥着重要的作用。它通过直接作用于KATp通道、减少细胞外Ca^2＋的内流及促进内皮细胞释放内皮超极化因子、与一氧化氮协同作用等方式来舒张血管平滑肌，改善血管舒张功能；同时，还可抑制血管平滑肌细胞增殖，促进其凋亡，改善血管重构。因此，深入研究H2S／CSE体系在高血压调节中的作用，具有重要的理论和临床意义。     

罗格列酮对果糖饲养大鼠内皮细胞功能的影响

目的探讨高果糖饲养的SD大鼠机体内皮细胞内分泌功能的变化及其与机体氧自由基代谢之间的关系,以及罗格列酮对它的影响.方法 高果糖饲养SD大鼠4周,随机分为2组高果糖组继续喂养高果糖饲料4周;高果糖罗格列酮处理组喂高果糖和罗格列酮[5 mg/(kg·d),溶于饮水中]4周;8周后大鼠麻醉心脏取空腹血测定血清一氧化氮(nitric oxide,NO)、血浆内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)及主动脉一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性的变化.结果 ①高果糖组ET-1、MDA高于对照组;NO、SOD、NOS活性显著低于对照组.用罗格列酮处理后能显著降低ET-1和MDA,提高NO、SOD和NOS活性水平.②血浆ET的含量与血清SOD含量呈负相关、与血清MDA呈显著正相关;血清NO含量与血清SOD含量呈显著正相关,与血清MDA呈显著负相关.结论罗格列酮可提高高果糖饲养的大鼠主动脉NOS活性和机体的抗自由基能力,同时对内皮细胞具有保护作用.     

前蛋白转化酶枯草溶菌素9参与动脉粥样硬化的研究进展

<正>动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性脂蛋白代谢障碍性血管的炎性疾病,会引起缺血性心脑血管事件发生~([1])。AS的病理过程包括血管内皮细胞膜的损伤及渗透能力的改变,血管平滑肌细胞内膜迁移和增殖,巨噬细胞为主的炎性反应和泡沫细胞的积聚等~([2])。遗传和环境因素相互作用是导致AS发生和发展的关键。其中遗传方面主要包括基因突变、AS家族史等;环境方面主要是人类生活方式的     

7，8-二羟基黄酮对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的探讨7,8-二羟基黄酮(7,8-DHF)对自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响。 方法用Western blotting法检测清洁级雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠及SHR胸主动脉和VSMCs中平滑肌肌动蛋白(SM-α-actin)及增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达水平;用不同浓度7,8-DHF和(或)TrkB特异性抑制剂ANA-12处理SHR胸主动脉源性VSMCs,用CCK-8法检测VSMCs活性;用Western blotting法检测7,8-DHF和(或)ANA-12处理SHR胸主动脉源性VSMCs后SM-α-actin和PCNA的蛋白表达水平。使用Prism 5统计软件,应用独立样本t检验或单因素方差分析进行统计学分析。 结果同WKY大鼠比较,SHR胸主动脉组织中SM-α-actin的蛋白表达水平显著降低[(0.72±0.06),(0.41±0.08);t＝6.35,P<0.05],PCNA的蛋白表达水平则明显升高[(0.51±0.09),(0.99±0.15);t＝6.43,P<0.05]。SHR胸主动脉源性VSMCs中SM-α-actin的蛋白表达水平较WKY大鼠显著降低[(0.71±0.05),(0.36±0.04);t＝11.12,P<0.01], PCNA的蛋白表达水平则明显升高[(0.69±0.07),(1.05±0.08);t＝8.49,P<0.05]。7,8-DHF能明显抑制SHR胸主动脉源性VSMCs增殖活性,并呈浓度依赖性(F＝17.49,P<0.01),给予ANA-12(10μmol/L)处理后,SHR胸主动脉源性VSMCs的增殖活性较单独给予7,8-DHF组显著升高[(0.52±0.08),(0.86±0.14);t＝5.13,P<0.01];ANA-12能够显著消除7,8-DHF引起的SHR胸主动脉源性VSMCs中SM-α-actin蛋白表达水平的升高[(0.85±0.13),(0.35±0.15);t＝4.37,P<0.01]及PCNA蛋白表达水平的降低[(0.42±0.13),(0.76±0.10);t＝3.54,P<0.05]。 结论7,8-DHF能够有效抑制SHR胸主动脉源性VSMCs由收缩型向增殖型转化,其作用可能是由TrkB受体介导。     

17-β-雌二醇抑制去卵巢胰岛素抵抗大鼠血管重构的发生

目的 观察17-β-雌二醇对高果糖诱导的去卵巢胰岛素抵抗大鼠血管重构的影响. 方法 将48只成年雌性SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为正常对照组、模型组、17-β-雌二醇替代组、溶媒对照组,每组12只.正常对照组大鼠普通饲料喂养8周;模型组大鼠卵巢切除后,高果糖饲料喂养8周诱导胰岛素抵抗的产生;17-β-雌二醇替代组大鼠卵巢切除后,高果糖饲料喂养同时给予17-β-雌二醇(30 μg/kg体重)每天皮下注射;溶煤对照组大鼠卵巢切除后高果糖饲料喂养8周,同时每天给予30 μL/kg体重的无水乙醇皮下注射.实验8周末检测各组大鼠收缩压、血清雌二醇,空腹血糖和血清胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数.大鼠放血处死后甲醛固定主动脉和肠系膜小动脉,石蜡包埋,切片,HE染色,病理图像分析系统测量主动脉和肠系膜小动脉重构的指标:内径、中膜、中膜/内径、中膜横截面积. 结果 与正常对照组相比,模型组大鼠收缩压、空腹血糖和血清胰岛素显著性升高,胰岛素敏感指数显著性降低,肠系膜小动脉内径减小,中膜和中膜/内径比值增加,而主动脉未见明显改变;17-β-雌二醇替代逆转上述改变. 结论 17-β-雌二醇能抑制高果糖诱导的去卵巢大鼠胰岛素抵抗和肠系膜小动脉重构的产生.