正常孕妇妊娠各期甲状腺激素参考范围的建立及其临床意义

目的建立本地区正常孕妇早、中、晚孕期甲状腺激素的参考值范围,探讨其变化规律及临床意义。方法采用罗氏E601电化学发光仪测定本地区单胎妊娠健康妇女早、中、晚孕期及年龄匹配非妊娠妇女的甲状腺激素水平并建立各自的参考范围。其中孕早期448例,孕中期451例,孕晚期428例,非妊娠妇女150例。结果早、中、晚孕妇女及非妊娠妇女的甲状腺激素水平均呈偏态分布,以中位数（M）及双侧限值（P2．5～P97．5）表示其参考范围。TSH在早[1．10（0．23～3．58）]、中[2．07（0．13～3．96）]、晚孕期[2．62（1．08～3．62）]逐渐上升,各期两两比较差异有统计学意义（P〈0．017）,晚孕期略低于非妊娠妇女[2．63（1．00～5．14）】但差异无统计学意义（P〉0．05）。FT3和FT4在早[4．80（4．25～6．23）;17．56（11．65－22．16）]、中[4．45（3．84～5．18）;14．16（9．49～20．14）]、晚孕期[4．14（3．98～4．45）;12．38（10．13～15．88）]逐渐降低,各期两两比饺差异有统计学意义（P〈0．017）,早孕期低于非妊娠妇女[5．01（4．02~6．12）;18．71（14．35－21．69）]且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论正常孕妇的甲状腺激素水平明显不同非妊娠妇女,早、中、晚孕期之间也存在显著差异,建立正常孕妇妊娠各期甲状腺激素参考范围将有助于妊娠期甲状腺功能紊乱的临床诊疗。     

习惯性流产患者绒毛和蜕膜中Treg/Th17免疫失衡的检测及其临床意义

目的探讨绒毛和蜕膜中调节性T细胞(Treg)/Th17免疫失衡在习惯性流产(RSA)患者免疫发病机制中的作用。方法收集RSA患者和自愿终止妊娠的早孕妇女(正常对照组)的绒毛和蜕膜,采用流式细胞术检测其中Treg和Th17细胞数量,采用RT-PCR检测其中叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)的mRNA水平;收集RSA患者和正常对照组的外周血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其中转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-10、IL-17A和IL-17F的水平;统计分析Treg细胞和其相关细胞因子、Th17细胞和其相关细胞因子之间的相关性。结果和正常对照组比较,RSA患者绒毛和蜕膜中Th17细胞明显增多(均P0.01),Treg细胞明显减少(均P0.01),RORγt的mRNA水平明显升高(均P0.01),Foxp3的mRNA水平明显降低(均P0.01);RSA患者外周血中IL-17A和IL-17F水平明显升高(均P0.01),TGF-β和IL-10水平明显降低(均P0.01);RSA患者和正常对照组Treg细胞数量和TGF-β及IL-10水平、Th17细胞数量和IL-17A及IL-17F水平均呈正相关(均P0.01)。结论绒毛和蜕膜中Treg/Th17免疫失衡可能与RSA的免疫发病机制有关。     

G6PD缺陷诱发人黑色素瘤A375细胞凋亡机制研究

目的：探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD）缺陷对A375细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法：以A375-WT和A375-G6PDΔ细胞为模型,用Real-time PCR检测G6PD mRNA表达,蛋白质印迹法检测G6PD、Bcl-2、Bcl-xL、STAT5和P-STAT5蛋白的表达,紫外分光光度法测定G6PD酶活性,Heochst 33342/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化观察STAT5蛋白核迁移。结果：A375-WT和A375-G6PDΔ细胞中G6PD mRNA分别为0.545±0.13和0.207±0.03,降低了62.02%,t=-5.854,P=0.028;G6PD蛋白分别为0.975±0.16和0.227±0.10,降低了76.72%,t=-21.593,P=0.002;G6PD酶的比活性分别为（0.088±0.023）和（0.024±0.008）U/mg;降低了72.23%,t=-7.390,P=0.018;A375-G6PDΔ细胞的凋亡率为（8.62±1.67）%,比A375-WT细胞的（2.37±0.78）%升高了3.64倍,t=-12.163,P=0.007;A375-G6PDΔ细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量为0.245±0.037,比A375-WT细胞的0.578±0.073降低了57.61%,t=-16.021,P=0.004;Bcl-xL的表达量为0.138±0.019,比A375-WT细胞的0.287±0.067降低了51.92%,t=-5.377,P=0.033;A375-G6PDΔ细胞的P-STAT5/STAT5比值为0.72±0.201,比A375-WT细胞的2.28±0.367降低了68.4%（P=0.004）,细胞核内STAT5表达为0.051±0.012,比A375-WT细胞核的STAT5蛋白（0.093±0.018）降低了45%（P=0.007）,STAT5核迁移减少。结论：转录因子STAT5磷酸化降低、活性下降是G6PD缺陷所诱发的人黑色素瘤A375细胞凋亡的重要因素之一,为黑色素瘤发生及治疗的研究提供了新的思路。