人瘢痕疙瘩成纤维细胞中P53蛋白对血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的:观察人瘢痕疙瘩成纤维细胞中的P53蛋白对血管内皮细胞生长因子表达的影响作用。方法:实验于2005-05/11在哈尔滨医科大学第二临床医学院实验室完成。成纤维细胞来源哈尔滨医科大学附属第二医院整形美容激光中心收治的烧伤患者的瘢痕疙瘩组织(临床病理证实)。将瘢痕疙瘩切成1mm×1mm组织块,用含体积分数为0.2的胎牛血清的1640培养液,置于37℃,体积分数为0.05的CO2条件下培养,取3～6代细胞。采用腺病毒介导法将野生型p53基因转染至人瘢痕疙瘩成纤维细胞中,非转染细胞为对照组。应用间接免疫荧光法和westernblott法检测P53蛋白;应用酶联免疫吸附法检测血管内皮细胞生长因子表达。结果:①间接免疫荧光法检测P53蛋白:P53蛋白表达在细胞核内,转染组和非转染组细胞中均有P53蛋白表达,转染组细胞内P53蛋白表达明显高于非转染组细胞。②Westernblot法检测P53蛋白:转染组和非转染组细胞中均有P53蛋白表达,但非转染组细胞内P53蛋白表达量很少;转染组细胞在转染48h后,细胞中P53蛋白表达量高;明显高于非转染组细胞。③酶联免疫吸附法测定血管内皮细胞生长因子:转染组和非转染组细胞中均检测出血管内皮细胞生长因子表达,但转染组细胞血管内皮细胞生长因子表达显著低于非转染组细胞(P<0.01)。结论:P53蛋白能够明显抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞血管内皮细胞生长因子表达。     

山西耳聋四家系分子病因学分析

目的应用分子生物学方法对耳聋四家系14例标本就耳聋热点突变基因进行筛查,分析四家系的耳聋病因。方法结合临床症状运用基因芯片、酶切和测序的方法对四家系耳聋的致病原因进行分析。结果芯片检测和测序显示:家系1患者IVA7-2A>G杂合突变来自母亲,c.C1229T突变来自父亲;家系2患者c.G79A(p.V27I)和c.A341G(p.R114G)来自母亲,GJB2 c.T70A(p.W24R)为体细胞突变;家系3患者c.G79A(p.V27I)和c.A341G(p.R114G)双杂合突变均来自父亲;家系4患者GJB2 235delC纯合缺失来自父母双方,c.G79A(p.V27I)和c.G232A(p.A78Y)杂合突变均来自母亲。结论本研究通过分子生物学的手段从基因的角度阐述了四家系的病因,为患者以后的优生优育及完善耳聋基因突变数据库奠定了基础。     

p53蛋白对瘢痕疙瘩成纤维细胞端粒酶活性的抑制作用

目的探讨p53蛋白对瘢痕疙瘩成纤维细胞中端粒酶活性的影响,明确p53蛋白与端粒酶活性之间的相互关系。方法将取自于瘢痕疙瘩患者的瘢痕疙瘩组织标本随机分成A、B两组。A组：采用腺病毒介导法,将野生型p53基因转染至瘢痕疙瘩成纤维细胞中;B组：未将野生型p53基因转染至瘢痕疙瘩成纤维细胞中。用间接免疫荧光和Western blot两种方法检测A、B两组成纤维细胞中p53蛋白的表达,用TRAP-ELISA法检测A、B两组成纤维细胞中端粒酶活性。结果A组的成纤维细胞中p53蛋白的表达明显高于B组;而端粒酶活性明显低于B组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论p53蛋白能够抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中端粒酶的活性。     

四大怀药“滋补”焦作

市财政每年支出300万,扶持怀药企业,不论“公”、“私”培育儿百家加工企业,附加值越来越多的留在当地创名牌成为当地怀药企业的共识     

人瘢痕疙瘩成纤维细胞中P53蛋白对血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的：观察人瘢痕疙瘩成纤维细胞中的P53蛋白对血管内皮细胞生长因子表达的影响作用。 方法：实验于2005-05／11在哈尔滨医科大学第二临床医学院实验室完成。成纤维细胞来源哈尔滨医科大学附属第二医院整形美容激光中心收治的烧伤患者的瘢痕疙瘩组织（临床病理证实）。将瘢痕疙瘩切成1mm&;#215;1mm组织块，用含体积分数为0．2的胎牛血清的1640培养液，置于37℃，体积分数为0．05的CO2条件下培养，取3-6代细胞。采用腺病毒介导法将野生型p53基因转染至人瘢痕疙瘩成纤维细胞中，非转染细胞为对照组。应用间接免疫荧光法和western blott法检测P53蛋白；应用酶联免疫吸附法检测血管内皮细胞生长因子表达。 结果：①间接免疫荧光法检测P53蛋白：P53蛋白表达在细胞核内，转染组和非转染组细胞中均有P53蛋白表达，转染组细胞内P53蛋白表达明显高于非转染组细胞。②Westem blot法检测P53蛋白：转染组和非转染组细胞中均有P53蛋白表达，但非转染组细胞内P53蛋白表达量很少；转染组细胞在转染48h后，细胞中P53蛋白表达量高；明显高于非转染组细胞。③酶联免疫吸附法测定血管内皮细胞生长因子：转染组和非转染组细胞中均检测出血管内皮细胞生长因子表达，但转染组细胞血管内皮细胞生长因子表达显著低于非转染组细胞（P〈0．01）。 结论：P53蛋白能够明显抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞血管内皮细胞生长因子表达。     

wt-P53蛋白对人瘢痕疙瘩成纤维细胞端粒酶活性的影响

目的 探讨wt-P53蛋白对人瘢痕疙瘩成纤维细胞（keloidfibroblasts，KFBS）端粒酶活性的影响；明确在人KFBs中wt-P53蛋白与端粒酶活性之间的相互关系。方法 将来源于人瘢痕疙瘩组织的KFBs随机分成两组，转染组采用腺病毒介导法将野生型Wt-p53基因转染至人KFBs；非转染组KFBs未进行野生型wt-p53基因转染。转染48h后，采用间接免疫荧光法和Western blotting法检测KFBs wt-P53蛋白的表达；并于转染后1～7d，采用TRAP—ELISA法检测KFBs端粒酶活性。结果两组均有wt-P53蛋白表达，转染组Wt-P53蛋白表达明显高于非转染组；转染后1～7d，转染组端粒酶活性均明显低于非转染组（P〈O．05）。结论 wt-P53蛋白能够抑制人KFBs端粒酶活性。     

UNI-3000微波热疗机对家猪脏器功能与组织学改变的实验研究

热疗能有效地杀伤恶性肿瘤细胞,与放疗、化疗产生互补作用,增加放疗、化疗敏感性,减轻放疗、化疗不良反应。为了解UNI 3000型微波热疗机基础特性和对机体全身加温的确切性和安全性设计本实验,现将结果报道如下。     

GJB2基因V27I和E114G位点与耳聋相关性的研究

目的通过对127例耳聋患者和127例健康人GJB2基因测序,探讨V27I和E114G位点与耳聋发生及发展的相关性。方法采用聚合酶链式反应(PCR)扩增所有标本的GJB2基因区段,测序分析扩增产物。结果 V27I+E114G双杂合和V27I+E114G非双杂合突变,在127例耳聋患者中分别检测到37和14例患者,127名对照组成员中分别检测到18和12名成员,SPSS 13.0统计软件分析,V27I+E114G双杂合、V27I+E114G非双杂合在耳聋组和对照组中均无显著相关性(P>0.05)。此外,3个家系的患者GJB2基因均显示V27I+E114G双杂合,家系其他成员为V27I+E114G非双杂合。结论部分家系研究结果提示V27I+E114G双杂合可能是引发耳聋的一个原因,因此,深入探讨V27I+E114G双杂合在耳聋发生发展中的作用,为明确病因及预防耳聋发生提供理论基础。