靶向乳酸脱氢酶A(LDHA)对T细胞急性淋巴细胞白血病具有抗白血病作用

背景与目的T细胞急性淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)中少见且具侵袭性的一种亚型。在T-ALL患者的血清中,乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的活性增高。我们推测靶向LDHA可以作为改善T-ALL患者预后的一个潜在治疗策略。本研究旨在研究LDHA靶向治疗对T-ALL的抗白血病作用及其潜在的分子机制。方法用LDH抑制剂草氨酸盐处理原代T-ALL细胞系Jurkat和DU528。采用MTT、克隆形成、凋亡及细胞周期检测分析草氨酸盐对T-ALL细胞的作用。采用定量实时PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting检测相关的信号通路。采用活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测分析草氨酸盐处理后的T-ALL细胞中的ROS产量。用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了LDHA基因敲减的T-ALL转基因斑马鱼模型,采用TUNEL、Western blotting及T-ALL肿瘤进展检测分析LDHA基因敲减对T-ALL转基因斑马鱼模型的影响。结果草氨酸盐显著抑制了Jurkat和DU528的细胞增殖,诱导了细胞凋亡,同时也引起了Jurkat和DU528细胞周期G0/G1期阻滞,刺激了ROS的生成(P<0.001)。阻断LDHA显著减低了c-Myc基因及蛋白的表达,也降低了磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3′-kinase,PI3K)信号通路上的磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phos-phorylated serine/threonine kinase,AKT)和糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3 beta,GSK-3β)的表达。在T-ALL转基因斑马鱼中,LDHA基因敲减减缓了疾病进展,下调了c-Myc的mRNA和蛋白表达。结论靶向LDHA对T-ALL表现出抗白血病的作用,可作为一种对T-ALL的潜在的治疗策略。     

磷硅酸钠钙对乳牙釉质再矿化作用的研究

目的：研究生物活性材料磷硅酸钠钙（CSP）对人工脱矿的乳牙釉质表面再矿化的作用。方法：收集30颗健康离体乳磨牙,将每颗牙冠沿近远中径和颊舌径分成4个釉质块,每个釉质块随机分为4组（n ＝30）。样本经35％磷酸酸蚀2 min后分别进行如下处理：空白对照（A 组）、0．14％氟化物处理（B 组）、CSP 处理（C 组）、氟化物＋CSP 处理（D 组）,每天循环处理2次。在10、30 d 时扫描电镜观察釉质表面形态并测定釉质表面显微硬度值（SMH）。结果：扫描电镜观察显示,10 d 时A 组表面呈脱矿的蜂窝状表现,B、C 组脱矿不明显,D 组可见明显的矿化物沉积。30 d 时 A 组可见明显釉质脱矿和釉柱溶解表现,B、C 和 D 组可见程度不等的再矿化。10 d 时 D 组的 SMH 值高于 A 组（P ＜0．05）,30 d 时 B、C、D 组 SMH 值均高于 A组（P ＜0．05）,D 组 SMH 值显著高于 B 和 C 组（P ＜0．05）。结论：CSP 和氟化物具有促进乳牙釉质再矿化的作用,CSP 和氟化物联合应用优于二者的单独应用。     

柴胡注射液细菌内毒素检查法的探讨

目的：建立柴胡注射液细菌内毒素检查法。方法：依据《中国药典》2010年版附录中细菌内毒素检查法,通过预干扰和干扰试验确定样品最大无干扰浓度,并进行方法学验证。结果：将柴胡注射液稀释200倍,对细菌内毒素检查法无干扰作用。结论：建立的方法用于检查柴胡注射液的细菌内毒素可行。     

达比加群酯联合替格瑞洛对老年心房颤动合并不稳定型心绞痛患者的有效性及安全性研究

目的　观察达比加群酯联合替格瑞洛对老年心房颤动合并不稳定型心绞痛患者的有效性及安全性。方法　选取2015年2月—2017年2月天津医科大学第四中心临床学院收治的100例老年心房颤动合并不稳定型心绞痛患者。将100例老年心房颤动合并不稳定型心绞痛患者随机分为达比加群酯组和华法林组,每组50例。华法林组：在常规治疗基础上加用华法林、替格瑞洛口服。调整华法林剂量维持国际标准化比值（INR）为2.0~3.0。达比加群酯组：在常规治疗基础上加用达比加群酯、替格瑞洛口服。达比加群酯110 mg,2次/d;替格瑞洛90 mg,2次/d。两组均随访1年。分别于治疗前、治疗1、3、12个月测定凝血指标,记录出血事件及心血管不良事件。结果　两组凝血酶原时间（PT）、INR、凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（Fib）、D-二聚体比较,差异有统计学意义（P<0.05）;不同时间点PT、INR、TT、APTT比较,差异有统计学意义（P<0.05）;不同时间点Fib、D-二聚体比较,差异无统计学意义（P>0.05）;组别和时间在PT、INR、TT上存在交互作用（P<0.05）。治疗前,两组PT、INR、TT、APTT、Fib、D-二聚体比较,差异无统计学意义（P>0.05）;治疗1、3、12个月时,达比加群酯组PT、INR、TT、APTT低于华法林组,Fib、D-二聚体高于华法林组,差异有统计学意义（P<0.05）。随访12个月两组患者心血管事件发生率比较,差异无统计学意义〔4.0%（2/50）比6.0%（3/50）;χ2<0.001,P=0.999〕。两组患者均未出现严重出血事件。达比加群酯组出血事件总发生率低于华法林组,差异有统计学意义（χ2=4.955,P=0.026）。结论　对于老年心房颤动合并不稳定型心绞痛患者应用达比加群酯联合替格瑞洛能有效预防血栓事件,且与华法林相比具有较低的出血发生率,表明其具有良好的安全性。     

湖南省慢性淋巴细胞白血病的流行病学调查：基于湖南省恶性肿瘤病例登记报告系统的测算

目的:了解湖南省慢性淋巴细胞白血病(CLL)分布规律及流行病学特征。方法:按照国家肿瘤登记中心指定的审核方法和评价标准,共纳入24个肿瘤登记处上报的慢性淋巴细胞白血病登记数据。通过回顾性分析的研究方法,将入选的登记处数据按照年份、行政分区、城乡、性别、年龄分别计算发病率和死亡率并进行分析。结果:湖南省2014年—201...     

慢性淋巴细胞白血病503例临床及实验室特征回顾性分析

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者的临床及主要实验室特征.方法 回顾性分析1998年10月至2015年2月收治的503例CLL患者的临床及实验室检查资料,应用χ2检验进行差异性检验,并利用Log-rank法检验各组患者生存率的差异.结果 503例CLL患者中位年龄58岁(26~86岁),男性335例,女性168例.初诊时临床分期以Binet A期为主,为204例(40.5%),其次为Binet B期和C期,分别为148例(30.1%)和151例(29.3%).初诊时108例(21.1%)患者存在贫血(血红蛋白<100 g/L);427例进行血清乳酸脱氢酶检测的患者中,有113例(26.5%)升高;344例进行CD38检测的患者中有100例(29.1%)表达阳性.330例具有完整荧光原位杂交(FISH)资料的患者中,156例(47.3%)伴13q缺失(13q-),为检出率最高的细胞遗传学异常;其次为IgH易位(22.4%),12号染色体三体(+12,21.2%)和17p缺失(17p-,14.5%).在230例进行免疫球蛋白重链可变区(IGHV)突变状态检测的患者中,165例(71.7%)IGHV为突变状态,表达V4-34基因的患者比例最高,占12.4%(28例).中位无进展生存(PFS)时间为89.0个月(95%CI 75.0~103.0个月),中位总生存(OS)时间为129.0个月(95%CI 106.9~151.1个月).结论与欧美国家的CLL患者相比,本组CLL患者发病年龄偏低,总体生存期较长,一定程度上反映了我国CLL患者的特点.     

Carisolv去龋对牙本质黏结强度影响的实验研究

目的：研究Carisolv去龋对牙本质黏结强度的影响：方法：选择30颗新鲜拔除的[牙合]面中度龋损的第三磨牙，每个牙的龋洞分成两半，一半用Carisolv去龋，另一半用慢速球钻去龋，而后随机分成3组，分别使用Prime＆Bond NT＋Dyract AP复合体黏结；Uni—Etch（320ml／L磷酸）＋One—Step Plus＋Renew树脂黏结：Prompt—L—Pop＋Z100树脂黏结。测试微抗拉强度（MTBS）：结果：Cafisolv组3种黏结系统MTBS分别为：（17．22±7．95）MPa、（25．40±8．44）MPa、（17．66±8．33）MPa，车针组分别为：（16．01±7．43）MPa、（23.45±7．55）MPa、（16.26±7.97）MPa：2种去龋方法间差异无显著性。结论：Carisolv去龋法对以上3种黏结系统与牙本质的黏结强度无不利影响：     

化学机械去龋对牙本质粘结效果的电镜观察

目的扫描电镜观察化学机械去龋对牙本质粘结效果的影响。方法观察比较化学机械去龋和慢速球钻去龋后牙本质表面以及牙本质和4种粘结系统粘结界面的超微结构。结果与球钻去龋相比，化学机械去龋后的牙本质表面玷污层少，牙本质和Prime＆Bond　NT（PB）＋复合体的粘结界面出现树脂突结构，和Adper　Prompt-L-Pop（AP）＋树脂的粘结界面中树脂突更密集，混合层更致密、均一。结论从超微结构上看，化学机械去龋技术有利于牙本质的粘结。     

Carisolv去龋对牙本质粘结界面影响的实验研究

目的:研究Carisolv去龋对牙本质粘结界面的影响。方法:24颗新鲜拔除的中度龋损的第三磨牙,随机分成ABCD4组。每个牙的龋洞分成两半,一半用Carisolv去龋,另一半用涡轮车针去龋后,做如下处理:A组不处理;B组320ml/L磷酸酸蚀,扫描电镜观察牙本质表面形态;C组不酸蚀,DyractAP复合体充填;D组320ml/L磷酸酸蚀后复合树脂充填,扫描电镜观察牙本质-充填体界面。结果:A组:Carisolv去龋后牙本质表面玷污层少,大部分牙本质小管口开放,清晰可见,表面粗糙不平;涡轮车针去龋后牙本质表面覆盖较厚玷污层,牙本质小管口堵塞,很少见到开口。B组:Carisolv去龋组和涡轮车针去龋组均去除了玷污层,牙本质小管口开放,但Carisolv组牙本质小管无管塞,而涡轮车针组牙本质小管残留部分管塞。C组:观察牙本质-复合体界面见Carisolv去龋组有较多树脂突形成,深入牙本质小管及管周;而涡轮车针去龋组未见明显树脂突起形成。D组:观察牙本质-树脂界面见2组树脂突的密度和长度无明显差异,但Carisolv去龋组树脂突之间的侧枝连接较涡轮车针去龋组多见。结论:Carisolv去龋后牙本质表面玷污层少,牙本质小管口开放,表面粗糙不规则,利于粘结,尤其在使用不需酸蚀的复合体充填时优势突出。     

基于X-Charge色谱柱的HPLC法测定卡巴胂原料药含量和有关物质

目的：建立卡巴胂原料药有关物质检查和含量测定的高效液相色谱方法。方法： 色谱柱为Acchrom Xcharge C18柱,流动相为0.1%三氟乙酸溶液-0.1%三氟乙酸乙腈溶液,梯度洗脱,流量1.0ml?min-1,检测波长254nm,柱温30℃。结果：该方法的专属性、准确度、精密度、线性、范围、检测限及定量限均可满足卡巴胂原料药有关物质检查和含量测定的需要。结论：所建方法简便、准确,可用于卡巴胂原料药有关物质检查和含量测定。