Novel multi-probe RNase protection assay set for detection of endotoxin associated receptors gene expression

Objective: To construct the multi-probe ribonuclease protection assay (RPA) template set to be used for detecting expression patterns of MD-2, TLR4, CD14 mRNAs in human peripheral blood mononuclear cells. Methods : The designed cDNA fragments of the three genes were generated by polymerase chain reaction (PCR)using specific primers and directionally cloned into EcoR I and Hind III sites of expression plasmid pSP72 containing the T7/ promoter, the linearized plasmids was used as template to synthesize anti-sense RNA probes. Then we extracted total RNA from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and detected the dynamic expression patterns of the three genes with RPA method. Results: The proper sequence and orientation of the template set were confirmed by sequencing and the template set was successfully used to assay TLR4, MD-2 and CD14 mRNAs in human PBMC. The results showed that the three detected genes decreased transiently 1-3 hours after 100 ng/ml LPS stimulation. Conclusions: These new RPA multi-probe set provided valuable tool for the simultaneous quantitative determination of expression of TLR4, CD14 and MD-2 mRNAs in both constitutive and inducible types.     

前置胎盘致产后大出血患者的护理

<正>前置胎盘致产后大出血是产妇的严重并发症,直接威胁产妇生命。前置胎盘致产后出血与产妇的年龄、胎次及产次有关,经产妇高于初产妇。现将我院前置胎盘致产后大出血的护理体会报告如下。     

F一800血液分析仪对血瘀证的诊断价值

月下一８００血液分析仪，对临床确诊为血瘀证的５６例患者进行了白细胞计数（ＷＢＣ）、红细胞计数（ＲＢＣ）、血红蛋白浓度（ＨＧＢ）、血细胞压积（ＨＣＴ）、平均红细胞体积（ＭＣＶ）、平均红细胞血红蛋白量（ＭＣＨ）、平均红细胞血红蛋白进度（ＭＣＨＣ）、血小板计数（ＰＬＴ）、红细胞体积分配宽度（ＲＤＷ一ｃｖ）、血小板体积分配宽度（ＰＤＷ）及平均血小板体积（ＭＰＶ）的测定，并与６０例健康者进行了对比分析，结果表明：除ＭＣＶ、ＲＤＷ一ｃｖ、ＭＰＶ及ＰＤＷ四项指标血瘀证组与健康人组相比差异非常显著（Ｐ＜０．０１）外，其余七项指标则差异不显著（Ｐ＞０．０５）。实验表明：ＭＣＶ对血瘀证具有一定的诊断价值，其敏感性高达８５；７％，而特异性为７３．３％。四项指标的联合检测，其阳性率高达９２．７％，有助于血瘀证的筛选与诊断。     

应用磁共振波谱研究针刺对健康人前额叶神经递质影响的性别差异

目的 采用磁共振波谱MEGA-PRESS序列,观察针刺合谷穴对不同性别健康人前额叶内神经递质谷氨酸(glutamate, Glu)、谷氨酰胺(glutamine, Glx)及r-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)浓度变化的影响。方法 分别采集76例健康受试者刺激前及刺激(手针和纤毛针)合谷穴时磁共振波谱(MRS)数据,采用t检验及Pearson统计,分析刺激前后Glu﹢、Glx﹢和GABA﹢浓度变化的性别差异及相关性。结果 手针刺激前男性Glu﹢浓度明显高于女性(P<0.05),手针刺激时男性Glu﹢和Glx﹢浓度均明显高于女性(P<0.05);纤毛针刺激前男性Glx﹢浓度明显高于女性(P<0.05),纤毛针刺激时男性Glu﹢和Glx﹢浓度均明显高于女性(P<0.05);但手针和纤毛针刺激前和刺激时男性GABA﹢浓度与女性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。手针刺激前和刺激时,性别与Glu﹢及Glx﹢浓度均呈正相关(P<0.05);纤毛针刺激前和刺激时,男性与Glu﹢及Glx﹢浓度呈正相关(P<0.05);手针和...     

国产与进口盐酸西替利嗪的生物利用度测定

目的：比较国产与进口盐酸西替利嗪片剂在健康成年男性志愿者体内的药代动力学和生物利用度.方法：12例健康志愿者采用2周期随机交叉设计自身对照试验法,口服进口或国产盐酸西替利嗪片各10 mg,以反相高效液相色谱法测定血浆中药物浓度.结果：国产西替利嗪与进口西替利嗪的主要药物动力学参数为：Cmax分别为(429.00±108.80)和(469.82±113.83) ng·mL 1,Tmax分别为(0.90±0.51)和(0.91±0.40) h,以梯形法计算AUC0～36分别为(3 312.72±682.39)和(3 417.11±517.42) ng·h·mL 1.国产西替利嗪相对生物利用度(97.21±13.32)%.主要药物动力学参数经方差分析和双单侧t检验证明差异无显著性(P＞0.05).结论：国产西替利嗪与进口西替利嗪在受试者体内的药代动力学参数相似,具有生物等效性.［关键词］西替利嗪,盐酸;生物利用度;反相高效液相色谱法     

苦参素注射液的人体药动学

目的：建立测定苦参素血药浓度的HPLC法并研究苦参素注射液在健康人体内的药物动力学。方法：18名健康男性受试者，肌注300mg药物后，采用HPLC法测定血药浓度，用3p87软件经微机处理药－时数据。结果：苦参素注射液的体内过程符合二室模型。结论：此法提供了苦参素注射液在健康人体中的药动学数据。     

乳腺癌辅助化疗及激素治疗的药物不良反应

目的：了解乳腺癌辅助化疗及激素治疗的药物不良反应。方法：查阅文献进行综述。结果：辅助治疗的主要不良反应是可逆的。结论：对早期浸润性乳腺癌妇女，使用辅助治疗还是有益的。     

河南省Ⅱ型汉坦病毒基因亚型及其分布的研究

目的查明河南省Ⅱ型汉坦病毒基因亚型的分布情况。方法在河南省汉坦病毒流行严重的地区，捕捉啮齿类动物，以免疫荧光法检测阳性标本，应用汉坦病毒型特异性引物以逆转录，聚合酶链反应方法对抗原检测阳性的鼠肺标本扩增M和S基因片段上的特异核苷酸序列并测序，将扩增片段的核苷酸序列与已知病毒序列进行比较，以明确基因亚型及其地理分布情况。结果褐家鼠、黄胸鼠以及小家鼠携带的病毒均为Ⅱ型汉坦病毒。序列分析发现河南省主要疫区宿主动物问流行的Ⅱ型汉坦病毒至少存在S1、S2和S3三个亚型，其中S1和S3为河南省汉坦病毒的优势流行基因亚型。结论河南省汉坦病毒的亚型较为复杂，地理分布较广。     

不同血细胞分析系统间检测结果的偏差评估及应用

目的 分析同一临床实验室不同型号的血细胞分析仪的性能特点，并对其检测结果进行评估，对有偏差的项目进行调整，使同一实验室不同型号的血细胞分析仪的检测结果具有可比性。方法 对本实验室所使用的Sysmex KX-21、Sysmex SE-9500和Beckman Coulter Ac．T 5diff三台血细胞分析仪的准确度、精密度、线性度分别进行评价，选定其中一台指标最优的仪器作为比对仪器，将另外两台仪器的血细胞参数进行调整。结果 因Sysmex KX-21的WBC、RBC、HGB及PLT四项指标的准确度、精密度、线性度均较理想，故选为比对仪器。Sysmex SE-6500和Beckman Coulter Ac．T 5diff有部分指标的部分评价项目与Svsmex KX-21有偏差。对有偏差的项目进行调整后，三台仪器的四项指标的相关系数的平方均不低于0．95。结论 同一实验室在使用不同型号的血细胞分析仪时，应对其进行相互校准。校准后，保证三台仪器的检测结果具有可比性。     

异甘草酸镁注射液人体内药动学研究

 目的研究异甘草酸镁的血药浓度测定方法及其在人体内的药动学。方法10名健康志愿者,单剂量静脉滴注异甘草酸镁注射液,在设计的时间点取静脉血,血药浓度采用高效液相色谱-紫外检测法测定。药动学参数采用3P87程序计算。结果单次静脉滴注异甘草酸镁200mg后的主要药动学参数:c_max(实测值)为(67.58±8.84)mg·L^-1,t_1/2α为(1.46±0.35)h,t_1/2β(23.95±4.72)h,V_d为(2.921±0.382)L,CL为(0.:186±0.048)L·h^-1,k₁₀为(0.064±0.016)h^-1,AUC_0-1(以梯形法计算)为(1015.29±225.14)mg·h·L^-1。结论本方法简单、快速,灵敏度和准确度较高,适合临床药动学研究。健康志愿者静脉滴注异甘草酸镁注射液后的体内过程呈线性特征,符合一级消除的二房室模型,从而指导临床合理用药。