人白血病细胞裸鼠异种移植模型的建立

我们成功地将人T淋巴细胞白血病细胞（MOLT－4）、人早幼粒细胞白血病细胞（HL-60）移植到裸鼠体内。裸鼠经环磷酰胺（2.5mg／只）预处理后分别将（5～10）×10~6MOLT-4细胞及（2～4）×10~7HL－60细胞移植到动物皮下能形成实体瘤，该肿瘤呈进行性生长。MOLT－肿瘤在裸鼠间连续传代4次，移植成功率为69.2％，HL-60肿瘤连续传代3次，成功率为100％。肿瘤染色体分析属于人体细胞核型，细胞学研究显示裸鼠体内MOLT-4、HL-60细胞与体外培养的细胞具有良好的一致性，故裸鼠体内MOLT-4、HL-60肿瘤模型的建立对于研究人白血病提供了有用工具。     

抗人胸腺细胞球蛋白与柔红霉素交联方法及其偶联物体外抗肿瘤作用

分别用12.5％、25.0％、50.0％、75.0％和100.0％氧化的Dex T_(10)作为交联剂交联抗人胸腺细胞球蛋白(AHTG)和柔红霉素(DNR)形成免疫偶联物(AHTG-Dex-DNR),其中以25.0％氧化的DexT10作为交联剂最佳。它既提高了偶联物的交联度,又降低了硼氢化钠对AH-TG和DNR活性的损伤。偶联物对靶细胞CEM 24h细胞毒试验LD_(50)为10.68μg/ml。对非靶细胞K562仅有轻微杀伤作用,10min细胞毒试验为特异的杀灭肿瘤细胞试验,对CEM的LD_(50)为14.79μg/ml,对K562几乎无细胞毒作用,表明免疫偶联物有特异性细胞毒作用。     

快速杂交法定量检测HBV DNA及临床应用

目的：介绍一种快速定量检测HBV DNA的方法及临床初步应用。方法：对40例乙型肝炎病毒表面抗原阳性的慢性乙型肝炎患者共79份血清标本，采用Digene第二代杂交捕获试验(Hybrid Capture Ⅱ,HCⅡ,v2.0)定量检测HBV DNA，并与分枝链DNA信号扩增试验(bDNA，v1.0)作比较。结果：79份HBsAg阳性血清中，HCⅡ检出HBV DNA57份(72．2％)，bDNA法为45份(57％)，HCⅡ敏感性略高于bDNA法；2种方法定量检测HBV DNA的符合率为85.9％，相关性良好(r＝0．95)；19例抗病毒治疗乙肝患者，治疗后平均HBV DNA载量下降2(Log10)数量级，6例发生e抗原血清转换的患者平均HBV DNA载量下降3(Log10)数量级以上，且HBV DNA阴转早于e抗原血清转换。结论：HCⅡ比bDNA更为简便、经济、快速，可用于临床HBV DNA水平的定量检测、监控及抗病毒药物的筛选、考核。     

共刺激分子B7在移植免疫中的研究现状及展望

B7家族成员是最重要的共刺激分子,其中对B7-1、B7-2分子的研究最为深入,近年来,该家族中B7-H1、B7-H2、B7-H3、B7-DC、B7-H4等新成员也被陆续发现,其作用机制主要是为T细胞活化提供所需的正性和负性共刺激信号,通过复杂的网络平衡作用决定最终的免疫效应。随着器官移植的迅速发展,诱导对移植物的特异性耐受成为解决移植排斥的重要途径,正性共刺激通路B7CD28通路、B7-H2ICOS通路、B7-H3通路的过度活化,以及负性共刺激通路B7CT-LA-4通路、B7-H1、B7-DCPD-1通路、B7-H4BTLA通路的发现,在移植免疫中意义尤为突出。     

CS-3000 plus血细胞分离机在治疗性血液成分单采中的临床应用

【目的】观察应用CS-3000plus血细胞分离机进行治疗性血液成分单采的临床疗效，分析影响血液成分单采效果的相关因素。【方法】对87例患者应用CS-3000plus血细胞分离机进行161次治疗性血液成分单采，分析临床效果和实验室指标的改善情况。【结果】应用CS-3000plus血细胞分离机进行血浆置换后，71．43％患者临床症状、体征或者实验室指标取得明显改善。相关分析提示，进行治疗性血细胞成分单采患者的白细胞、血小板、红细胞、血红蛋白、红细胞比容下降值与采前相应初始值均呈正相关（P〈0．05）。白细胞单采术的患者白细胞计数下降值与处理全血量呈正相关（P〈0．05），在处理血量达到5000～7000ml时，血小板单采术患者血小板计数下降值与处理全血量无明显相关性（P〉0．05）。当处理全血量达到500～800ml时，红细胞单采术患者红细胞、血红蛋白、红细胞比容下降值与处理全血量无明显相关性（P〉0．05）。【结论】应用CS-3000plus血细胞分离机进行治疗性血液成分单采对迅速缓解临床症状，减少并发症的发生和提高临床药物治疗效果均有较大意义。合理设定全血处理量，调整采集相关参数，有助于采集的顺利进行和采集效果的进一步提高。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐抑制NF-κB活化对HL-60细胞的化疗增敏作用

目的：探讨化疗诱导性核因子κB的活化机制及抗氧化抑制NF-κB活化对白血病细胞凋亡及化疗敏感性的影响。 方法： 采用间接免疫荧光方法和凝胶迁移率变动试验（EMSA）观察不同浓度的化疗药物单独或与抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）联合作用于HL-60细胞后NF-κB的活化反应；运用流式细胞术和MTT试验比较NF-κB活化及活化抑制对HL-60细胞凋亡及化疗敏感性的影响。 结果： EMSA试验表明，柔红霉素（DNR）和足叶乙甙（VP-16）均呈剂量依赖性诱导NF-κB活化；RelA亚基位于细胞核进一步证实了NF-κB活化。PDTC呈剂量依赖性抑制诱导性NF-κB活化，当其浓度达到100 μmol/L时，NF-κB活化被完全抑制。比较PDTC干预前后细胞的凋亡反应，发现2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L VP-16诱导的细胞凋亡指数分别由(5.34±0.62)%、(10.16±0.42)%、(17.32±1.15)%增至(8.97±0.81)%、(16.01±1.06)%、(22.96±1.33%)，且PDTC显著增强DNR及VP-16对HL-60细胞的生长抑制率(P<0.01)。 结论： 反应性氧中间产物介导化疗诱导性NF-κB活化，抗氧化抑制NF-κB活化可以增进HL-60细胞凋亡及化疗敏感性。     

OSCE在全科医师转岗培训临床能力考核中的应用研究

通过客观结构化临床考试应用于全科医师转岗培训临床能力考核,体现出全科医师各站平均成绩跟总分有较大差距,且临床基本技能成绩相对较高,临床技术操作为最薄弱的环节.对全科医师关于客观结构化临床考试考核方案的问卷调查和现场调研表明,全科医师大多非常支持客观结构化临床考试考核方法,但是感觉考核的内容多时间长,身心压力大.通过以上结果,进一步改进应用于全科医师的客观结构化临床考试考核方案,并针对培养过程中的不足之处,进一步改进全科医师培训临床实践教学.     

慢性乙型肝炎恩替卡韦治疗过程中病毒动力学特点分析

Objective To analyze the viral dynamics and clinical significance during the antiviral treatment by a mathematical model.Methods Six chronic hepatitis B patients were evaluated with a kinetic model(Neumann model)during dose of 0.5 mg/d oral entecavir.Blood samples were drawn for HBV DNA measurement at week 0,2,4,12,24.Non-linear modeling was used to fit individual patient data.Results The median effectiveness in blocking viral production was 99.970%(n=6).The median half-life of viral turn-over was 1.6 d(n=6).The median half-life of infected hepatocytes was 21.3 d(n=5).Compared with the other patients,the c(virions are cleared at a rate)、ε(effectiveness)、δ(infected cell are lost at a rate)value of one patient(eg.6)were all lower and the half-life of virus and infected cells were higher,and eg.6 developed viral break-through after 38 weeks of follow-up.Conclusions Viral load decay showed a biphasic pattern during entecavir therapy which can be described with a mathematical model.The model relates processes of viral infection and replication as well as drug efficacy to model parameters.It indicates the prediction of bio-mathematical model during antiviral treatment.     

慢性乙型肝炎恩替卡韦治疗过程中病毒动力学特点分析

Objective To analyze the viral dynamics and clinical significance during the antiviral treatment by a mathematical model.Methods Six chronic hepatitis B patients were evaluated with a kinetic model(Neumann model)during dose of 0.5 mg/d oral entecavir.Blood samples were drawn for HBV DNA measurement at week 0,2,4,12,24.Non-linear modeling was used to fit individual patient data.Results The median effectiveness in blocking viral production was 99.970%(n=6).The median half-life of viral turn-over was 1.6 d(n=6).The median half-life of infected hepatocytes was 21.3 d(n=5).Compared with the other patients,the c(virions are cleared at a rate)、ε(effectiveness)、δ(infected cell are lost at a rate)value of one patient(eg.6)were all lower and the half-life of virus and infected cells were higher,and eg.6 developed viral break-through after 38 weeks of follow-up.Conclusions Viral load decay showed a biphasic pattern during entecavir therapy which can be described with a mathematical model.The model relates processes of viral infection and replication as well as drug efficacy to model parameters.It indicates the prediction of bio-mathematical model during antiviral treatment.