肾间质纤维化相关信号转导通路的研究进展

肾间质纤维化是各种原因的肾脏疾病发展至终末期肾衰竭(end-stage renal disease,ESRD)的共同途径和主要的病理基础,以胶原蛋白为主的细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)合成与降解失衡为主要特征。这一病理过程是多种细胞因子和多条细胞信号通路共同控制的结果,转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)等细胞因子分别通过TGF-β/Smad通路、P38丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路、Rho-ROCK通路、PI-3K通路等众多信号转导通路网络交互影响,共同介导肾间质纤维化复杂的病理生理变化。现综述参与肾间质纤维化的主要信号转导通路的研究进展及其存在的问题。     

PTEN-PI3K/AKT信号传导途径对胃癌细胞株MKN28凋亡的影响

目的 探讨PTEN-PI3 K/AKT信号传导途径对胃癌细胞株MKN28凋亡的调控作用及其机制.方法 构建PTEN真核表达载体,转染至胃癌细胞株MKN28中(转染组);同样方法转染空载体和等量的PBS分别作为阴性对照组和空白对照组,检测对胃癌细胞株MKN28凋亡的影响及对PI3K、AKT、Caspase-3、Caspase-9的影响.MTT检测细胞生长曲线,TUNEL染色法检测细胞凋亡,Western blot检测蛋白的表达.PI3K抑制剂LY294002处理未转染PTEN的胃癌细胞株MKN28(处理组);对照组加入等量的PBS,抑制PI3K活性后检测细胞凋亡蛋白及凋亡相关蛋白的表达.组间比较采用t检验,时间依赖性检验采用相关分析方法.结果 成功构建PTEN真核表达质粒并转染至胃癌细胞株MKN28中,获得稳定过表达PTEN的细胞模型.MTT检测发现转染组胃癌细胞株MKN28生长明显受到抑制,且呈时间依赖性(r =0.938,P＜0.05).转染组平均凋亡率达到27.86％ ±4.78％,明显高于阴性对照组的0.01％±0.01％(t=9.527,P＜0.05).转染PTEN后,转染组PI3K蛋白表达量为0.25±0.03,明显低于空白对照组的0.93 ±0.16及阴性对照组的0.96±0.15(t=7.235,8.883,P＜0.05).转染组活化的AKT (P-AKT)蛋白表达量为0.21±0.03,明显低于空白对照组的0.93 ±0.13及阴性对照组的0.91±0.12(t =9.347,9.802,P＜0.05).而转染组凋亡相关蛋白Caspase-3及Caspase-9表达量分别为0.86±0.11和0.87±0.12,明显高于阴性对照组的0.16±0.03和0.18 ±0.04及空白对照组的0.15±0.02和0.16 ±0.03(t=10.634,10.999,9.448,9.942,P＜0.05).抑制PI3K活性后,处理组细胞凋亡率为28.60％ ±4.50％,明显高于对照组的0.12％±0.06％(t=10.961,P＜0.05).Western blot检测发现处理组PI3K和P-AKT的蛋白表达量分别为0.18 ±0.02和0.11 ±0.01,明显低于对照组的0.93 ±0.14和0.90 ±0.12(t =9.186,11.363,P＜0.05);同时处理组PTEN的蛋白相对表达量为1.15 ±0.15,明显高于对照组的0.21±0.08(t =9.577,P＜0.05).处理组的凋亡相关蛋白Caspase-3及Caspase-9相对表达量分别为0.86 ±0.12和0.88 ±0.11,明显高于对照组的0.25±0.02和0.21±0.03(t =8.685,10.178,P＜0.05).结论 高表达PTEN可以抑制PI3K/AKT途径,促进胃癌细胞凋亡;抑制PI3K途径可以促进PTEN的表达,两者之间相互作用,共同调控着胃癌细胞的凋亡.     

抑制肿瘤干细胞生长的策略研究

肿瘤干细胞假说认为,肿瘤的复发和转移与肿瘤干细胞残存有密切关系。近几年的研究发现,肿瘤干细胞高表达ABC转运蛋白、抗凋亡基因高水平表达、端粒酶活性高、DNA修复能力增强,因而对放化疗不敏感,容易导致肿瘤的复发和转移。抑制肿瘤干细胞生长的微环境、抑制ABC转运蛋白的活性、阻断信号转导、导入溶瘤病毒、抑制端粒酶活性等方法抑制肿瘤干细胞将为肿瘤的临床治疗提供新的策略。     

大鼠完全性单侧输尿管梗阻可复模型的建立

目的 建立1种可复的完全性单侧输尿管梗阻大鼠模型(UUO).方法 取成年雄性大鼠42只,随机平均分为实验和对照两组,分别采用V管卡压法输尿管结扎术(实验组)和单纯丝线结扎术(对照组).3周后解除梗阻,分别在梗阻术前、术后1、2、3周和解除梗阻后1、3、6周,采用彩色多普勒超声(DCFI)分别测定积水肾肾盂前后径(APD)、最大肾皮质厚度(RCT)及肾盂容积(V),并进行大体和病理学观察.结果 两组动物在梗阻术后,随时间延长,V、APD逐渐增大,RCT逐渐减小,不同时期之间差异有统计学意义(P＜0.05).解除梗阻后,实验组V、APD渐趋减小,RCT趋向增大.对照组V、APD继续增大,RCT继续减小.结论 以V管卡压法建立的大鼠UUO模型,不仅符合急性完全梗阻性肾积水的要求,而且具有良好的可复性.该术式简单、易行,实验费用低廉.     

LeftyA蛋白对转化生长因子β1所致肾小管上皮细胞纤维化的影响

目的 观察LeftyA蛋白对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化的影响,并初步探讨其作用机制.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞,通过LipofectamineTM2000介导基因转染及药物筛选构建LeftyA蛋白稳定表达HK-2细胞系;TGF-β1(10ng/ml)刺激此细胞系,于0、6、12、24、48h通过Western blot分别检测E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及p-Smad2/3的表达变化,通过Real-time PCR检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)及结缔组织生长因子(CTGF)基因的表达变化.结果 不同浓度的TGF-β1刺激24 h后HK-2细胞内E-eadherin、α-SMA蛋白的变化均表现出明显的剂量效应,而当TGF-β1浓度达到10ng/ml时,α-SMA蛋白合成达到平台期(P＞0.01),因此本实验中以10ng/ml的TGF-β1作为刺激剂量;TGF-β1(10 ng/ml)刺激HK-2细胞6 h可引起E-cadherin表达下降(P＜0.01),刺激24 h后可诱导其合成表达α-SMA(P＜0.05),同时细胞内ColⅠ基因转录增加(P＜0.01);正常HK-2细胞内没有p-Smad2/3的表达,TGF-β1(10 ng/ml)刺激30min即可诱导其激活表达,并在1 h时迅速达到高峰,其后开始下降;高表达LeftyA蛋白能够减轻TGF-β1所致上皮细胞转分化(EMT)及纤维化的程度,降低p-Smad2/3的表达高峰,并抑制CTGF的表达(P＜0.01).结论 LeftyA蛋白能够通过抑制TGF-β1所致Smad2/3磷酸化及CTGF表达发挥抗肾小管上皮细胞纤维化的作用.     

细胞外基质复合温敏性水凝胶与膀胱上皮细胞的生物相容性

目的检验细胞外基质／温敏性水凝胶（ECM/TSH）复合支架材料与膀胱上皮细胞（UC）的生物相容性,探索其作为泌尿道组织工程支架的可行性。方法实验分为A、B、Ci组,A组为ECM／TSH复合支架种植UC组;B组为单纯ECM种植UC组;C组为单纯培养UC组,另设无细胞培养液为空白组（D组）。应用角蛋白免疫荧光染色技术鉴定细胞．应用倒置相差显微镜和扫捕电镜观察细胞的黏附和生长情况．利用MTT法检测细胞的活力。结果光镜下ECM／TSH复合支架为红染的网状结构,纤维较粗,网孔较小,未见到细胞碎片;种植UC后4h可见细胞紧密黏附于材料表面;14h可见细胞沿支架纤维伸展;3d时可见黏附于材料的细胞增多、增殖明显;扫描电镜下,可见发育良好的细胞伪足沿纤维伸展,附着牢固,细胞间连接紧密,胞膜表面有ECM分泌。MTT法示各组间细胞相对增殖率差异有统计学意义（P〈0．05）。结论ECM／TSH复合材料具有便于细胞黏附和生长的微孔结构,生物相容性好．无细胞毒性,是一种理想的组织工程材料。     

栀子糖蛋白具有氧自由基清除活性并抑制氧自由基诱导产生的蛋白激酶Cα及NF—κB

关于栀子Gardenia jasminoides Ellis糖蛋白的分离方法及其细胞生物学功能鲜有报道。作者研究了栀子糖蛋白对多种氧自由基的清除活性，同时还通过对葡萄糖／葡萄糖氧化酶（G／GO）或次黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶（HX／XO）系统诱导的NTH／3T3细胞蛋白激酶Ca（PKCa）和NF—κB活性的抑制作用，研究了其是否具有抗细胞凋亡的作用。     

代谢组学在恶性肿瘤研究中的应用进展

摘 要：代谢组学是一种系统性研究生物体内代谢物质组成和变化规律的高通量技术，以探究代谢物在生物体内的作用和调控机制。代谢重编程是恶性肿瘤的重要特征之一。在肿瘤的发生和进展过程中，生物体内代谢谱会发生变化。近年来，代谢组学技术已在恶性肿瘤研究中得到广泛应用，包括肿瘤筛查、早期诊断、疗效预测、预后评估和新药靶点研发等。全文总结代谢组学在恶性肿瘤研究进展，揭示代谢组学技术在临床应用中的潜在价值。     

细胞因子与肿瘤免疫检查点抑制剂治疗相关不良事件关系及临床价值的研究进展

免疫检查点抑制剂(ICI)的应用显著提高了不同类型恶性肿瘤的疗效, 但其引起的免疫治疗相关不良事件(irAE)涉及多个器官和系统, 影响治疗, 威胁患者健康, 甚至危及生命。因此, 需要选择生物标志物来预测、监测irAE的发生, 帮助高风险患者早期诊断, 指导个体化治疗。研究表明, 某些细胞因子参与了irAE的发生、发展。文章就细胞因子与irAE的相关研究进行综述, 为临床预测和监测irAE提供参考。     

中国临床肿瘤学会肺癌诊疗指南(2018版)更新解读

<正>在世界范围内,肺癌是发病率和病死率均排名第一的恶性肿瘤,多数病人确诊时已属晚期,预后常不佳。因此,基于循证医学证据,同时结合我国国情,中国临床肿瘤学会(CSCO)在2016年首次发布了《原发性肺癌诊疗指南》,今年迎来了该指南的第二次更新。2018版《原发性肺癌诊疗指南》(新版《指南》)在2017版的基础上吸收了精准医学的新进展,对肺癌分子分型及基于病理类型、分期和分子分型的综合治疗与时