靶向纳米转基因载体在头颈肿瘤中的研究现状

近年来利用纳米栽体传递药物和转移基因的报道颇多。本文主要就纳米基因转移栽体的分类，在头颈肿瘤基因治疗中靶向性的获得与提高，以及存在问题与展望等作一综述。     

曲安奈德治疗口腔疾病的临床应用及经验

曲安奈德(triamcinolone acetonide)，商品名同息通，曾用名曲安缩松、曲安舒松等，是一种人工合成的长效含氟肾上腺糖皮质激素(激素)，半衰期约5小时。该药的抗炎作用强而持久，以肌内注射为例，注射后需数小时起效，约1～2日发挥其最大效应，可持续作用2～3周。曲安奈德的主要药理作用包括抗炎症反应、抗休克、抗毒素     

基质金属蛋白酶与Ⅳ型胶原在成釉细胞瘤的表达

目的探讨基质金属蛋白酶和Ⅳ型胶原与成釉细胞瘤复发、侵袭的关系。方法采用免疫组织化学LABC方法检测28例成釉细胞瘤组织中MMP-2、TIMP-2和Ⅳ型胶原的表达,并用RT-PCR方法检测MMP-2、TIMP-2和MT1-MMP在20例成釉细胞瘤的表达。结果MMP-2、TIMP-2和Ⅳ型胶原蛋白在成釉细胞瘤的阳性表达率分别为92.9%、75.0%和42.9%,Ⅳ型胶原阳性着色部位均位于基底膜及部分肿瘤细胞的胞质,MMP-2和TIMP-2阳性着色部位均位于细胞质,分布于瘤组织各层;复发性成釉细胞瘤Ⅳ型胶原的阳性表达率明显低于原发性成釉细胞瘤(P<0.01)。MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的mRNA在成釉细胞瘤组织中均有表达,复发性成釉细胞瘤的TIMP-2、MT1-MMP相对含量均显著高于原发性成釉细胞瘤(P<0.01)。结论基质金属蛋白酶MT1-MMP表达增加和Ⅳ型胶原在基底膜表达缺失与成釉细胞瘤的复发密切相关,MMP-2活性增加和基底膜Ⅳ型胶原降解增多可能是成釉细胞瘤局部侵袭的机制之一。     

INK 4家族与头颈肿瘤研究新进展

细胞恶变的基础是细胞周期调节失控,其中抑癌基因的失活起了重要的作用。研究表明,INK4蛋白家族是最重要的细胞周期调节蛋白,与人类多种肿瘤的发生、发展密切相关,本文对INK4家族各成员与头颈肿瘤关系,包括各蛋白和基因的结构特点、生物学特性及调控机理、在头颈肿瘤中的变异情况和失活机制等进行综述。     

基质金属蛋白酶-2活性与成釉细胞瘤增殖生长关系的研究

目的 探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）活性与成釉细胞瘤增殖生长的关系及其在成釉细胞瘤侵袭中的作用。方法 通过MMP-2抑制剂Ro31-9790抑制MMP-2活性进行干预处理,采用成釉细胞瘤细胞原代培养、瘤组织块裸鼠肾包膜下移植、MTT、流式细胞术、瘤体积测量和组织学检查等方法,观察MMP-2活性与成釉细胞瘤增殖生长的关系。结果 实验各组之间在同一时间点的细胞增殖活性均无显著性差异（P＞0.05）。G0/G1、G2/M期细胞比率以及凋亡细胞比率不随Ro31-9790浓度增加而增加,S期细胞比率也不随Ro31-9790浓度增加而减少。Ro31-9790治疗组瘤体积明显小于对照组（P＜0.05）,瘤体积增加也明显少于对照组（P＜0.01）。结论 Ro31-9790对成釉细胞瘤细胞的体外增殖活性无影响,但可抑制体内移植瘤的生长,MMP-2活性与成釉细胞瘤细胞的增殖活性无关,但与成釉细胞瘤的生长密切相关,可能是成釉细胞瘤局部侵袭的机制之一。     

舌鳞癌中“瘤芽”的病理学特征及其与上皮-间质转化之间的关系

目的:探讨"瘤芽"(tumor budding)在舌鳞癌中的病理学特征及其与上皮-间质转化(EMT)的关系。方法:HE染色评估230例舌鳞癌组织标本中肿瘤侵袭前沿和"瘤芽"的分布情况;免疫组织化学染色检测E-cadherin和Vimentin在舌癌中的表达及分布;应用SPSS13.0软件包进行Sperman相关分析,探讨"瘤芽"与临床、病理参数之间的关系,Kaplan-Meier法和Logrank分析生存率。结果:在舌鳞癌组织切片中,可见"瘤芽"位于肿瘤侵袭前缘,为单个或小于5个成簇的癌细胞。在230例病例中,111例标本呈现出高"瘤芽"状态(≥5个"瘤芽"/HPF),119例标本表现出低"瘤芽"状态(<5个"瘤芽"/HPF);"瘤芽"与肿瘤大小(P<0.05)、分化程度(P<0.05)、临床分期(P<0.05)以及淋巴结转移(P<0.001)呈正相关;与患者预后呈负相关,可作为舌鳞癌患者的独立预后判断指标(P=0.0014);构成"瘤芽"的癌细胞形态可由多边形、鱼鳞状转变成长梭形、成纤维细胞样;"瘤芽"与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.01),与Vimentin的表达呈正相关(P<0.01),提示"瘤芽"与EMT相关,是EMT在组织形态学上的一种表现。结论:"瘤芽"与EMT密切相关,代表恶性程度更高的癌细胞亚群,可作为舌鳞癌患者独立的预后判断指标。     

化疗耐药相关蛋白在舌鳞状细胞癌中的表达和意义

目的：多药耐药相关蛋白1（MRP1）、肺耐药相关蛋白（LRP）、拓扑异构酶Ⅱβ（TOPOUp）和B细胞淋巴瘤2（BCL2）是公认的肿瘤化疗耐药相关蛋白。本研究主要评估这些耐药相关蛋白在舌鳞癌临床标本和体外化疗耐药模型中的表达差异．以及与舌鳞癌临床病理分期的相关性。方法：采用免疫组织化学法检测65例舌鳞癌标本中MRP1、LRP、TOPOIIB和BCL2的表达,分析其与临床病理指标的相关性。采用顺铂逐步诱导SCC15细胞建立体外化疗耐药模型．MTY法检测细胞药敏性改变．免疫荧光检测耐药蛋白的表达变化,蛋白印迹法检测临床标本与舌鳞癌细胞中耐药蛋白的表达差异。应用SPSS16．0软件包对数据进行Mann-WhitnevU检验、Kruskal—WallisH检验、Spearman相关性分析和单因素方差分析。结果：舌鳞癌组织中MRP1、LRP和BCL2高表达,而TOP0118的表达低于癌旁非肿瘤上皮组织（P〈0．05）：MRP1和TOPOIIB的表达与临床分期、淋巴结转移和组织学分级相关,LRP的表达与组织学分级相关（P〈0．05）。SCC15／CDDP耐药细胞株中,MRP1、LRP和BCL2的表达高于舌鳞癌组织,而TOPOIIB的表达显著低于舌鳞癌组织。结论：舌鳞癌标本中MRP1、LRP、BCL2的高表达和TOPOⅡβ的低表达与肿瘤分化程度和化疗耐药相关．提示舌鳞癌患者中存在原发性耐药现象。     

转化生长因子β1诱导人舌鳞状细胞癌细胞上皮-间质转化及其顺铂耐药性研究

目的 利用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞CAL27、顺铂耐药细胞CAL27-res发生上皮-间质转化(EMT),建立TSCC细胞发生EMT的实验研究模型.研究EMT对TSCC细胞顺铂耐药性及细胞增殖、凋亡的影响.方法 10 ng/ml的TGF-β1处理CAL27、CAL27-res细胞8 d,观察细胞形态学变化,Western blot 和细胞免疫荧光验证EMT相关上皮标记蛋白及间质标记蛋白表达的变化,划痕试验检测细胞迁移能力的变化,MTT法检测细胞半抑制率(It50),免疫荧光检测MDR、MRP、Topo Ⅱβ的表达,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡.结果 TGF-β1 可诱导CAL27、CAL27-res向间质细胞形态转化,并且下调上皮相关标记蛋白E-cadherin的表达,上调间质相关标记蛋白Vimentin的表达,细胞的迁移能力明显增强.IE50分别提高2.31倍(CAL27)和1.72倍(CAL27-res),MDR和MRP表达升高,Topo Ⅱβ表达降低.细胞增殖指数(PI)均明显降低(CAL27:χ2=16.799,P<0.001;CAL27-res:χ2=25.375,P<0.001),细胞凋亡指数(AI)均明显升高(CAL27:χ2=165.0797,P<0.001;CAL27-res:χ2=196.5640,P<0.001).结论 TGF-β1能够成功诱导CAL27、CAL27-res发生EMT并且明显增强细胞对顺铂的耐药性,同时抑制细胞增殖,促进凋亡.     

舌鳞癌组织中p15蛋白表达与其生物学行为及预后的关系

[目的]检测p15蛋白在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达,探讨其与临床病理及预后的关系。[方法]应用免疫组化超敏S-P法检测45例TSCC和10例正常舌组织中p15蛋白的表达,染色结果进一步用图像分析仪定量测定。[结果]TSCC中p15表达缺失率为46.7％(21/45);临床Ⅰ、Ⅱ期p15表达水平(54.25±21.14)明显高于Ⅲ、Ⅳ期(29.62±9.28),无颈淋巴结转移组(59.05±18.03)明显高于有转移组(26.83±8.58),各组间差异显著(P<0.05);Cox模型分析表明p15缺失与预后不良有关(P<0.05)。[结论]p15蛋白表达缺失是TSCC发生发展中较常见分子事件,对准确评估TSCC的生物学行为和预后有重要的临床意义。     

PAMAM-D介导EGFP基因转染人舌鳞癌细胞的实验研究

目的:优化聚酰胺-胺型树枝状高聚物(PAMAM-D)纳米载体介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染人舌鳞癌Tca8113细胞的条件,以获得最佳的转染效率和细胞内表达。方法:采用不同的质粒DNA浓度、PAMAM-D代数、PAMAM-D∶DNA质量比以及转染时间等参数,在激光共聚焦显微镜下,观察PAMAM-D介导pEGFP-N1体外转染Tca8113细胞,检测转染效率,并应用单因素方差分析等统计学方法进行比较分析;结合细胞生长和荧光蛋白的表达情况,进一步评估和优化转染条件。结果:1.0μg质粒DNA与2.0μlG5PAMAM-D形成复合物,转染细胞2h后,可获得最佳的转染效率(42.1%);G5PAMAM-D转染效率显著高于G2PAMAM-D(42.1%比19.4%,P<0.05);PAMAM-D基因转移系统对细胞的生长增殖无显著影响(P>0.05)。结论:PAMAM-D纳米载体在优化的转染条件下,可安全高效地介导目的基因转染Tca8113细胞,是一种较理想的基因转移系统。