HBV 基因T1862突变真核表达载体的构建及在Cos7细胞中的表达

目的研究HBV T1862变异的生物学意义。方法采用分子生物学方法,构建HBV前C/C基因EB病毒真核表达载体,利用体外定点突变技术诱导前C/C基因T1862变异,经PCR-RFLP初筛并经测序终鉴定出阳性克隆后,以脂质体介导方法将突变前后的重组质粒转染Cos7细胞, 以ELISA 检测HBeAg的表达量。结果未突变的重组质粒可稳定表达HBeAg,突变后的重组质粒未能检测到HBeAg表达。结论 HBV前C/C基因1862点突变的真核表达载体的构建,为体外研究该点突变引起HBV的一系列生物学改变奠定基础。     

乙型肝炎患者血清中白细胞介素6、12 水平的检测及其临床意义

目的探讨白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素12(IL-12)在乙型病毒性肝炎免疫发病机制中的意义.方法利用双抗体夹心-酶联免疫吸附实验(ELISA)检测慢性乙型肝炎、急性乙型肝炎、重型乙型肝炎患者及正常对照组血清中IL-6、IL-12水平.结果慢性乙型肝炎组IL-6、IL-12值分别为(199.7±26.9)、(24.6±13.4)pg/m1;急性乙型肝炎组分别为(129.5±22.8)、(135.3±60.8)pg/ml;重型乙型肝炎组分别为(286.1±56.7)、(19.7±9.0)pg/m1;正常对照组分别为(56.4±12.9)、(34.7±11.8)pg/ml.结论IL-6的变化与乙型肝炎肝细胞损害程度密切相关,而IL-12则在机体的抗病毒免疫应答中起重要作用,其值升高可能预示肝病向良好转归发展.     

卵巢癌抗原-125的测定对卵巢癌早期诊断及预后监测的临床意义

目的 探讨卵巢癌抗原-125（CA125）的测定对卵巢癌的诊断及预后的临床价值。方法 采用ELISA法测定124例患者治疗前后的血清CA125（卵巢癌19例、子宫肌瘤34例、卵巢良性畸胎瘤29例及其它妇科疾病42例）。结果 卵巢癌阳性率94.7%（18/19）,子宫肌瘤、卵巢良性畸胎瘤及其它妇科疾病的阳性率分别为17.6%(6/34)、24%（7/29）和14.35%（6/42）。19例卵巢癌患者经化疗或手术治疗后有14例血清CA125含量显著下降,其余良性妇科疾病经治疗后虽然有不同程度的降低,但降低幅度不大。 结论 血清CA125测定对卵巢癌的诊断及预后有较高的临床价值。     

HBV基因型与慢性乙型肝炎疾病谱的关系

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基因型与慢性乙型肝炎疾病谱相关性。方法　用S基因聚合酶链式反应 -限制片段长度多态性 (PCR -RFLP)的基因型分型方法对广东地区HBV感染者中无症状携带者 (AsC)组 80例和肝硬化组 (LC) 12 0例血清标本分型 ,比较两组基因型分布的异同。结果　基因型在AsC组分布 :B型 45 0 % ( 3 7/ 80 ) ;C型 3 3 75 % ( 2 6/ 80 ) ;D基因型 2 1 2 5 % ( 17/80 ) ;LC组HBV基因型分布B型 3 2 5 % ( 3 9/ 12 0 ) ;C型 65 8% ( 79/ 12 0 ) ;D基因型 1 6% ( 2 / 12 0 )。广州地区未发现A、E和F基因型 ,基因型在两组中的分布均与e抗原状态无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;ASC与LC组两组间基因型的分布有显著性差异 ( χ2 =3 1 92 4,P=0 0 0 0 )。结论　可初步认为广东地区HBV感染者以B和C型为优势基因型 ,AsC组中以B型为优势基因型 ,感染HBVD基因型病情轻 ,感染HBVC基因型病情更易于加重。     

简并PCR技术在肠道病毒血清型鉴定中的应用

目的 探讨共有序列简并杂合寡核苷酸引物PCR（CODEHOP-PCR）在肠道病毒血清型鉴定中的临床应用价值。方法 以CODEHOP-PCR检测经实时荧光RT-PCR鉴定为EV71和CA16 手足口病患者的临床样本和病毒分离培养细胞上清的肠道病毒VP1基因片段，经琼脂糖凝胶电泳并回收、测序，与Genbank提供的序列比较，确定肠道病毒的血清型。结果 CODEHOP-PCR后的序列分析表明，所有的EV71毒株和CA16毒株与近几年国内报道的部分毒株同源性在96%以上，其血清分型结果验证了实时荧光RT-PCR分型结果的准确性。结论 CODEHOP-PCR合并测序用于肠道病毒血清型的准确鉴定，与传统的病毒分离及血清中和试验相比，具有更快速、准确的优点。     

乙型肝炎病毒基因前C区热点变异及其意义

乙型肝炎病毒（HBV）基因组变异在病毒感染过程中扮演着非常重要的角色，曾经一度成为肝为研究的一个热点，其中前C区热眯变异是变异研究的重点，本文就HBV前C区基因的结构功能，热点变异发生的可能,机理与临床的关系等有关研究情况作一简述。     

HBV X蛋白在细胞信号转导中的作用

乙型肝炎病毒 (HBV) X蛋白 (HBx)是 HBV4个开放读框 (ORF)中的 x- ORF编码的一种病毒蛋白 ,为 1 5 4个氨基酸的多肽 ,分子量为 1 7k D。 HBx是一种多功能蛋白 ,虽然HBx发挥其多种功能的机制多数还不是很明确 ,但其对HBV在宿主肝细胞中的复制和诱导细胞的转录、增生以及与肝细胞癌的发生、发展关系非常密切 〔1〕。同时 HBx作为一种转式激活因子 ,在多种顺式作用元件的控制下 ,激活许多病毒和细胞启动子〔2〕,这一点已为多数人所接受。现已明确HBx并不与双链 DNA直接结合 ,其引起的诸多功能均是通过蛋白与蛋白的相互作用实现的。…     

乙型肝炎病毒前C区变异对HepG2细胞HLA-I表达的影响

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）前 C区热点变异对宿主细胞HLA—I分子表达的影响。方法 构建HBV前C区野毒株及A83、A83/A86变异株真核表达质粒,转染HePG2细胞,鉴定目的基因在宿主细胞中的生物活性,流式细胞术检测HLA—I分子的表达。结果 PCR和 ELISA法分析能检测到目的DNA片段和HBeAg,转染细胞表达HLA—I分子的平均荧光强度不同,野毒株为1.3,前C区变异后平均荧光强度增加,尤以A83变异表达增强显著（17.6）,A83/A86为7.3。结论 前C区热点变异后宿主细胞HLA—I分子的表达为上调。     

细菌检测方法研究进展

传统上,细菌的检测方法先将标本进行培养,分纯,配制成一定浊度的细菌浓度,再进行各种不同生化反应,最后综合所获得的生化结果实现对细菌的鉴定。该方法影响因素多、操作繁杂、仪器设备要求高、检测周期长、对技术人员专业技能要求高,甚至因个别细菌生长的特殊要求而无法得到鉴定结果。目前,特异酶的使用、质谱技术的应用和生物传感器等新型技术的应用,使得细菌的检测方法在鉴定技术、免疫技术以及分子生物学方面也取得了新的进步,进而大幅缩短细菌鉴定周期,实现了无需分纯即可鉴定细菌和实现了高通量检测细菌。